Practica De Laboratorio

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES

LABORATORIO BIOQUÍMICA

Alumno: _______________________________________ Código: _________________

Alumno: _______________________________________ Código: _________________

Práctica 8: DETERMINACIÓN DEL PUNTO ISOELÉCTRICO DE LA CASEÍNA.

1. FUNDAMENTO TEÓRICO

La caseína representa el 80% de las proteínas presentes en la leche y el 2,7% en composición de la leche líquida. La caseína es una proteína conjugada de la leche del tipo fosfoproteína que se separa de la leche por acidificación y forma una masa blanca.

En la caseína la mayoría de los grupos fosfato están unidos por los grupos hidroxilo de los aminoácidos serina y treonina. La caseína en la leche se encuentra en forma de sal cálcica (caseinato cálcico).

Todas las macromoléculas de la naturaleza adquieren una carga cuando se dispersan en agua. Una característica de las proteínas es que la carga total que adquieren depende del pH del medio.

Todas las proteínas presentan una carga neta que depende de su secuencia primaria y que varía dependiendo del pH al cual se encuentra la molécula.

Todas las proteínas tienen un pH característico en el cual presentan una carga neta de cero, este pH es conocido como el pI (punto isoeléctrico) y es una de las propiedades de estas moléculas que es de gran utilidad tanto en la industria como en la investigación cuando se pretende utilizar o estudiar alguna proteína en particular.

En el punto isoeléctrico (pI), se encuentran en el equilibrio las cargas positivas y negativas por lo que la proteína presenta su máxima posibilidad para ser precipitada al disminuir su solubilidad y facilitar su agregación.

2. SEGURIDAD DURANTE LA PRÁCTICA

3. TRABAJO INTEGRADO DE LABORATORIO.

CONSULTAS PREVIAS.

1. Observe el siguiente oligopéptido: Ala-Pr-Gly-His-His-Trp-Asn-Asp-Asn-Val-Glu, ¿cuál es su carga neta a pH 7? Explique:_____________________________ _____________________________________________________________________

2. ¿Qué es el isoelectroenfoque? ¿En qué consiste?__________________________ __________________________________________________________________________________________________________________________________________

3. Complete la siguiente tabla:

PROTEINA pI

Pepsina

Albúmina de huevo

5.0

7.0

9.5

Hemoglobina

4. METODOLOGIA

4.1 MATERIALES

Tabla 1. Listado de materiales necesarios para el desarrollo de la práctica por pareja.

ITEM Cantidad

Gradilla 1

Tubos de ensayo medianos 16

Vaso de precipitados de 50mL 2

Varilla de agitación 2

Balón aforado de 50mL 1

Probeta de 50mL 1

Pipetas graduadas de 1, 5 y 10mL 2

Propipeta 1

Vaso de precipitados de 10 y 25 mL 2

Espátula 1

Papel indicador universal 1

4.2 REACTIVOS

Tabla

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