Laboratorio Bioquimica

LABORATORIO

BIOQUÍMICA

DIANA MARGARITA ARBOLEDA CODIGO 43.365.923

GERMAN ABEL AVILA MENDOZA CODIGO 79381206 GRUPO 32

TUTOR VIRTUAL: CORREO:

MARIA ELENA

TUTOR VIRTUAL: CORREO:

CURSO

TUTOR

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD

CEAD MEDELLÍN

2011

DEDICATORIA

Sin las pautas que nos enseña la bioquímica, costaría trabajo comprender el funcionamiento de nuestro mundo, para nosotros, como estudiantes de tan maravillosa, y cada vez, más sorprendente materia, es un deleite adentrarme en los saberes de esta materia.

Gracias a este laboratorio, se me abre aún más la mente y el espíritu curioso para continuar con el desarrollo de esta área, pilar de la carrera ingeniería en alimentos.

La dedicación de este trabajo, me resulta fácil otorgársela a los maestros que nos trasmiten día a día sus conocimientos, mediante prácticas didácticas y teorías fascinantes, como manera implícita y fin único de convertirnos en profesionales idóneos en este campo del saber.

INTRODUCCIÓN

El desarrollo actual que alienta el ser humano pretende básicamente comprender condiciones particulares de sustancias, por ejemplo en lo que respecta a la comprobación y determinación de diversas características usando técnicas experimentales de laboratorio por medio de la bioquímica. Es esta ciencia poseedora de una enorme y vital importancia para el entendimiento de muchos compuestos y alimentos no solamente en cuanto a conocimiento, si no que además contribuye a la Produccion y síntesis de innumerables productos y materiales a través de la industria química. Con este laboratorio se pretende afianzar conocimientos básicos acerca los aminoácidos, proteínas, azucares reductores, espectrofotometría etc. Pretendiendo además encontrar en una forma mas clara la integración de conocimientos teóricos con los prácticos.

En una forma general este trabajo tiene como propósito comprobar los principios básicos de la bioquímica y experimental, a la vez de conocer los procedimientos metodológicos utilizados para el reconocimiento e identificación de procesos usados en diversas determinaciones, sea de humedad, de cenizas, acidez, etc.

Este informe es una estrategia de aprendizaje y acercamiento teórico a lo que se va a realizar en las prácticas de laboratorio y a su interpretación; en este mostramos definiciones y una aproximación a los conceptos que se van a trabajar durante dichas prácticas, los acontecimientos que se dan en las reacciones y demás partes de las prácticas de laboratorio, es siempre mucho más importante que realizar un trabajo técnico bien sin entender por qué o para que se realiza. Por eso se realizó esta consulta de conceptos que sirven como una introducción para que como futuros profesionales podamos comprender todo lo que se va a trabajar a lo largo de las prácticas.

OBJETIVOS

• Estudiar la actividad de una enzima y la variación de dicha actividad debida a la modificación de los factores externos del ambiente en que se desenvuelve.

• Ilustrar la presencia de la enzima catalasa en tejido vegetal.

• Aplicar nociones teórico-prácticas de química, para detectar la actividad enzimática de la catalasa, midiendo la cantidad de oxígeno desprendido al llevarse a cabo la descomposición de peróxido de hidrógeno, catalizada por dicha enzima.

•

PRACTICA 1 y 2

 METODOS CUALITATIVOS PARA LA IDENTIFICACION DE AMINOÁCIDOS Y PROTEINAS

 FRACCIONAMIENTO DE PROTEÍNAS EN SEMILLAS DE LEGUMINOSAS Y CEREALES POR SOLUBILIDAD

Unidad 1: Biomoléculas, específicamente el capítulo 1, aminoácidos

y capítulo 2, péptidos y proteínas.

