Laboratorio De Biologia General Division Celular – Mitosis

LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL DIVISION CELULAR – MITOSIS

1. RESUMEN

La mitosis es la división celular esencial y es muy importante para el desarrollo de la vida ya que comprende en cinco fases la derivación de células nuevas a partir de una célula inicial, estas fases son interfase, profase, metafase, anafase y telofase. Cada tipo de organismo pluricelular necesita la mitosis para desarrollarse, crecer y reemplazar células de tejidos u órganos dañados. En este laboratorio se estudió las células de unas raíces de cebolla en su proceso de división celular mitosis.

2. INTRODUCCION

La mitosis cumple la función de distribuir los cromosomas duplicados de modo tal que cada nueva célula obtenga una dotación completa de cromosomas. La capacidad de la célula para llevar a cabo esta distribución depende del estado condensado de los cromosomas durante la mitosis y del ensamble de microtúbulos denominado huso. [1]

En los estados tempranos de la mitosis, cada uno de los cromosomas consiste en dos copias idénticas, llamadas cromátidas, que se mantienen juntas por sus centrómeros. Simultáneamente se organiza el huso, cuya formación se inicia a partir de los centrosomas.

Tanto en las células animales como en las vegetales, el entramado del huso está formado por fibras que se extienden desde los polos al ecuador de la célula. Otras fibras están unidas a las cromátidas al nivel de los cinetocoros, estructuras proteicas asociadas con los centrómeros. La profase finaliza con la desintegración de la envoltura nuclear y la desaparición de los nucléolos.

Durante la metafase, los pares de cromáticas, dirigidos por las fibras del huso, se mueven hacia el centro de la célula. Al final de la metafase se disponen en el plano ecuatorial. Durante la anafase se separan las cromátidas hermanas, y cada cromátida se mueve a un polo opuesto. Durante la telofase se forma una envoltura nuclear alrededor de cada grupo de cromosomas. El huso comienza a desintegrarse, los cromosomas se desenrollan y una vez más se extienden y aparecen difusos. Los nucléolos reaparecen. El huso mitótico se desorganiza y la membrana plasmática se invagina en un proceso que hace separar las dos células hijas.

3. OBJETIVOS

• Valorar la importancia de la división celular en el desarrollo, el crecimiento y la reposición de células en tejidos desgastados.

• Reconocer la función de cada uno de los reactivos que se emplean en la citada técnica.

• Identificar mediante observación microscópica las diferentes fases de la mitosis en raíz de cebolla.

4. METODOS Y MATERIALES

Materiales:

Raíces de cebolla

Solución fijadora

HCl 1N

Toalla de papel absorbente

Porta objetos

Cubreobjetos

Cuchilla de afeitar

Microscopio

Aceite de inmersión

Papel de arroz

Tubo eppendorf

Métodos:

Primero, con las raíces sumergidas en la solución fijadora fueron extraídas y se enjuagaron con agua destilada tres veces usando el frasco lavador, esto fue necesario para eliminar los residuos de la solución fijadora, luego con el papel absorbente se removió el exceso de agua.

Posteriormente, se tomó con mucho cuidado la mitad de las raíces, las cuales fueron introducidas en un tubo eppendorf, en ese momento se le agregó HCl 1N hasta cubrirlas completamente, luego se encubaron a 37ºC por un lapso de tiempo de 20 minutos.

En seguida de que las raíces fueron encubadas se procedió a tres lavados con agua destilada, así se le removió el exceso de agua con un papel absorbente, luego se transfirieron las raíces a un portaobjetos, se le agregó una gota de colorante de orceina y con una cuchilla de afeitar fueron picadas y cortadas durante 10 minutos mientras el colorante iba reaccionando sobre las células del tejido de las raíces de cebolla.

Luego se cubrió la muestra con un cubreobjetos y con la punta de un palito se presionó el tejido hasta aplastarlo y de esta manera esparcir el colorante, al instante se enfocó con en el microscopio en el objetivo de menor aumento y se ubicó las zonas donde ocurría mitosis para reconocer así las células que se encontraban en interfase y en las diferentes etapas de la mitosis.

Para el objetivo de mayor aumento se agregó sobre la muestra una gota de aceite de inmersión, y se calculó el índice mitótico observando cada zona de la muestra y las células que se encuentran en mitosis.

5. RESULTADOS

Interfase: La cromatina esta en el interior del núcleo, y este a su vez se ha desplazado un poco del centro de la célula, figura No.1:

Figura No. 1 Interfase

Profase: los centriolos se han desplazado a los polos de la célula y se puede observar la condensación de los cromosomas, figura No. 2:

Figura No. 2 Profase

Metafase: por la tensión que ejercen los polos, los cromosomas se alinean en la línea ecuatorial de la célula, figura No. 3:

Figura No. 3 Metafase

Anafase: los cromosomas se dividen y se separan hacia los polos de manera igual. Figura No. 4:

Figura No. 4 Anafase

Telofase: los cromosomas se organizan y forman el núcleo nuevamente, reaparece la cromatina y el citoplasma empieza el proceso de división, figura No. 5:

Figura No. 5 Telofase

Tabla No. 1 Registro de células en proceso de división mitótica

Conteo | Interfase | Profase | Metafase | Anafase | Telofase | Subtotal Mitosis |

86 | 51 | 18 | 11 | 4 | 2 | 35 |

58 | 34 | 13 | 7 | 3 | 1 | 24 |

62 | 33 | 17 | 8 | 2 | 2 | 29 |

48 | 28 | 10 | 6 | 3 |

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