EVALUACIÓN DEL EFECTO ANTIFÚNGICO DEL EXTRACTO ETANOLICO DE Ilex guayusa “
Enviado por Esthefanie Fuentes Pizarro • 30 de Septiembre de 2016 • Apuntes • 1.678 Palabras (7 Páginas) • 236 Visitas
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EVALUACIÓN DEL EFECTO ANTIFÚNGICO DEL EXTRACTO ETANOLICO DE Ilex guayusa “Guayusa” SOBRE Fusarium sp.
Fuentes Pizarro Esthefanie
(tefibio@hotmail.com)
- RESUMEN
En el presente trabajo de investigación se evaluó el efecto antifúngico que tiene Ilex guayusa ¨guayusa¨ sobre Fusarium sp.. Las cepas se obtuvieron de frutos colectados en los mercados Mayorista y La Hermelinda. Se obtuvo el extracto alcohólico en el laboratorio de Quimica análitica de la Facultad de Ingenieria química y posteriormente se concentró para su posterior mezcla a tres concentraciones con el medio Agar papa y dispensado en 3 placa por tratamiento y una placa control, llevando a cabo la siembra respectiva de cada sepa. Incubándola por 7 días y tomando medidas del crecimiento de las colonias cada 24 horas a partir de 48 de la siembra.
- ABSTRAC
In this research the antifungal effect of Ilex guayusa guayusa on Fusarium sp was evaluated .. The strains were obtained from collected in the Wholesale and Hermelinda fruit markets. the alcoholic extract was obtained in the laboratory of Analytical Chemistry, Faculty of Chemical Engineering and then concentrated for further mixing three levels with the Agar potatoes and dispensed in 3 plate treatment and control dish, holding planting each respective know. Incubating for 7 days and taking measures colony growth every 24 hours from seeding 48.
- INTRODUCCION
Los hongos fitopatógenos son los causantes de grandes pérdidas en frutas y verduras en diferentes etapas del desarrollo de las plantas1. En su gran mayoría las plantas son altamente susceptibles al ataque de diversos hongos, los cuales, además de causar pudriciones, pueden producir micotoxinas, lo que las hace no apta para su consumo.
Es difícil determinar la magnitud de las pérdidas debido a estos ataques, sin embargo, son significativas y varían ampliamente según el producto 2.
El control químico es la principal medida utilizada en el control de enfermedades de producidas por hongos fitopatogenos.3 Sin embargo, el desarrollo de resistencia en patógenos la creciente preocupación pública en relación a la contaminación de productos perecederos con residuos de fungicidas, ha estimulado la búsqueda de nuevas alternativas de control. 4
La utilización de fungicidas es cada vez menos recomendable y más restringida debido a los problemas de contaminación ambiental que de su aplicación se derivan y por la frecuente aparición de cepas del patógeno resistentes a los fungicidas utilizados7.
Los extractos naturales son productos a base de sustancias producidas por las plantas8. Pueden reforzar la fortaleza de la planta, repeler o suprimir al patógeno. Su eficacia depende de muchos factores, no todos ellos controlados totalmente; es por ello que los resultados pueden ser variables, en función del estado del cultivo, las condiciones de extracción, la calidad de la planta de la cual se extrae la sustancia, etc9. Muchas pueden favorecer los mecanismos de defensa de las plantas, reforzando la pared celular, o con sustancias inhibidoras de los patógenos, sobre todo en condiciones de estrés (falta de agua o nutrientes, ataques fuertes de insectos, etc.).10
El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto antifúngico del extracto alcoholico de Ilex guayusa Loes ¨guayusa¨.” sobre Fusarium sp.
- MATERIAL Y METODO
Se cultivó Fusarium sp de mandarina obtenida en los mercados Mayorista y La Hermelinda, también se obtuvo de una placa ya sembrada con anterioridad.
- Aislamiento y microcultivo
Se aisló en microcultivo el hongo Fusarium sp utilizando medio Agar papa en cuatro placas, una de ellas se tomó como control de crecimiento del hongo como base y las otras tres se utilizó para contrastar el efecto inhibitorio de la guayusa en las concentraciones consideradas.
- Extracto etanólico de Ilex guayusa
Se tomaron únicamente hojas de la planta Ilex guayusa Loes. El extracto alcoholico se preparó colocando las hojas en papel manteca y amarrándolo como paquete, se llevó a la estufa por 3 horas luego trituró las hojas en un mortero hasta obtener partículas moderadamente pequeñas, semipulverizadas. Se depositó las partículas obternidas en un frasco de vidrio color caramelo de 1 litro con alcohol de 96° y se aisló en una parte oscura del laboratorio. Culminado este periodo de tiempo se procedió a filtrar usando papel filtro N° 2 y con un embudo, tres veces; se colocó nuevamente en el frasco color caramelo y se calculó los sólidos del extracto para poder obtener la concentración exacta.
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Según la concentración obtenida, se dedujo que para poder obtener extracto menos concentrado y poder utilizar extracto al 2%, 5% y 10%, se debería diluir en alcohol el extracto ya obtenido dividido en tres frascos color caramelo para evitar alguna alteración de nuestro extracto.
- Preparación de medio de cultivo, siembra y evaluación.
Diferentes porciones de extracto etanólico de Ilex guayusa ¨guayusa¨ (hoja) fueron mezcladas con el medio de cultivo Agar papa en concentraciones de 2%, 5% y 10%; para posteriormente esterilizarla y vaciarla en placas Petri. Como medio de control se utilizó Agar papa.
La inoculación y sembrado de los hongos se llevó a cabo teniendo en cuenta las mayores medidas de seguridad ante la contaminación del medio ambiente ante el cultivo; las especies ya obtenidas en microcultivo, se inoculo el hongo al medio de cultivo Agar papa (placa control), sembrando al medio de la placa; el mismo procedimiento se realizó con las placas con medio de cultivo más el extracto.
La evaluación del diámetro de crecimiento del hongo se determinó a partir de las 48 horas de inoculación. La medida del diámetro de crecimiento se evaluó utilizando una regla calibrada en mm, teniendo en cuenta el mayor y menor diámetro de crecimiento de la colonia, obteniendo así un promedio por placa; el número de días evaluados después del sembrado fueron 4 días, por cada 24 horas iniciando a las 12 horas.
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