INTRODUCCIÓN

Las proteínas son las biomoléculas más abundantes después del agua y desempeñan un gran número de funciones, que las caracterizan como componentes esenciales e indispensables para la vida. Virtualmente todos los procesos en los organismos vivos dependen de este tipo de moléculas. Por ejemplo, las enzimas y las hormonas polipeptídicas dirigen y regulan el metabolismo en el cuerpo, mientras que las proteínas contráctiles del músculo permiten el movimiento. En el hueso, forman el esqueleto necesario para el depósito de cristales de calcio y fosfato, actuando como lo hacen las varillas en el concreto armado. En el torrente sanguíneo, las proteínas como la hemoglobina y la albúmina plasmática son moléculas esenciales para la vida, igualmente las inmunoglobulinas participan en la destrucción de bacterias y virus. En resumen, las proteínas realizan una increíble diversidad de funciones.

Las proteínas no son más que polímeros de 20 L alfa aminoácidos unidos mediante enlaces peptídicos y van a mostrar una amplia variación en sus tamaños, formas y propiedades. Sus propiedades químicas y fisiológicas dependen no sólo de su tamaño y forma, sino también de las propiedades de los aminoácidos que las componen.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

 Reconocer los aminoácidos como unidades estructurales de las proteínas

 Analizar mediante reacciones cualitativas coloreadas la presencia de aminoácidos y enlaces péptidos en las muestras

 Establecer la relación entre la estructura y la función de las proteínas

 Aprobar la teoría con la practica en relación al comportamiento según la solubilidad de la proteína

 Obtener las fracciones de albúmina, globulina, globulinas, prolaminas y glutelinas a partir de tejidos biológicos.

 Que el estudiante calcule mediante espectrofotometría, la concentración de proteínas en cada una de las fracciones anteriores.

MARCO TEORICO

Prueba De Biuret Con Sulfato De Cobre: El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos o más enlaces peptídico en sustancias de composición desconocida.

Está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4O6•4H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de cadena corta. El Hidróxido de Potasio no participa en la reacción, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar.

Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un método calorimétrico que permite determinar la concentración de proteínas de una muestra mediante espectroscopía ultravioleta-visible a una longitud de onda de 540 nm (para detectar el ión Cu2+).

Reacción de la prueba de biuret

Enlace peptídico: es un enlace covalente entre el grupo amino (–NH2) de un aminoácido y el grupo carboxilo (–COOH) de otro aminoácido. Los péptidos y las proteínas están formados por la unión de aminoácidos mediante enlaces peptídicos. El enlace peptídico implica la pérdida de una molécula de agua y la formación de un enlace covalente CO-NH. Es, en realidad, un enlace amida sustituido.

Podemos seguir añadiendo aminoácidos al péptido, pero siempre en el extremo COOH terminal.

Para nombrar el péptido se empieza por el NH2 terminal por acuerdo. Si el primer aminoácido de nuestro péptido fuera alanina y el segundo serina tendríamos el péptido alanil-serina.

Niveles de estructuración: La estructura de las proteínas puede jerarquizarse en una serie de niveles, interdependientes. Estos niveles corresponden a:

1. Estructura primaria, que corresponde a la secuencia de aminoácidos.

2. Estructura secundaria, que provoca la aparición de motivos estructurales.

3. Estructura terciaria, que define la estructura de las proteínas compuestas por un sólo polipéptido.

4. Estructura cuaternaria, si interviene más de un polipéptido.

Desnaturalización por calor y pH extremos: es un cambio estructural de las proteínas o ácidos nucleicos, donde pierden su estructura nativa, y de esta forma su óptimo funcionamiento y a veces también cambian sus propiedades físico-químicas.

Las proteínas se desnaturalizan cuando pierden su estructura tridimensional (conformación química) y así el característico plegamiento de su estructura.

Las proteínas son filamentos largos de aminoácidos unidos en una secuencia específica. Son creadas por los ribosomas que "leen" codones de los genes y ensamblan la combinación requerida de aminoácidos

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