Los avances en la clonación molecular

Los avances en la clonación molecular han permitido la construcción de numerosos vectores de virus (véase el Capítulo 33). Estos son los virus en los que algunos o todos los genes virales se eliminan por ingeniería genética y son reemplazados por genes extraños Dado que los virus pueden dirigirse a tipos específicos de células de manera eficiente y expresar sus genes en niveles altos, que pueden ser utilizados como vectores para la expresión de una variedad de genes. La introducción de vectores de virus en las células huésped u organismos puede corregir enfermedades genéticas en las que los productos de genes específicos faltan o defectuosos. Los vectores también pueden usarse como vacunas que generan respuestas inmunes contra una variedad va de patógenos no relacionada en un nuevo giro, vectores de virus recientemente se han utilizado para combatir cánceres mediante la expresión de proteínas que matan específicamente a las células tumorales.

fueron el descubrimiento y el estudio intensivo de los virus tumorales de ADN (poliomavirus, virus del papiloma, y oviruses Adén, véanse los capítulos 10-12) y los virus tumorales de ARN (retrovirus, ver los capítulos 25 a 27) de investigación sobre los virus tumorales de ADN llevado al descubrimiento de los oncogenes virales , cuya proteína productos (antígenos tumorales interactúan con numerosas vías de señalización celular para estimular el crecimiento celular y la división de Investigación sobre los virus tumorales de ARN llevado al descubrimiento de la transcriptasa inversa, una enzima que puede hacer una copia de ADN de una molécula de ARN, alterando el - forma dogma central que ". ADN fabrica ARN hace proteínas" Numerosos oncogenes celulares fueron descubiertos incorporado en los genomas de retrovirus Estos oncogenes son genes reguladores celulares normales cuya mutación y / o sobreexpresión puede conducir al desarrollo de cáncer, sus productos proteicos son. Involucrado en una variedad de vías de señalización celular. El estudio de los oncogenes virales y celulares ha llevado a grandes avances en la protección y el tratamiento de la detección del cáncer

DETECCIÓN Y VALORACIÓN DE VIRUS

Mayoría de los virus primero fueron detectados y estudiados por infección de organismos intactos Muchos virus causan enfermedades en el organismo huésped, y así es como los científicos y los médicos por lo general se vienen conscientes de su existencia. Los métodos originales para el estudio de tales virus confiados en la inoculación de animales o plantas con extractos filtrados de los individuos infectados, y su observación de los efectos del virus de la infección. Sin embargo, esto es costoso y requiere mucho tiempo de trabajo, y no es éticamente aceptable cuando se aplica a los seres humanos. Animales de laboratorio experimentales tales como ratones suck- Ling, en la que muchos virus animales son capaces de replicar, se adoptaron para su uso, ya que son relativamente fáciles y baratos de recaudar. Un número de virus NAL males también se han adaptado para crecer en embry onated huevos de gallina, que son fácilmente disponibles de granjas, esto reduce tanto el gasto y el tiempo de ensayos de virus.

EL ENSAYO DE PLACA SE LEVANTÓ DE TRABAJO CON BACTERIÓFAGOS

Virus bacterianos pueden estudiarse fácilmente mediante la inoculación de bacterias cultivadas en tubos o en placas de Petri en mesa de laboratorio dado. Bacterias intactas difractan la luz visible y cultivos líquidos, por lo tanto densas aparecen nublado. Muchos fagos bacteria lisis su célula huésped, y esto provoca una pérdida de lisis en difracción de la luz que conduce a la limpieza de la cultura bacteriana; lisis clara "sirve como un indicador de la replicación del fago Una aplicación más simple y más cuantitativa de la lisis celular es difundir las bacterias en la superficie de agar trient nu en una placa de Petri y aplicar diluciones de una suspensión de fagos. Dondequiera plage se une a un rial bacte celular y repeticiones, que libera de células las partículas de fago de la progenie, que luego son absorbidos por las células ing vecino y aún más replicados Después de varios de estos Ciclos todas las células en un área circular que rodea célula infectada original se lisan. El área de lisis puede ser visto como una "placa" clara contra el fondo nublado de las células no infectadas, que crecen en múltiples capas sobre la superficie del agar en la placa de Petri. El uso de este ensayo de placa (Figura 1.3) permite a los científicos para contar el número de infecciosa virus, partículas en una suspensión con un alto grado de precisión y reproducibilidad. La observación probabilidad de tales placas desempeñó un papel importante en el descubrimiento de bacteriófagos

LAS CÉLULAS EUCARIOTAS CULTIVADAS IN VITRO SE HAN ADAPTADO PARA ENSAYOS DE PLACAS EN EL CULTIVO

In vitro de la salud humana, animal, insecto, y células vegetales se logró en la segunda mitad del siglo XX, y se deja más cómodo y más barato el crecimiento y la titulación de muchos virus. En el caso de virus animales, las células de muchos tejidos diferentes (especialmente a partir de embriones o animales recién nacidos pueden ser inducidas a crecer en una monocapa sobre una superficie de vidrio o de plástico debajo de medios líquidos. Cual células ñados también la producción facilitada de numerosas vacunas d virales (véase Capítulo 34), comenzando con las vacunas contra el virus de la polio que se desarrollaron en la década de 1950. Plague ensayos fueron desarrollados posteriormente para animal, planta, y los virus de insecto utilizando células cultivadas o en vitro. Cuando las células que crecen en una monocapa en un medio líquido son infectado, el virus de la progenie se libera en el medio y puede viajar a sitios distantes, infectando a otras células. Para restringir la difusión de la progenie del virus, las células infectadas se cubrieron con agar que contiene nu- a TRIENT medio. De esta manera, virus liberado puede

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