Micologia

Micología

1.- FUNDAMENTO TEORICO:

Los hongos son organismos eucarióticos (con células nucleadas) que realizan una digestión externa de sus alimentos, secretando enzimas, y absorben luego las moléculas disueltas resultantes de la digestión, es decir, que se alimentan osmotróficamente (como las plantas) absorbiendo sustancias disueltas, pero a diferencia de aquéllas los nutrientes que toman son orgánicos.

Los hongos tienen distintos hábitos de vida.

Los hongos saprofitos, es decir descomponedores de materia orgánica, cumplen una función ecológica de la mayor relevancia pues garantizan el reciclaje de la materia muerta y, por lo tanto, la recirculación de sustancias nutritivas en los ecosistemas.

Los hongos parásitos, que viven sobre o dentro de otros seres vivos, obtienen su alimento de éstos y llegan a producir enfermedad en su hospedero.

Los hongos simbiontes que se asocian de manera mutualista con otros organismos constituyen alianzas vivas de beneficio mutuo como por ejemplo los líquenes (asociación de hongo y alga) y las micorrizas (asociación de hongo y raíz de una planta), simbiosis estas de gran importancia en la naturaleza en procesos de colonización de hábitats y de circulación de nutrientes.

Estructura:

La pared celular es rígida, con un componente polisacarídico, hecho de mananos, glucanos y quitina, asociado íntimamente con proteínas.

El cuerpo del hongo tiene dos porciones, una reproductiva y otra vegetativa .

La parte vegetativa (no tiene clorofila) está compuesta por filamentos que se extienden de los hongos multicelulares y son llamados hifas (usualmente microscópicos), y un conjunto de hifas conforman el micelio (usualmente visible). A menudo las hifas están divididas por tabiques llamados septas.

o Hifa:

Las hifas son los filamentos que, reunidos, forman el micelio de la mayoría de los hongos (en sentido amplio).

En los líquenes son las hifas del hongo las que envuelven a los gonidios, las células del alga, y constituyen la mayor parte de la masa y la estructura del líquen.

Una hifa típica consiste en un filamento cilíndrico, constituido por una fila de células alargadas envueltas en una pared celular.

En los hongos verdaderos (reino Fungi) la pared está hecha de quitina. Las células de la hifa pueden formar un citoplasma continuo (un sincitio), en cuyo caso se habla también de hifas sifonales, o aparecer separadas por tabiques o septos, y entonces diremos que son hifas septadas

o Conidióforo:

En ciertos hongos, la conidiófora o conidióforo es una estructura microscópica especializada en la producción asexual de miles de esporas llamadas conidias.

Se localizan al extremo de hifas las cuales levantan la conidiofora en el aire con el fin de esparcir las esporas con más eficiencia. Algunas conidioforas (en el Geotrichum candidum, por ejemplo) son de un filamento, mientras que otras (en el Trichoderma viride, por ejemplo) son ramificadas.

Partes de un hongo:

(1) Hifa,

(2) Conidióforo,

(3) Fiálide,

(4) Conidia,

(5) Septas.

Reproducción de los hongos:

Los hongos se reproducen sobre todo por medio de esporas , las cuales se dispersan en un estado latente, que se interrumpe sólo cuando se hallan condiciones favorables para su germinación. Cuando estas condiciones se dan, la espora germina, surgiendo de ella una primera hifa, por cuya extensión y ramificación se va constituyendo un micelio.

La velocidad de crecimiento de las hifas de un hongo es verdaderamente espectacular: en un hongo tropical llega hasta los 5mm por minuto. Se puede decir, sin exagerar, que algunos hongos se pueden ver crecer bajo los propios ojos.

Las esporas de los hongos se producen en esporangios, ya sea asexualmente o como resultado de un proceso de reproducción sexual. En este último caso la producción de esporas es precedida por la meiosis de las células, de la cual se originan las esporas mismas.

Las esporas producidas a continuación de la meiosis se denominan meiosporas. Como la misma especia del hongo es capaz de reproducirse tanto asexual como sexualmente, las meiosporas tienen una capacidad de resistencia que les permite sobrevivir en las condiciones más adversas, mientras que las esporas producidas asexualmente cumple sobre todo con el objetivo de propagar el hongo con la máxima rapidez y con la mayor extensión posible.

El micelio vegetativo de los hongos, o sea el que no cumple con las funciones reproductivas, tiene un aspecto muy simple, porque no es más que un conjunto de hifas dispuestas sin orden. La fantasía creativa de los hongos se manifiesta solo en la construcción de cuerpos fructíferos, los cuales, como indica el nombre, sirven para portar los esporangios que producen las esporas.

Tipos de estructuras de los hongos:

Estructuras Somáticas:

Micelio es el conjunto de filamentos y un trozo del mismo se denomina hifa. Las hifas pueden presentar septos y entonces el micelio está tabicado. Septos primarios son los formados cuando hay divisiones nucleares y adventicias los otros.

