Informe cuantificacion de proteinas
Enviado por Lissette Fritz • 10 de Mayo de 2018 • Documentos de Investigación • 1.370 Palabras (6 Páginas) • 164 Visitas
Introducción
La cuantificación de proteínas se utiliza para determinar la cantidad de éstas en una muestra determinada, incluye variados métodos que permiten, dependiendo de la proteína que se desea determinar, como esta se va a cuantificar. (2) En este practico de laboratorio se utilizarán los métodos de Biuret y de Bradford. (2) El primero consiste en un reactivo azul que por la reducción de Cu2+ a Cu1+ en medio alcalino, pasa a color violeta cuando reacciona con dos o más enlaces peptídicos. (1) El segundo consiste en la formación de un complejo de coordinación entre el colorante de Coomassie G-250 y las proteínas en la muestra, inicialmente el colorante es de color café rosáceo y unido a la proteína. (1)
Cálculos y resultados
Parte I:
Tubo 1: 10mg/ml * 0 ml = C2 * 2,5 ml
C2 = 10 mg/ml * 0 ml
2,5 ml[pic 1]
C2 = 0 mg/ml
Tubo 2: C2 = 10 mg/ml * 0,1 ml
2,5 ml
C2 = 0,4 mg/ml
Tubo 3: C2 = 10mg/ml * 0,2 ml
2,5 ml
C2 = 0,8 mg/ml
Tubo 4: C2 = 10 mg/ml * 0,3 ml
2,5 ml
C2 = 1,2 mg/ml
Tubo 5: C2 = 10mg/ml * 0,4 ml
2,5 m
C2 = 1,6 mg/ml
Tubo 6: C2 = 10mg/ml * 0,5 ml
2,5 ml
C2 = 2 mg/ml
Tubo | Absorbancia (540nm) |
Blanco | 0 |
2 | 0,024 |
3 | 0,119 |
4 | 0,218 |
5 | 0,294 |
6 | 0,370 |
M.P | 0,102 |
y = 0,1971x – 0,0262[pic 2]
0,102 = 0,1971x – 0,0262
X = 0,102 + 0,0262
0,1971
X= 0,65 mg/ml de muestra problema “A”
Parte II:
Hacer dilución de BSA 0,5 mg/ml de 500 µL:
10 mg/ml * V1 = 0,5 mg/ml * 0,5 ml
V1 = 0,5 mg/ml * 0,5 ml
0 mg/ml
V1 = 0,025 mlL
V1 = 0,025 ml * 1000 = 25 µL de BSA
Tubo 1: 0,5 mg/ml * 0 ml = C2 * 1,1 ml
C2 = 0,5 mg/ml * 0 ml
1,1 ml
C2 = 0 mg/ml
Tubo 2: C2 = 0,5 mg/ml * 0,005 ml
1,1 ml
C2 = 2,27 x 10-3 mg/ml
Tubo 3: C2 = 0,5 mg/ml * 0,01 ml
1,1 ml
C2 = 4,55 x 10-3 mg/ml
Tubo 4: C2 = 0,5 mg/ml * 0,015 ml
1,1 ml
C2 = 6,82 x 10-3 mg/ml
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