Cromatografia En Columna

Objetivos

Comprender la técnica de cromatografía en columna, sus características y los factores que en ella intervienen.

Emplear la técnica de cromatografía en columna para la separación de un compuesto orgánico.

A través de cromatografía en capa fina controlar la cromatografía en columna

Introducción

La cromatografía es quizá el medio más útil de la separación de los compuestos para purificar e identificar. Para llevar a cabo una purificación de un compuesto sea sólido o líquido, es necesario aplicar la técnica de cromatografía en columna puesto que es fácil, se puede llevar a cabo a temperatura ambiente y pueden separarse grandes cantidades de una mezcla de compuesto.

La cromatografía en capa fina es una técnica que ayuda a determinar el número de componentes de una mezcla y como una prueba preliminar para realizar una cromatografía en columna, entre otras aplicaciones.

Resultados

Se proporcionaran 0.4 g de una mezcla sólida de ácido benzoico contaminada con azul de metileno.

Se coloca la columna de cromatografía en un soporte con ayuda de unas pinzas de tres dedos, de tal forma que se encuentre totalmente vertical y con una altura al tamaño de los frascos viales.

Una vez montado el equipo para llevar a cabo la cromatografía en columna, se recolectó en 7 frascos viales 10 mL por frasco y posteriormente se realizó la prueba de cromatografía en capa fina para saber en qué frascos se encontraba el ácido benzoico y poder obtener de esos frascos viales mediante destilación el ácido benzoico.

Figura 1. Cromatografía en columna

Rf=(Distancia que recorre la muestra)/(Distancia que recorre el eluyente)

Rf= (2.5 cm)/(5.2 cm)=0.48

Una vez terminada la cromatografía en capa fina se observo con ayuda de una cámara de yodo y bajo luz ultravioleta en cuales frascos había ácido benzoico disuelto en acetato de etilo, a los frascos que contenían dicha sustancia (fueron los rotulados con los números 2, 3, 4 y 5) se destilaron y se obtuvo un total de 0.32108 g de ácido benzoico.

Análisis de Resultados

Sabiendo que se utilizaron en un principio 0.4 g de ácido benzoico contaminado con azul de metileno y que se obtuvieron 0.32108 g de ácido benzoico ya purificado, se puede calcular el rendimiento.

〖0.32108 g〗_(ácido benzoico)/〖0.4 g〗_(ácido benzoico) ×100=80.27%

Los 0.07892 g de ácido benzoico faltantes es muy probable que se hayan quedado pegados en el matraz de bola y una muy pequeña parte en los frascos viales, ya que se observaban pequeñas manchas blancas en ellos.

Tratamiento de residuos

Residuos

D1. Capilares D4. Gel sílice para placa

D2. Acetato de etilo D5. Gel sílice para columna (parte azul)

D3. Hexano-Acetato de etilo D6. Gel sílice para columna (parte blanca)

•D1: Empacar cuidadosamente para incineración.

• D2 y D3: Secar y destilar para recuperar.

• D4: Se puede recuperar para usarla nuevamente previo lavado y secado

• D5 y D6: Cernir, lavar y secar para usarla nuevamente, previo lavado y secado.

Cuestionario

Indique algunas de las aplicaciones de la cromatografía de adsorción.

En capa fina: separación de aminoácidos

En columna: separación de colorantes.

Diga cuál es la diferencia entre una cromatografía en capa fina y la de columna.

Cromatografía n columna

La fase estacionaria está constituida por un sólido que se empaqueta en una columna, normalmente de vidrio. Los componentes a separar se añaden en forma soluble por la parte superior de la columna, quedando retenidos en la misma. Posteriormente los componentes se desplazan arrastrados por una fase móvil líquida. Dependiendo de la absorción selectiva de cada

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