BIOLOGÍA GENERAL Y CELULAR INFORME DE LABORATORIO DE BIOMOLECULAS

BIOMOLECULAS

BIOLOGÍA GENERAL Y CELULAR

INFORME DE LABORATORIO DE BIOMOLECULAS

SONIA CORTEZ BEDOYA

EDUVEN ARANGO CORREA

MARTIN JARAMILLO JARAMILLO

DANNY CAMILO QUINCHIA

UNISARC

FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS

SANTA ROSA

2016

INTRODUCCION

Las biomoléculas son las moléculas que participan en la formación y funcionamiento de los seres vivos, son básicamente cuatro: carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos.

OBJETIVOS

• Reconocer mediante el reactivo adecuado la presencia de proteínas, grasas y carbohidrato (monosacáridos y oligosacáridos)
• Identificar con pruebas sencillas la presencia de carbohidratos, lípidos y proteínas en alimentos de consumo humano

MARCO TEÓRICO

Una biomolécula es un compuesto químico que se encuentra en los organismos vivos. Están formadas por sustancias químicas compuestas principalmente por carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno, sulfuro y fósforo, las biomolecular pueden ser tanto como orgánicas que están formadas por cadenas de carbono (glúcidos, lípidos, proteínas, ácidos nucleicos) como inorgánicas que no están formadas por cadenas de carbono e hidrógeno (agua, sales, y gases como el oxígeno)

Las azucares reductoras son aquellas azucares que poseen un grupo carbonilo o grupo funcional intacto y pueden reaccionar entre sí mismas como reductores con otras moléculas. Unos ejemplos de estas pueden ser los monosacáridos (glucosa y fructosa) y también los disacáridos reductores.

Para identificar si una sustancia o producto tiene azucares reductoras se utiliza el reactivo o prueba de Benedicta que reacciona con la presencia de la lactosa, la glucosa, la maltosa y la celobiosa. En soluciones alcalinas puede reducir el Cu2+ que presenta una coloración azul a Cu+ que reacciona de la solución alcalina Cu2O con un color rojo-naranjado. El reactivo de Benedict está compuesto por:

• Sulfato cúprico
• Hidrato de sulfato de sodio y/o cloruro
• Carbonato Anhidro de Sodio
• Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio

Cuando en un medio alcalino el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse gracias al efecto del grupo aldehído del azúcar (CHO) en su forma Cu+,  este nuevo ion que se puede observar como un precipitado de color rojo ladrillo corresponde al oxido cuproso (Cu2O).

Este color rojo ladrillo es producto de la reacción mostrada en que en un medio alcalino el ion cúprico es capaz de reducirse por el efecto del grupo aldehído del azúcar presente (CHO) en su forma Cu+.

El lugol es una disolución de yodo molecular 12 y yoduro potásico KI en agua destilada. Se preparó por primera vez en 1829 y el nombre es gracias al médico francés J.G.A. Lugol.

Este producto es frecuentemente utilizado como desinfectante, antiséptico y como reactivo para la prueba del yodo en análisis médicos y de laboratorio

MATERIALES Y PROCEDIMIENTO DETALLADO

Los materiales de laboratorio que se utilizaron en la práctica fueron:

• Reactivo de Benedict
• Lugol al 1%
• NaOH al 3N
• CuSO4 al 0.1%
• Reactivo de tinción Sudan III
• Glucosa al 10%
• Almidón al 10%
• Mecheros
• Pipetas
• Goteros
• Gradilla para tubo de ensayo
• Agua destilada
• Pinzas
• Agitador
• Tubos de ensayo
• Pan integral
• Pulpa de fruta
• 1 huevo
• Aceite vegetal

Procedimiento

• En un tubo de ensayo colocamos 5ml del reactivo de Benedict y se calentó hasta el punto de ebullición, este no cambio de color.
• Luego añadimos 1ml de solución de glucosa y se calentó hasta el punto de ebullición, la concentración de azúcar supero el 1.5% ya que el color fue rojo ladrillo.
• Maceramos pulpa de guayaba agria, luego tomamos 1ml de esta maceración y se añadió a un tubo de ensayo el cual contenía 5ml de reactivo de Benedict, se calentó hasta el punto de ebullición.
• Se notó un cambio de color a café claro.
• Se colocaron 2ml de suspensión acuosa del almidón con 2 gotas de lugol, se calentó hasta el punto de ebullición y como resultado dio un color azul oscuro.
• Después de un tiempo en reposo el color azul oscuro desapareció, dejando residuos de este color en el fondo del tubo de ensayo.
• Se pasó a la siguiente prueba en donde se hizo un macerado de pan y se le agrego 2 gotas de lugol, observamos que la solución obtuvo una coloración oscura y que hubo una separación de material solido (pan) y material líquido.
• En la siguiente prueba se le agregó 3ml de agua a 1 tubo de ensayo, le añadimos una pizca de reactivo de Sudan III, se agitó esta solución y como resultado notamos una coloración rojo claro, luego de adicionar aceite vegetal y agitar, se dejó en reposo por unos minutos.
• Al observar los resultados notamos que el aceite quedo en partículas juntas pero separado del sudan III.
• En la última prueba se diluyó la clara de huevo en 50ml de agua, luego solo tomamos 1ml de esta solución, se le añadieron 2 gotas de sulfato de cobre y 1ml de hidroxilo de sodio al 0.5%. El cambio que notamos al hacer esta mezcla fue que la clara de hubo trato de ponerse más viscosa, como en forma de gelatina.

