TEMA: Informe práctico biologia celular vegetal.

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INFORME PRÁCTICO DE BIOLOGÍA CELULAR VEGETAL:
“Reconocimiento de Biomoléculas; carbohidratos, lípidos y proteínas.”

INTEGRANTES:

• Isadora Pérez Vásquez
• Juan Ramírez Valenzuela  
• Carla Rivas Arriagada
• Ingrid Torres Herrera

DOCENTE:

• María Lorena Niedmann Lolas

AYUDANTES:

• Daniela Araya Ortega
• Paulina Ávila

Fecha de entrega: 05 de abril 2016

Introducción

La materia viva se encuentra compuesta por varios componentes químicos, dentro de los cuales destacan los orgánicos, presentes en las biomoléculas, que son compuestos químicos, que se encuentran en los organismos vivos y que están formadas principalmente por carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno, sulfuro y fósforo1, tales como, los hidratos de carbono, lípidos y proteínas.

El siguiente informe de laboratorio, consta del reconocimiento de estos componentes, utilizando técnicas de coloración particulares, en primer lugar la aplicación de lugol (I2/KI) para reconocer el almidón, debido a que uno de los componentes éste, la amilosa es capaz de unirse a las moléculas de yodo del lugol, formando un color azul oscuro, a veces prácticamente negro, mientras que  la amilopectina no reacciona con el yodo2. También se busca encontrar la presencia de azúcares reductores con ayuda del Benedict, cuya prueba se basa en la capacidad de reducir Cu+2 en medio alcalino a Cu+, éste se oxida y precipita en forma de Cu2O, lo que proporciona la coloración positiva rojiza3; según la siguiente reducción: Cu+2 (ión cúprico) + 2e- → Cu+ (ión cuproso)

Otra de las biomóleculas de importancia biológica que se observa en el práctico, son los lípidos, los cuales se reconocen gracias al sudán III, ya que este es lipófilo (soluble en grasas), teniendo gran afinidad con los ácidos grasos, siendo capaz de colorear rojo solo a éstos4.                                             

Como última biomolécula de estudio están las proteínas, las cuales se pueden reconocer utilizando el test de biuret, esta reacción se basa en la generación de un compuesto de color violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos5, aparte de esto, se analiza el efecto del calor sobre la estructura proteica, debido a la desnaturalización de las mismas.

Este informe tiene por objetivos:

• Reconocer biomoléculas, mediante reacciones químicas.
• Identificar carbohidratos, a través de la microscopía.
• Analizar las distintas técnicas de coloración para comprobar presencia de biomoléculas y determinar en que casos son más efectivos aquellos métodos.
• Observar el efecto del calor sobre una proteína.

Materiales y procedimiento

Materiales:

1. Identificación de carbohidratos:

I.- Observación macroscópica:

• 6 tubos de ensayo
• Gradilla
• 2 ml de almidón (1%)
• 2 ml de sacarosa (1%)
• 2 ml de glucosa (1%)
• Solución de benedict
• Lugol
• Mechero
• Pinzas de madera                            

Procedimiento: Enumerar tubos del 1 al 6; tomando el tubo 1-2 para el almidón, el 3-4 para la sacarosa, y posteriormente el 5-6 para la glucosa, (agregando 1 ml de la solución respectiva a cada uno). A los tubos 1, 3 y 5 añadir lugol, a continuación aplicar solución de Benedict en los demás tubos. Finalmente las muestras se exponen  al calor (mediante el mechero).

II.-Observación microscópica:

• Hoja de afeitar
• Lugol
• Papa
• Microscopio compuesto
• Porta y cubre-objetos

Procedimiento: Lo primero se  corta finamente un trozo de papa, luego esta muestra se coloca sobre un porta objetos, posteriormente se le añade lugol diluido. Finalmente se observa al microscopio, anotando y analizando lo observado.

1. Identificación de lípidos mediante test de Sudán:

• 2 tubos de ensayo
• 2 ml de aceite de cocina
• 2 ml de agua destilada
• Gotas de Sudán III
• Lugol

Procedimiento: En un tubo de ensayo agregar 1 ml de aceite de cocina junto a 1 ml de agua destilada, a ello se añade gotas de Sudán, para luego agitarlo. Con el tubo número 2 se realizan los mismos pasos del comienzo, agregando 1 ml de aceite de cocina más el ml de agua destilada, pero esta vez en lugar del Sudán, se le añade solución de Lugol a la muestra del tubo. Anotar  los resultados de ambos procesos al momento de agitarlo, como también pasados los cinco minutos y posteriormente comparar lo observado.

1. Reconocimiento de proteínas:

• 2 tubos de ensayo
• Solución de albúmina 0,5%
• Solución de almidón 0,5%
• Reactivo Biuret

Procedimiento: Al primer tubo le añadir 2 ml de solución de albúmina, luego al siguiente  aplicar 2 ml de solución de almidón. A continuación a cada uno de los tubos se le adiciona  1 ml del reactivo Biuret. Pasado unos minutos observar y analizar los resultados.

1. Desnaturalización de proteínas:

• 1 tubo de ensayo
• 2 ml de solución de albúmina
• Mechero
• Biuret
• Pinzas de madera

Procedimiento: Aplicar 2 ml de solución de albúmina al tubo de ensayo y luego posar sobre el mechero para calentarlo de forma suave. Luego retirar del fuego y añadir el Biuret.

Resultados

a) Identificación de carbohidratos

I.- Observación Macroscópica:

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