LABORATORIO DE BIOQUIMICA CARBOHIDRATOS

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FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE

DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA AMBIENTAL

LABORATORIO DE BIOQUIMICA

CARBOHIDRATOS 

Prof. Nelson vega

OBJETIVOS:

• Identificar carbohidratos mediante pruebas cualitativas en diferentes muestra biológicas
• Diferenciar entre carbohidratos reductores y no reductores

Generalidades:

Los carbohidratos se identifican generalmente haciéndolos reaccionar con fenol en presencia de un ácido concentrado no oxidante, con lo que se obtienen diferentes coloraciones. Muchos carbohidratos se caracterizan por poseer un carbono reductor. Este permite que una reacción sirva para diferenciar entre carbohidratos reductores y no reductores, utilizando reactivos que contienen el ion cúprico que se reduce a Cu2O.

PRUEBA DE MOLISH: Se utiliza para comprobar la presencia de carbohidratos.es un solución de al 5% e alfa naftol y se usa para reconocer los carbohidratos en general

PRUEBA DE BENEDICT: esta prueba es utilizada para reconocer carbohidratos reductores. el reactivo se prepara disolviendo 173gde citrato de sodio y 100 de Na2CO3 anhidro en 800ml de agua y se adiciona a la solución inicial hasta completar un litro de solución.

PRUEBA DE BARFOED: permite comprobar la presencia de monosacáridos (fructosa). El reactivo de Barfoed es una solución de acetato cúprico en ácido acético que se prepara disolviendo 16.6g de acetato de cobre cristalizado en 245ml de agua y agregándole 2.4ml de ácido acético glacial.

PRUEBA DE SELIWANOFF: con este se comprueba la presencia de carbohidratos tipo cetosa, dando una coloración rojiza con o sin precipitado. El reactivo de seliwanoff, es una solución de resorcinol en HCl.

PRUEBA DE LUGOL: sirve para determinar la presencia de (polisacáridos) almidón y glucógeno. El reactivo de lugol es una solución de yodo.

PROCEDIMIENTO

• PRUEBA DE MOLISH:

En un tubo de ensayo agregue 2 ml de solución de sacarosa, agregue dos gotas de reactivo de molish mezcle totalmente, incline el tubo y agregue lentamente de manera que resbale por las paredes 1 ml H2SO4  concentrado, no agite, observe la formación de un anillo purpura o violeta entre los dos líquidos ¿Cuál es el fundamento de la prueba?

• PRUEBA DE BENEDICT:

Coloque 2ml de benedict en un tubo de ensayo  y agregue 1ml de solución de glucosa. Coloque el tubo en baño de agua hirviendo durante 3 minutos. La formación de un precipitado de Cu2O es indicio de prueba positiva de carbohidratos reductores. ¿Qué coloración toma una prueba positiva?, ¿cuál es su fundamento? Repetir la prueba con una solución de  sacarosa.

• PRUEBA DE BARFOED

Agregue 2ml de solución de arabinosa y 2ml de reactivo de barfoed, caliente por 5 minutos y observe; la formación de un precipitado rojo es señal de una prueba positiva para monosacáridos. Repetir con una solución de maltosa

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