RESULTADOS

• Diagrama de flujo determinación de carbohidratos

[pic 1][pic 2]

• Diagrama de flujo determinación de lípidos

[pic 3][pic 4][pic 5]

• Diagrama de flujo determinación de Proteínas

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RESULTADOS OBTENIDOS EN LAS PRUEBAS

Determinación de Carbohidratos

Monosacáridos

a y b. La solución del reactivo de Benedict con la solución glucosa (figura 1. a.), una vez alcanzado el punto de ebullición empezó a coger una tonalidad roja, lo que significa que la concentración de azúcar es mayor a 1.5%.

c. La solución de guayaba agria con 5ml de reactivo de Benedict antes de ebullición tomo una tonalidad verdosa lo que significa que la pulpa que usamos reaccionó con el benedict inmediatamente dando una concentración de azúcar entre 0.1%-0.3%. Luego de que la solución alcanzara el punto de ebullición alcanzo un color rojo ladrillo (figura 1. b.), dándonos como resultado que la solución alcanzó una concentración de azúcar mayor a 1.5%.

Figura 1. a. Solución del reactivo de Benedict con solución glucosa. b. Solución pulpa de fruta (guayaba agria) con reactivo de Benedict.

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Polisacáridos

a y b. La solución de suspensión acuosa de almidón con lugol no tuvo cambio alguno a simple vista, mantuvo la coloración traslúcida, el olor inodoro.

c. La solución anterior cuando alcanza el punto de ebullición cambio de color, de traslúcido a azul; una vez la solución se enfría vuelve a tomar su translucidez (figura 2. a.) pero dejando residuos azules en el fondo del tubo de ensayo, aquí podemos decir que hubo un proceso de hidrólisis.

d. La solución de macerado de pan con lugol cuando alcanzó el punto de ebullición cogió una tonalidad negra, luego de cierto tiempo en reposo volvió al color del macerado de pan (figura 2. b.), también fuimos testigos de un proceso de hidrólisis.

Figura 2. a. Solución de suspensión acuosa de almidón con lugol después del tiempo de reposo. b. Solución macerado de pan con lugol, después de reposo.

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Determinación de Lípidos

1. La solución de agua con Sudan III tomo un tono rosáceo, esto por la combinación de colores, ya que el agua es traslúcida y el Sudan Fucsia.
2. Al agregarle aceite a la solución anterior se puede observar, como se pierde la tonalidad rosácea y como el aceite se separa en finitas burbujas, sin mezclarse unas con las otras.

Figura 3. Solución de agua, sudan III y aceite

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Determinación de Proteínas

a y b. La solución de clara de huevo, agua, sulfato de cobre al 0.1% e hidróxido de sodio al 10% forma una sustancia viscosa, un tipo de gelatina.

CONCLUSIONES

• En esta práctica desarrollamos habilidades analíticas y experimentales y la observación del desarrollo de los diferentes procedimientos realizados con el pan integral, la pulpa de guayaba agria, huevo y aceite.

• Se pudo observar la presencia de azúcar en la pulpa de guayaba agria.

• Se pudo observar la presencia de lípidos en el aceite de origen vegetal.

• Se pudo observar la presencia de proteínas en la clara de huevo.

• Para poder observar la presencia de azucares es necesario realizar una solución de la muestra a evaluar con algún reactivo ya sea reactivo de Fehling, reactivo de Tollens, reactivo de Maillard o en nuestro caso reactivo de Benedict.

• El agente indicador de azúcar reductor es el color rojo ladrillo que toma la solución después de alcanzar el punto de ebullición.

CUESTIONARIO

1. ¿Qué es un azúcar reductor? Cite ejemplos de azucares reductores y no reductores.

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