Empleo De ácido Abscísico, Manitol Y La Disminución De La Concentración De Las Sales Del Medio De Cultivo En La Conservación In Vitro De Ipomoea Batatas

Artículo científico Biotecnologia vegetal vol. 2: 39-42, enero-marzo 2002

MATERIALES Y MÉTODOS

Plantas in vitro de boniato del clon Jewel, mantenidas

en medio de cultivo sólido constituido por las sales

de Murashige y Skoog (MS) 1962, complementadas

con ácido giberélico (10.0 mg.l-1), ácido indolacético

(0.05 mg.l-1), tiamina (1.0 mg.l-1), mioinositol (100

mg.l-1) y sacarosa (30.0 g.l-1) se emplearon como

material donante. Para todos los tratamientos se

utilizaron como explantes segmentos nodales de

aproximadamente 2.0 cm de longitud y el medio de

cultivo base empleado fue el formado por las sales

MS (1962), sacarosa (30.0 g.l-1), tiamina (1.0 mg.l-1)

al que se añadió ácido abscísico (0.0, 1.0, 5.0 y 10.0

mg.l-1) en un primer experimento y manitol (0.0, 10.0,

15,0 y 20.0 g.l-1) en un segundo experimento. En el

tercer experimento se emplearon las sales MS (1962)

a diferentes concentraciones (25, 50, 75 y 100%).

Para todos los medios de cultivo el pH fue ajustado

a 5.7 y se solidificaron con phytagel (2.5 g.l-1). Los

mismos se esterilizaron en autoclave durante 20

minutos a 120°C y 150 kPa y se distribuyeron a

razón de 10.0 ml en tubos de ensayos de 2.0 cm

de diámetro y 15.0 cm de largo. Los explantes se

cultivaron a razón de uno por tubo de ensayo y se

incubaron en condiciones de iluminación solar de

45-54 μmolm-2s-1 de intensidad luminosa, humedad

relativa de 80-85% y 25±2°C de temperatura. Se

emplearon 30 segmentos nodales tratamiento. Las

variables: porcentaje de supervivencia, número de

yemas y raíces y longitud de las plantas fueron

evaluadas a los siete meses para los experimentos

donde se empleó ácido abscísico y manitol y a los

cuatro meses para las diferentes concentraciones

de las sales MS (1962). Con el objetivo de evaluar

la recuperación del material se tomaron cinco

Tabla 1. Comportamiento de plantas in vitro de boniato conservadas durante siete meses empleando ácido abscísico.

ABA

(mg.l-1)

Supervivencia

(%)

Número de

raíces

Número de

yemas

Longitud del

tallo (cm)

Recuperación

(%)

0.0 80.00 41.80 a 12.80 a 14.80 a 100.00

1.0 85.00 40.66 a 12.83 a 10.66 b 100.00

5.0 85.00 2.60 b 1.60 c 0.60 c 100.00

10.0 90.00 2.28 b 1.42 c 0.24 d 95.00

C.V 2.95% 5.75% 6.76%

Medias con letras iguales difieren para un valor de p<0.05 C.V. Coeficiente de variación

explantes por tratamiento y se cultivaron en medio

MS (1962) complementado con AG3 (10.0 mg.l-1), AIA

(0.05 mg.l-1), tiamina (1.0 mg.l-1) y sacarosa (30.0 g.l-

1) y se incubaron en condiciones ambientales iguales

a las descritas anteriormente.

Procesamiento de los datos y análisis estadístico

Para todos los ensayos se utilizó un diseño

completamente aleatorizado. Los datos obtenidos

fueron procesados empleando el paquete estadístico

Statistica para Windows. En todos los experimentos

se aplicó un análisis de varianza simple (ANOVA).

en los casos que presentaron diferencias

significativas.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

La supervivencia fue alta en todos los tratamientos

(Tabla 1) observándose una tendencia a ser mayor a

medida que aumentaba la concentración de ácido

abscísico. En los tratamientos con 0.0 y 1.0 mg.l-1 de

ABA, las plantas in vitro, aunque se mantenían vivas,

habían perdido todas o la mayoría de las hojas y

mostraban la formación de un gran número de raíces

adventicias en los nudos más cercanos al medio de

cultivo, estos síntomas pueden estar dados por el

agotamiento progresivo de los nutrientes a medida

que transcurre el tiempo de conservación. Estos

resultados coincidieron con los obtenidos por Jarret

y Gawel (1991), quienes obtuvieron altos valores de

supervivencia, al conservar segmentos nodales de

boniato del clon Jewel durante un año empleando

ácido abscísico. También Westcott (1981) obtuvo

valores de supervivencia superiores al 60%,

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