Carbohidratos

OBJETIVOS

• Conocer y aplicar pruebas que nos permitan identificar carbohidratos, pentosas, azucares reductores y no reductores.

• Identificar las reacciones que presentan los carbohidratos de acuerdo a la prueba de Molish, Benedict, Bial, Seliwanof y Fehling.

• Diferenciar las reacciones de carbohidratos de acuerdo a cada reactivo agregado.

PRUEBA DE BENEDICT:

Algunos azúcares tienen la propiedad de oxidarse en presencia de agentes oxidantes suaves como el ion Fe3+ o Cu2+. Esta característica radica en la presencia de un grupo carbonilo libre, el cual es oxidado y genera un grupo carboxilo. Por lo tanto, aquellos azúcares con un grupo carbonilo libre son llamados azúcares reductores y aquellos en los que el grupo carbonilo se encuentra combinado en unión glucosidica se conocen como azúcares no reductores.

La prueba de Benedict se basa precisamente en la reacción o no de un azúcar con el ion Cu2+. El reactivo 22 de Benedict contiene soluciones de carbonato de sodio, sulfato de cobre, y citrato de sodio. El Na2CO3 confiere a la solución un pH alcalino necesario para que la reacción pueda llevarse a cabo. El citrato de sodio mantiene al ion Cu2+ en solución ya que tiene la propiedad de formar complejos coloreados poco ionizados con algunos de los metales pesados. Con el cobre produce un complejo de color azul. Si se le agrega al reactivo una solución de azúcar reductor y se calienta hasta llevar la mezcla a ebullición, el azúcar en solución alcalina a elevadas temperaturas se convertirá en D-gluconato y su ene-diol, rompiéndose luego en dos fragmentos altamente reductores, los cuales con sus electrones expuestos, reaccionarán con el Cu++. Se obtiene entonces un azúcar oxidado y dos iones Cu+. Es una prueba específica para las sustancias reductoras con grupos carboxilos libres.

Cuando aparece un precipitado amarillo el hidróxido pierde agua.

La aparición de un precipitado amarillo, anaranjado, o rojo ladrillo evidencia la presencia de un azúcar reductor

MATERIALES Y REACTIVOS:

Reactivo de Benedict

Carbohidratos: ribosa, sacarosa, fructosa, glucosa, mamosa y Muestra Problema.

Para la reacción se coloca 1ml de disolución en cada tubo de ensayo y agregue 1ml del reactivo correspondiente según la guía. Sumerja los tubos de una misma serie, simultáneamente en un baño de agua hirviente. Anotar los cambios que se presenten y si después de 15 minutos no aparece ningún color, anote que la reacción es negativa.

PROCEDIMIENTO

Tomamos los 6 tubos de ensayo y los juagamos debidamente para empezar a realizar el trabajo, una vez limpios los tubos de ensayo los tomamos y en cada uno de ellos agregamos 1ml del carbohidrato correspondiente como: ribosa, sacarosa, fructosa, glucosa, manosa y Muestra Problema; a cada una de estas sustancias le agregamos 1ml del reactivo de Benedict, los colocamos debidamente ordenados en el vaso de precipitado que se encontraba en ebullición para observar la reacción de cada sustancia.

En el momento de agregar el reactivo a las sustancias como la ribosa, mp, sacarosa, glucosa, manosa y la fructosa se tornaron de color verde agua marina, inmediatamente al colocarlas en contacto con el agua que estaba en ebullición empezaron a reaccionar de la siguiente manera:

a) Después de 15 segundos la fructosa y ribosa se tornaron de color tomate.

b) Al minuto la manosa se torno de color naranja.

c) Al 1 minuto con 30 segundos la fructosa tomo un color amarillo oscuro.

d) A los 2 minutos con 50 segundos la ribosa y la fructosa se tornaron de color marrón.

e) A los 3 minutos la muestra problema se torna de color ladrillo.

f) Pasados 3 minutos con 15 segundos la glucosa se torna de color ladrillo claro.

g) A los 3 minutos con 20 segundos

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