Si los tabiques están ausentes se habla de micelio continuo. Los mohos son micromicetos filamentosos. Cuando el hongo es una célula aislada se dice unicelular o levadura. Los cortos filamentos compuestos por las células que brotan de una levadura constituyen el pseudomicelio.

Plecténquima es un conjunto de hifas entrelazadas que se asemejan a un tejido. Se dice prosénquima si las hifas pueden ser reconocidas y pseudoparénquima cuando han perdido su individualidad. Esclerocio es un plecténquima generalmente macroscópico que puede permanecer en vida latente.

Rizomorfa es un cordón grueso donde el conjunto de las hifas fusionadas ha tomado el aspecto de raíz. Rizoides son las hifas de succión, como raicillas, que penetran en el substrato. Haustorio es la hifa de succión del hongo parásito dentro de la célula del hospedador. Apresorios son unas hifas achatadas que se adhieren al substrato o al hospedador como sostén, especialmente en el comienzo de la infección.

ASPERGILLUS:

El Aspergillus es un género de alrededor de 200 hongos (mohos), y es ubicuo. Los hongos se pueden clasificar en dos formas morfológicas básicas: las levaduras y las hifas. El Aspergillus es un hongo filamentoso (compuesto de cadenas de células, llamadas hifas), el tipo de hongos opuesto a las levaduras, éstas últimas compuestas de una sola célula redondeada. El hábitat natural del Aspergillus son el heno y el compostaje.

Estructura

La estructura microscópica del Aspergillus es única. Tienen hifas tabiculares y conidioforas cuya cabeza está localizada en el extremo de un hifa, compuesta por una vesícula rodeada por una corona de fiálides en forma de botella directamente insertadas sobre la vesícula . De las fiálides se desprenden las esporas (conidios).

2.-OBJETIVOS:

 Observar y describir las características de algunas colonias de hongos.

 Reconocer y describir algunas estructuras somáticas y reproductoras.

 Observar la disposición y estructura de las esporas que permitan la identificación exacta del hongo.

3.- MATERIALES Y EQUIPOS:

Materiales:

• Asa de siembra.

• Placas petri

• Mechero de Bunsen.

• Incubadora.

• Pipeta.

• Portaobjetos y cubreobjetos.

• Soporte d vidrio.

• Microscopio.

Compuestos:

• Agar Sabouraud.

• Lugol o solución de Linder.

• Azul de metileno.

Microorganismos:

• Aspergillus

• Penicilli

4.-METODOLOGÍA:

En la presente práctica de laboratorio de microbiología, el trabajo realizado se centrará en conocer las características de algunas colonias de hongos y las estructuras somáticas y reproductoras. En una primera parte de la sesión el profesor empezó con una pequeña clase teórica sobre las formas de los hongos y estructuras que los caracterizan.

Y en la otra parte de la sesión se empezaron a realizar las siembras. En lo que respecta a la cámara húmeda o de microcultivo se prepara la cámara con todos los materiales necesarios.

Después de unas 72horas se observarían en el microscopio las experiencias realizadas, extrayendo de la placa petri una pequeña muestra. El organismo que se utilizo fue el Aspergillus.

5.- PROCEDIMIENTO:

A.- Agar Saboraud:

 En una placa petri, añadir el agar saboraud. Y llevarlo a incubar.

 Después de que se solidifique, añadirle el hongo Aspergillus, en nuestro caso, por medio de pinchazos (entre 4 y 5 por toda el área de la placa petri.

 Incubar por unas 48horas o más.

 Después de ese tiempo, extraer una pequeña muestra de la siembra en una lámina portaobjeto.

 Añadirle lugol o solución de Linder.

 Lavar y secar al medio ambiente.

 Observar en el microscopio de menor aumento a mayor aumento.

B.- Cámara Húmeda o microcultivo:

 En condiciones de asepsia cortar con bisturí el Agar PDA o Agar Saboraud en rectángulos de 1 x 0.5cm.

 Colocarlos sobre el portaobjetos el pedazo de agar.

 En el extremo del rectángulo sembrar por picadura la cepa de un hongo determinado.

 Cubrir la preparación con una lámina cubreobjetos.

 Humedecer con agua destilada estéril el papel de filtro que contiene la placa Petri y cerrarla.

 Incubar las placas a temperatura ambiente durante 3 a 5 días.

 Observar microscópicamente a mediano y mayor aumento periódicamente hasta evidenciar esporulación y desarrollo completo.

 Esquematizar y nominar las estructuras observadas.

C.- Hongos en el medio ambiente:

 En una placa petri con agar saboraud, dejarla abierta por unos 10minutos para que los hongos que estén el medio ambiente entren y se reproduzcan.

 Una vez que pasen los 10 minutos se tapa de nuevo la placa petri.

 Se lleva a incubar por 48 horas.

