Cultivo in vitro Tocte.

CULTIVO in vitro DE TOCTE (Juglans neotropica) A PARTIR DE YEMAS AXILARES Y HOJAS, UTILIZANDO TRES MEDIOS DE CULTIVO CASEROS

IN VITRO CULTURE OF TOCTE (Juglans neotropica) FROM AXILLARY BUDS AND LEAVES, USING THREE GROWING MEDIA HOME

Leidy Collaguazo, Lilibeth Lema, Michelle Tenorio, Viviana Tito,  y Andrea Urvina

18  de Enero de 2016

Universidad Politécnica Salesiana. Carrera de Ingeniería en Biotecnología de los Recursos Naturales. Dirección: Av. 12 de Octubre N24-22 y Wilson, Quito, Ecuador.

Autor para correspondencia: leidycollaguazo@hotmail.com

Resumen

El presente trabajo fue desarrollado en el Cantón Quito, provincia de Pichincha, Ecuador. El Objetivo fue establecer un protocolo de desinfección y medio de cultivo adecuado para el cultivo in vitro de Tocte (Juglans neotropica) a partir de yemas axilares y hoja, se utilizaron tres medios de cultivo a base de papa, camote y un medio de cultivo mixto, se determinó que los tratamientos Yema/ Mixto y Hojas/Camote, son los más aptos para ser empleados en la micropropagación de Juglans neotropica.

Palabras clave: Juglans neotropica, cultivo in vitro, papa camote, mixto, micropropagación.

Abstract

This work was developed in canton Quito, Pichincha province, Ecuador. The objective of this work was established a protocol for disinfection and medium appropriate for the in vitro culture of Tocte (Juglans neotropica) from axillary buds and leaves, were used three culture based on potatoes, sweet potatoes and a mixed culture medium, determinated that the treatments Bud/ Mixed and Leaves/ sweet potatoes are more suitable to be used in micropopagation of Juglans neotropica.

Keywords: Juglans neotropica, in vitro culture, potatoe, sweet potatoe, mixed, micropropagation.

1.    Introducción

El género Juglans está compuesto por cerca de 50 especies y se considera originario de Asia, es una especie conocida a nivel mundial corno productora de nueces comestibles y de madera de alto valor (Voulgaridis & Vassiliou, 2006).

El nogal (Juglans neotropica) o también conocido tocte, es un árbol nativo de la región andina en Sudamérica. Hoy en día en Ecuador es considerado en los programas de reforestación como un gran potencial para la conservación de los ambientes naturales.  

El nogal es una especie que tolera variadas condiciones de clima y suelo; sin embargo, cuando se maneja con fines productivos es necesario considerar condiciones que favorecen su cultivo. Se caracteriza por responder a estímulos y condiciones de estrés con la exudación de fenoles que se toman pardos rápidamente (Dehon et al., 2002).

En el cultivo de Nogal, se utiliza sistemas de propagación sexual y propagación vegetativa,  la primera es fácil de establecer; sin embargo es recomendable la utilización de semillas estratificadas. Las germinación puede llegar hasta un 90% siempre que las técnicas de cosecha y los tratamientos pregerminativos se hayan realizado en forma oportuna;  la propagación vegetativa se realiza mediante injertos (Loewe y González, 2001).

La gran mayoría de las investigaciones relacionadas al mejoramiento genético del nogal está enfocada al aspecto frutícola, debido a que es el que atrae un mayor interés económico. Los aspectos que se busca desarrollar son obtener brotación lateral, resistencia al frío, tolerancia a enfermedades y estándares de calidad de nuez y cáscara (Germain, 1997).

Juglans neotropica es considerada  vulnerable a la extinción como lo menciona Quintero & Jaramillo (2012) , ya que cuando se trata de propagar esta especie requiere de tratamientos pregerminativos para romper la latencia natural que presenta, demostrando así que el factor principal de bloqueo durante la germinación es el asociado a la testa de la misma semilla, pues presenta retención de inhibidores. Esta es la razón por lo cual es de gran importancia su propagación in vitro, mediante la utilización de diferentes explantes como yemas y hojas.

2. Objetivos

2.1 Objetivo General

Establecer un protocolo de desinfección y medio de cultivo adecuado para el cultivo in vitro de Tocte (Juglans neotropica) a partir de yemas axilares y hojas.

2.2 Objetivos Específicos

• Evaluar el porcentaje de contaminación de los medios de cultivo y fenolización de los explantes en cada siembra realizada.
• Investigar las posibles causas de los problemas presentados a lo largo del proyecto y solucionarlos.
• Interpretar estadísticamente los resultados obtenidos para la elección del tratamiento más apto para el cultivo in vitro de Tocte.

3. Materiales y Métodos

3.1 Ubicación Geográfica

El proyecto se llevó a cabo en el barrio California Alta, provincia de Pichincha, cantón Quito,  sector la Kennedy a  0° 08’ 01” (S) y 78° 28’23”(O), a una altitud de 2800 m.s.n.m. Al ser un proyecto casero, no existió un cuarto de crecimiento y por lo mismo las condiciones no fueron manipuladas, la temperatura promedio del lugar es de 16 °C (Biosfera CIA. LTDA, 2012).

3.2 Material Vegetal

Las varetas de Nogal fueron tomadas de plantas jóvenes, sin embargo en la siembra 3 y 4 se utilizó varetas de Nogal obtenidas de árboles adultos ubicados en el parque “La Carolina”, al norte de Quito. De cada vareta se tomó aproximadamente 3 yemas y 8 hojas viables para la introducción al medio de cultivo.

3.3 Protocolo de desinfección

Los explantes utilizados en el presente trabajo fueron sometidos a un protocolo de desinfección para lo cual se utilizaron materiales como: Agua estéril, Detergente Ariel, Hipoclorito comercial de la marca “Clorox”, alcohol 70%, Benomil (fungicida), vinagre, zumo de limón.

...