Enzimas. La cinética enzimática es el estudio de la velocidad
Enviado por Sofia0896 • 15 de Septiembre de 2015 • Informes • 1.048 Palabras (5 Páginas) • 181 Visitas
Enzimas
Introducción
La cinética enzimática es el estudio de la velocidad de una reacción catalizada por una enzima y los principales factores que intervienen como inhibidores. La sustancia en la cual actúa la enzima se identifica como sustrato y las producidas a partir de este sus productos.
La principal función de una enzima es minimizar la energía de activación, para asi permitir mayor velocidad y eficiencia a la reacción en las condiciones adecuadas de temperatura, nivel de pH y concentración.
Objetivos
- Explicar como actúan las enzimas en las reacciones enzimáticas.
- Identificar los factores que en la actividad enzimática.
- Desarrollar los conocimientos teóricos adquiridos en clases con las actividades experimentales en el laboratorio.
Materiales y métodos
- Detección de peroxidasa en papa
- Papa en cortes transversales con al menos una yema
- Guayacol al 2[pic 1]
- Peróxido de hidrogeno al 1[pic 2]
- Agua
- Plato Petri
- 4 tubos de ensayo
Para demostrar la detección de peroxidasa: Se colocó en un pato de Petri 4 cortes de papa y se agregó una solución de guayacol al 2, luego se eliminó el guayacol y se tomaron 2 tubos de ensayo al primero se agregó una solución de peróxido de hidrogeno al 1 y al otro agua, se observó detenidamente el desarrollo de la reacción.[pic 3][pic 4]
Luego se repite el mismo proceso pero con los cortes de papa previamente hervidos por 5min, se compararon los resultados obtenidos en las dos pruebas.
- Especificidad de las enzimas
- Clara de huevo
- Solución de almidón (2cc) al 5%
- Solución de amilasa al 10%
- Jugo de piña
- Indicador de Biuret
- Indicador de Lugol
- 6 tubos de ensayo
Se prepararon dos grupos de tubos de ensayo, tres tubos con claras de huevo y tres con una solución de almidón y se rotularon del 1 al 6.
A los tubos numerados 1 con clara de huevo y 4 con el almidón se añadió cada uno 2cc de jugo de piña que contiene enzima bromelia que es una proteasa.
A los tubos 2 y 5 se añadió 0,25 cc de amilasa al 10%.
A los tubos 3 y 6 se añadió 2cc de agua.
A los tubos enumerados 1 a 3 se añadió el reactivo indicador Biuret y a los tubos numerados de 4 a 6 se agregó Lugol.
- Efecto de la concentración y de la temperatura sobre la actividad enzimática
- Efecto de la concentración del sustrato sobre la actividad enzimática
- Solución de almidón a las concentraciones (0%, 1%, 3%, 5%)
- Reactivo indicador Lugol
- Solución de amilasa al 10%
- 4 tubos de ensayo
Se prepararon 4 tubos de ensayo con 2cc de solución de almidón cada uno a diferente concentración (0%, 1%, 3%, 5%), se rotularon los tubos del 1 al 4.
Se añadió 3 gotas de reactivo Lugol y se mezcló la solución hasta obtener un color uniforme, se agregó a cada tubo 0,25 cc de amilasa al 10% y se pusieron a baño María a 37°C, luego de reposar 30 min se añadieron nuevamente 2 gotas de Lugol. Se observaron los cambios que se producen.
- Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática.
- Solución de amilasa al 5%
- Solución de amilasa al 10%
- Reactivo Lugol
- 4 tubos de ensayo
Se prepararon 4 tubos de ensayo con 8 cc de solución de amilasa al 5%. Se rotularon los tubos de 1 a 4. Se colocaron 2 gotas de reactivo Lugol y 0,25 cc de amilasa al 10% en cada uno y se sometieron a diferentes tratamientos.
El tubo 1 se hirvió y luego se agregó Lugol de nuevo, el tubo 2 se colocó a baño María a 37°C por 30 min, el tubo 3 se colocó en el refrigerador por 30 min, y el tubo 4 se dejó a temperatura ambiente ya que esté se utilizó como testigo, se anotaron las observaciones.
Resultados
- Detección de peroxidasa en papa.
En el cuadro 1 se presentan los resultados de la reacción de la papa en presencia de dos tratamientos en cuatro tubos de ensayo, dos tubos con H2O2 y los otros dos tubos con H2O , sumergida, en sus condiciones naturales y desnaturalizada cada 2 tubos.
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