Curva De La Tolerancia A La Glucosa

Universidad de Oriente

Núcleo de Sucre

Escuela de Ciencias

Departamento de Bioanálisis

Prof: Bachilleres:

Milagros Fariñas Heleannys, López C.I:19237261

Mendoza, Manuelys C.I:17762986

Véliz, Yajaira C.I: 19.081.818

Cumaná, julio de 2012

METODOLOGÍA

 MATERIALES Y MÉTODOS

Los materiales que se utilizaron en esta práctica fueron:

• Tubos de ensayo.

• Pipetas de 10 ml.

• Micropipetas.

• Agua destilada.

• Espectrofotómetro.

• Gradillas.

• Agitador.

METODOLOGÍA

Para la determinación de la glucosa basal y de 2 horas

 Se rotularon 4 tubos de ensayo, el primer tubo se rotuló como blanco, el segundo tubo como estándar, el tercero como muestra basal y el cuarto como muestra de 2 horas.

 Al tubo rotulado como Blanco se le agregaron 30 l de agua destilada y 3ml de reactivo de glucosa, al tubo rotulado como estándar se le agregaron 30l del estándar de glucosa y 3 ml del reactivo. al tercer tubo se le agregaron 30 l de la muestra basal y 3 ml del reactivo, al cuarto tubo se le agregaron 30 de la muestra de 24 horas y 3 ml del reactivo y se llevaron al baño de maría a una temperatura promedio de 37°C por 10 minutos aproximadamente.

 Se leyó en el espectronic a 510 nm las absorbancias de cada uno.

Tabla. N 1 Para la determinación de la glucosa basal y de glucosa a las 2 horas.

Blanco Estándar Muestra basal Muestra 2 h

Agua destilada (µl) 30

Estándar (µl) 30

Suero basal (µl) 30

Suero 2 horas(µl) 30

Reactivo (ml) 3 3 3 3

Para la determinación de fósforo

 Se rotularon 3 tubos de ensayo, el primer tubo se rotuló como blanco, el segundo tubo como estándar, el tercero como muestra.

 Al tubo rotulado como Blanco se le agregaron 30 l de agua destilada y 3 ml de reactivo enzimático, al tubo rotulado como estándar se le agregaron 30 l del estándar de fósforo y 3 ml del reactivo, al tercer tubo se le agregaron 30 l de la muestra y 3 ml del reactivo, se colocaron a temperatura ambiente por 10 minutos aproximadamente.

 Se leyó en el espectronic a 340nm las absorbancias de cada uno.

Tabla. N 2 Determinación de fósforo

Blanco Estándar Muestra

Reactivo (ml) 3 3 3

Suero (µl) 30

Estándar (µl) 30

Agua destilada (µl) 30

Para la determinación de calcio.

*Se rotularon 3 tubos de ensayo, el primer tubo se rotuló como blanco, el segundo tubo como estándar, el tercero como muestra.

*Al tubo rotulado como Blanco se le agregaron 50 l de agua destilada y 2 ml de reactivo de color, al tubo rotulado como estándar se le agregaron 50 l del estándar de calcio y 2 ml del reactivo, al tercer tubo se le agregaron 50 l de suero y 2 ml del reactivo, se colocaron a temperatura ambiente por 10 minutos aproximadamente.

*Se leyó en el espectronic a 570 nm las absorbancias de cada uno.

Tabla. N 3 Determinación de Calcio

Blanco Estándar Muestra

Agua destilada (µl) 50

Estándar (µl) 50

Suero (µl) 50

Reactivo de color (ml) 2 2 2

CÁLCULOS

Glucosa basal (mg/dl) =Concentración del patrón x lectura de la muestra

Lectura del patrón

[GL] basal = 100 mg/dl x 0.213

0.250

[GL] basal = 85 mg/dl

Glucosa 2 horas (mg/dl) = Concentración del patrón x lectura de la muestra

Lectura del patrón

[GL] 2horas = 100 mg/dl x 1.077

0.250

[GL] 2 horas = 430 mg/dl

Fósforo.

Fósforo (mg/dl) = Concentración del patrón x lectura de la muestra

Lectura del patrón

Fósforo (mg/dl) = 5 mg/dl x 0.306

0.382

[F]

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