Laboratorio biologia celular

INTRODUCCIÓN

Para que los procesos metabólicos, los cuales son vitales, permanezcan funcionando, la célula requiere un constante aporte de energía. Las reacciones de metabolismo se clasifican en reacciones catabólicas, en las que moléculas de gran tamaño son degradadas en moléculas simples, liberando energía útil; y las reacciones anabólicas (o biosintéticas), que utilizan la energía generada por el catabolismo para sintetizar macromoléculas necesarias para la célula. Es así como, gracias a un metabolismo catabólico, los heterótrofos obtienen energía a partir de la degradación de macromoléculas, específicamente por el rompimiento de las uniones químicas presentes en hidratos de carbono, lípidos y proteínas, con su subsecuente oxidación a CO2 y H2O (1). El principal carbohidrato utilizado por la célula para generar energía es la glucosa. El metabolismo de este monosacárido implica su entrada a un conjunto de reacciones enzimáticas llamada glicólisis. El producto final del proceso es el ácido pirúvico o piruvato. El destino del piruvato formado en la glicólisis dependerá de la disponibilidad de oxígeno en el sistema; en ausencia de oxígeno o anaerobiosis, el piruvato es destinado a las vías fermentativas que se encuentran en el citoplasma de eucariontes y procariontes. Existen diferentes tipos de fermentación, siendo las más estudiadas la fermentación alcohólica que ocurre en levaduras y la fermentación láctica que ocurre en el músculo esquelético. La fermentación alcohólica es un proceso anaeróbico realizado por las levaduras y algunas clases de bacterias. Las levaduras son microorganismos unicelulares, que consiguen su energía por medio de la fermentación alcohólica, en la que rompen las moléculas de glucosa para obtener la energía para sobrevivir. En este proceso el ácido pirúvico se convierte en CO2 y etanol (2). De la fermentación alcohólica se obtienen muchos productos como: vino, cerveza, y pan. En estos tres productos se emplea el mismo microorganismo que es la levadura común o Saccharomyces cerevisae.

OBJETIVOS

• Estudiar el proceso de fermentación alcohólica en las levaduras

• Reconocer los productos que se generan en el proceso de fermentación alcohólica en célula eucarionte.

• Analizar y comprender las variaciones de PH obtenidas en los distintos procesos de fermentación alcohólicas.

PROCEDIMIENTO EXPERIMETAL

Experimento N°1: Fermentación alcohólica en levadura.

El primer experimento consistió en ver qué soluciones entraran a una fermentación alcohólica con levadura. En el cual se utilizaron 4 tubos de ensayo con; glucosa, sacarosa, almidón y agua. En el primer tubo se vertieron 1ml de glucosa + 1ml de levadura. En el segundo tubo de ensayo, se agregaron, 1ml de sacarosa + 1ml de levadura. En el tercer tubo de ensayo, se agregó, 1ml de almidón + 1ml de levadura. Por último, en el 4 tubo, se añadieron 1ml de agua + 1ml de levadura. Posterior a esto, se rotularon 4 pipetas graduadas para cada una de las mezclas en los 4 tubos de ensayos, se absorbió una cantidad de la muestra con la pipeta, se retiraron los excesos, estas fueron selladas con parafilm para ser invertidas y colocadas en los respectivos tubos de ensayo. Posterior a esto se calculó en un tiempo de 15 minutos la cantidad liberada de Co2

Experimento N°2: Determinación indirecta de la producción de Co2 para fermentación alcohólica.

Este experimento consistió en la determinación indirectamente de la producción de Co2 mediante la fermentación alcohólica, en el cual se debió medir el pH de azul de bromotimol para obtener el pH inicial. Posteriormente en un tubo de ensayo, se agregaron 2ml de sacarosa al 2% y una cantidad de 2ml de levadura que se encontraba al 10%. Luego en otro tubo de ensayo se agregó azul de bromotimol y fueron juntados y sellados ambos tubos con una manguera de anaerobiosis, para luego dejarlos unos minutos en baño maría para conseguir un aumento de temperatura y que el Co2 ingresara con mayor fluidez al segundo tubo, disminuyendo el pH y cambiando de color del azul de bromotimol. Se registro el PH final y se realizó el mismo experimento, pero utilizando glucosa al 2% en lugar de sacarosa, y al inicio y final se anotó el PH y cambios obtenidos.

Experimento N°3: Observar al microscopio las levaduras utilizadas en los experimentos.

En el último experimento se colocó una muestra de células de levadura en un microscopio óptico, y fueron observados con un aumento del 40x.

RESULTADOS

1. Fermentación alcohólica en levadura.

En el tubo n°1 (Glucosa) se presentaron cambios en su composición desde los seis minutos en adelante aumentando progresivamente su composición.

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