Discusión, practica 5. Pruebas bioquímicas de identificación bacteriana

Discusión, practica 5. Pruebas bioquímicas de identificación bacteriana. segunda parte.

En esta práctica se realizaron las siguientes pruebas bioquímicas: descarboxilacion de la ornitina y de la lisina, prueba de la ureasa, prueba de rojo de metilo y Voges Proskauer y prueba de citratos.

La descarboxilación de la ornitina permite identificar bacterias de acuerdo a su motilidad a la reacción de Indol a la descarboxilación de la ornitina. Esta prueba ayuda a diferenciar los géneros Enterobacter (+) de Klebsiella (-) (Villarreal & Gómez, 2017). Esta prueba se hizo en el medio de cultivo MIO este medio como su nombre lo indica sirve para observar la movilidad, la produccíon de indol y descarboxilación de la ornitina. La movilidad se detectará por la presencia de turbidez alrededor del punto deinoculación. El indol se formará si la bacteria tiene la capacidad de producir la enzima triptofanasa que desdoblará el aminoácido triptófano en indol, ácido pirúvico y amonio. El indol es incoloro, pero al reaccionar con el reactivo de Kovacs que se adiciona despues de que creció la bacteria, dará un color rojo violeta. Por lo que respecta a la descarboxilacíon de la ornitina como el medio tiene purpura de bromocresol y una pequeña cantidad de glucosa cuando esta se fermenta se produce un color amarillo en el fondo, sin embargo, al descarboxilarse la ornitina se produce putresina la cual es alcalina y sobre pasala acidez dada por la fermentación de las glucosas resultando en un color morado en el fondo.  Las bacterias que se utilizaron fueron P. mirabilis y Klebsiella de las cuales P. mirabilis resulto ser positiva ya que esta bacteria tiene actividad enzimática con la ornitina descarboxilasa. La prueba de descarboxilasion de lisina se realiza para determinar la capacidad de un microorganismo de producir una enzima que descarboxila el aminoácido lisina (Sanchez, 2015). Se utilizaron las bacterias E. coli, Salmonella y P. mirabilis de los cuales E.coli y Salmonella spp. dieron resultados positivos ya que ambas son enterobacterias y tienen actividad con la enzima lisina descarboxilasa, además Salmonella es fermentadora de lactosa. La prueba de la ureasa ayuda en la diferenciación eidentificacion de los generon Klebsiella (+) de Escherichia (-). Dicha prueba sirve para determinar la capacidad de un m.o. para producir la enzima ureasa, la cual hidroliza la urea por rompimiento de los enlaces carbono-nitrógeno de esta diamina, formándose como productos CO2 y amoniaco, esto conduce a un medio alcalino (Villarreal & Gómez, 2017). Las bacterias que se utilizaron para esta prueba fueron Proteus y E. coli de los cuales Proteus dio positivo ya que es productor de la enzima ureasa. Las pruebas de rojo de metilo y Voges Proskauer Esta prueba se realiza para determinar la capacidad de un microorganismo de fermentar la glucosa con producción de ácido por la vía ácido mixta o con producción de un producto final neutro (acetoína) por la vía butanodiólica (MacFaddi, 2003).

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