 Luego de ese tiempo observar el número de colonias de hongos que han aparecido.

D.- Observación de Levaduras:

 En un portaobjeto colocar una muestra del cultivo sólido que contiene al hongo, en nuestro caso Aspergillus.

 Fijar la muestra al portaobjeto a través del flameo repetidas veces.

 Luego colocar un colorante que puede ser el azul de metileno o la solución Linder.

 Observar en el microscopio las

estructuras.

6.- OBSERVACIONES Y RESULTADOS:

A.- Siembras con Agar Saboraud:

En los bordes de la placa petri se observó un crecimiento de hongos de color negro.

Este crecimiento de color negro son las conidias. Los aspergillus producen micelio tabicado, ramificado, con la parte vegetativa introducida en el nutriente. Las conidias se producen dentro del esterigma tubular y son expulsadas en cadenas de esporas. Los aspergillus se desarrollan en concentraciones altas de azúcar y sales, como es el caso del Agar Sabouraud que contiene glucosa.

B.- Cámara Húmeda o microcultivo:

Luego de incubar, se procedió a trasladar

el portaobjeto al microscopio, antes de realizar

esto último, a la muestra se le añade un colorante que puede ser Lugol o solución Linder.

En la figura se muestra lo que se observa en

el microscopio.

Esto nos demuestra que se trata del género Aspergillus, que contiene las esporas en el saco que se encuentra en el extremo de las hifas.

C.- Hongos en el medio ambiente:

Luego que concluye el término de incubación, en la placa petri se observan varias colonias de hongos de diversos tamaños, formas y colores. A continuación se procede a contar las colonias que hay dentro de la placa con la ayuda del cuenta colonias.

Aproximadamente hay 12 colonias en bien definidas, es decir en la placa petri, se encuentran 12UFC/10minutos.

Como se muestra en la figura aparecen colonias de color negro, otras de color verde, unas 4 de color azul y una de color rosado violeta casi en el medio.

La mayoría de las colonias de los hongos son de forma irregular

Esta técnica se utiliza en micología para el estudio de ciertas estructuras de los hongos que son muy frágiles y se deterioran fácilmente, al ser obtenidas para su observación a partir de un macrocultivo (común y corriente).

D.- Observación de Levaduras:

Al inocular una muestra del tubo de ensayo donde estaba el Aspergillus y colocarlo en una placa, añadiéndole solución linder, se nota una hifa cenocítica.

En la parte superior de la hifa se encuentra las esporas agrupadas en una especie de circunferencia.

7.- CONCLUSIONES:

 Los hongos son organismos eucarióticos (con células nucleadas) que realizan una digestión externa de sus alimentos, secretando enzimas, y absorben luego las moléculas disueltas resultantes de la digestión, es decir, que se alimentan osmotróficamente (como las plantas) absorbiendo sustancias disueltas, pero a diferencia de aquéllas los nutrientes que toman son orgánicos.

 La técnica del microcultivo consiste en una placa de Petri estéril en cuyo interior se encuentran: un portaobjeto, cubreobjeto, tubo de vidrio en U y papel filtro. Sobre el portaobjeto se deposita en forma aséptica, un trocito del medio de cultivo a utilizar (se corta con un sacabocados). Luego se siembra el hongo en estudio pasando el asa con el hilo de platino en la periferia superior del medio de cultivo, a continuación se cubre con el cubreobjeto estéril y se agrega al fondo de la placa agua destilada estéril (cámara húmeda); finalmente se incuba a la temperatura deseada. Después de 3-4 días se retira en forma cuidadosa el cubreobjeto al cual se ha adherido el hongo y se monta sobre un portaobjeto para observar en fresco, o realizar una preparación permanente.

 Las hifas son los filamentos que, reunidos, forman el micelio de la mayoría de los hongos (en sentido amplio).

 El cuerpo del hongo tiene dos porciones, una reproductiva y otra vegetativa .

 La parte vegetativa (no tiene clorofila) está compuesta por filamentos que se extienden de los hongos multicelulares y son llamados hifas (usualmente microscópicos), y un conjunto de hifas conforman el micelio (usualmente visible). A menudo las hifas están divididas por tabiques llamados septas.

De las hifas se desprenden los conidióforos en el extremo del cual se desprenden los fiálides de los cuales se desprenden los conidios (esporas).

 Los hongos se reproducen sobre todo por medio de esporas , las cuales se dispersan en un estado latente, que se interrumpe sólo cuando se hallan condiciones favorables para su germinación. Cuando estas condiciones se dan, la espora germina, surgiendo de ella una primera hifa, por cuya extensión y ramificación se va constituyendo un micelio.

UNIVERSIDAD NACIONAL PIURA

NOMBRE: Diego Jesus

APELLIDOS: Mogollon Villena

FACULTAD: Industrial

LABORATORIO: Nº9 Micologia

PROFESOR: Jorge Bermejo

2011

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