Para el análisis de los 3 grupos de datos se elaboró una curva de calibración con los siguientes datos (tabla 1)
Enviado por Karen Silva Jimenez • 23 de Noviembre de 2017 • Documentos de Investigación • 1.174 Palabras (5 Páginas) • 251 Visitas
Resultados y Análisis de resultados
Para el análisis de los 3 grupos de datos se elaboró una curva de calibración con los siguientes datos (tabla 1)
Muestra | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
Absorbancia | 0 | 0,05 | 0,1 | 0,3 | 0,5 | 0,7 | 1 |
Concentración | 0 | 5 | 10 | 30 | 50 | 70 | 100 |
Tabla1. Datos para la construcción de la curva de calibrado.
La curva de calibrado se construye midiendo la señal analítica, en este caso la absorbancia, en cada uno de los patrones previamente elaborados. En el eje de ordenadas se asigna el valor de la señal medida (absorbancia) y en el eje de abscisas la concentración del patrón. De esta forma podemos señalar puntos en la gráfica según las coordenadas (concentración (x), señal (y)) (Figura 1).
[pic 1]
Figura 1. Curva/recta de calibración
La gráfica representa una recta ya que la absorbancia mantiene una relación lineal con la concentración de solutos en disoluciones, de ahí que este tipo específico de curva de calibración se conozca también como recta de calibración.
Por otra parte, y teniendo en cuenta los 3 diferentes grupos de datos correspondientes a las variables evaluadas (Concentración de enzima, Concentración de sustrato, Temperatura), se determinó la concentración de producto en cada caso, por extrapolación sobre la gráfica obtenida anteriormente. Para esto, se tuvo en cuenta la ecuación lineal, donde aplicada a nuestra curva, sería:
Y= mX+b
Donde,
- b es la ordenada en el origen (intersección de la recta en el eje de y)
- m es la pendiente de la recta
- X es la concentración del analito, representada en el eje de abscisas
- Y es absorbancia
Tomando dos puntos de la recta se calcula la pendiente
m= (0,7-0,05)/ (70-5)
m= 0,01
Luego, se calcula el punto b.
0,7=0,01(70)+ b
0,7-(0,01*70)=b
0=b
Por lo tanto la ecuación de recta de calibración será
Y=0,01X+0
Concentraciones para grupo 1: Efecto de la concentración de enzima en el progreso de una reacción enzimática.
(Y-b)/m=X
(Y-0)/0,01=X
Tomando en cuenta esta ecuación se despejo Y con las absorbancias respectivas, dando como resultado las concentraciones tabuladas en la tabla 2.
Tubo | Tiempo (min) | Absorbancia (dilución 1/200) | Absorbancia (dilución 1/500) | Concentración (dilución 1/200) | Concentración (dilucion 1/500) |
1 | 0 | 0,029 | 0,03 | 2,9 | 3 |
2 | 5 | 0,074 | 0,065 | 7,4 | 6,5 |
3 | 10 | 0,091 | 0,061 | 9,1 | 6,1 |
4 | 15 | 0,064 | 0,094 | 6,4 | 9,4 |
5 | 20 | 0,111 | 0,056 | 11,1 | 5,6 |
6 | 25 | 0,136 | 0,11 | 13,6 | 11 |
7 | 30 | 0,135 | 0,092 | 13,5 | 9,2 |
Tabla2. Concentraciones respectivas grupo 1
Concentraciones para grupo 2: Efecto de la concentración de sustrato en el progreso de una reacción enzimática.
La tabla 3 tiene tabuladas las concentraciones halladas para este grupo, en donde la diferencia en la mezcla fue la concentración de sustrato. La mezcla inicial contiene la concentracion de enzima 1/200.
Tubo | Tiempo (min) | Absorbancia (relación 1:5) | Absorbancia (relación 1:10) | Concentración (relación 1:5) | Concentración (relación 1:10) |
1 | 0 | 0,057 | 0,025 | 5,7 | 2,5 |
2 | 5 | 0,126 | 0,163 | 12,6 | 16,3 |
3 | 10 | 0,294 | 0,125 | 29,4 | 12,5 |
4 | 15 | 0,306 | 0,112 | 30,6 | 11,2 |
5 | 20 | 0,338 | 0,137 | 33,8 | 13,7 |
6 | 25 | 0,265 | 0,064 | 26,5 | 6,4 |
7 | 30 | 0,243 | 0,081 | 24,3 | 8,1 |
Tabla 3. Concentraciones respectivas grupo 2
Concentraciones para grupo 3: Efecto de la temperatura en el progreso de una reacción enzimática.
La tabla 3 tiene tabuladas las concentraciones halladas para este grupo, en donde la variable en el tiempo era la temperatura. La mezcla inicial contenía: 4ml de buffer citrato+ 1 ml de sustrato (1Mm) + 5 ml de enzima (1/200)
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