Contador De Colonias

Practica num 4 . Medio de cultivo

Fundamento:

Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento

y otros componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los

microorganismos. Puesto que la diversidad metabólica de los microorganismos es

enorme, la variedad de medios de cultivo es también muy grande. La mayoría de los

medios de cultivo se comercializan en forma de liofilizados que es preciso rehidratar.

La preparación de un medio de cultivo se reduce en general a pesar la cantidad de

medio y redisolverla en agua destilada (libre de inhibidores del crecimiento)

siguiendo las instrucciones del fabricante. Las sustancias termolábiles se esterilizan

por filtración y se añaden al resto de los componentes previamente esterilizados en el

autoclave.

Los constituyentes habituales de los medios de cultivo son:

1. Agar. Se utiliza como agente solidificante. Es un polisacárido que se obtiene

de ciertas algas marinas. Las bacterias no son capaces de

degradarlo.

Objetivo : Preparación de medios de cultivo y siembra de bacterias en medios

de cultivo y Esterilización.

Con esta práctica se pretende aprender las técnicas de preparación de

diferentes medios de cultivo, su esterilización y su almacenaje, así como la

importancia de los diferentes medios de cultivo y su uso. Además también se

pretende que el alumno se familiarice con las técnicas empleadas en

Microbiología para el cultivo y la manipulación de microorganismos en

condiciones de esterilidad.

Siembra de microorganismos

En términos microbiológicos se entiende por SIEMBRA el proceso

mediante el cual se lleva una porción de una población de microorganismos (inóculo)

de un cultivo bacteriano a un medio nutritivo para su crecimiento.

Utensilios:

1 matraz erlenmeyer de 250 mil

1 matraz erlenmeyer de 500 mil

un merchero

una mangera

3 tubos de ensaye

un mortero con pistilo

gradilla

un tripoide

10 cajas petri

espatula

balanza granataria

rejilla de asbesto

Procedimiento:

1. Primero tomamos la muestra y con ayuda de un mortero y un pistilo la trituramos.

2. pesamos la muestra.

3. Agregamos la muestra ya pesada en 50 mil de aguaa destilada en el matraz erlenmeyer de 250 mil.

4. despues para la preparacion de agar pesamos el agrar en unabalanza.

5. introducimos el agar previamente pesado en un matraz con agua destilada.

6. Se omogenizo el agua con el agar

7. se puso el agra a ebullision

8. una vez que el agar estaba listo se limpio el area con alcohol.

9. se le dio un fogonazo.

10. se acomodaron las cajas petri alrededor del merchero.

11. se realizo el proceso de agregar el agar en las cajas petri.

12. se dejo un rato para que saliera el vapor

13. despues se cerraron y degaron secar y por ultimo se realizo el restiado

14. Se dejo enfriar y se envolvio

CUENTA TOTAL EN PLACAS

La técnica se basa en contar las “unidades formadoras de colonias” o UFC presentes en un gramo o mililitro de muestra. Se considera que cada colonia que desarrolla en el medio de cultivo de elección después de un cierto tiempo de incubación.

después de esperar los 8 días ya se desarrollaron colonias en las cajas

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