Practica No. 9 Ensayos Cualitativos De Aminoácidos Y Proteínas.
Enviado por Urielrodz • 14 de Julio de 2015 • 2.209 Palabras (9 Páginas) • 1.926 Visitas
Practica No. 9 Ensayos cualitativos de aminoácidos y proteínas.
Fecha de elaboración: 30 de junio del 2015
1OV2 Sección: 2 Equipo: 1
Luna Herrera Rosa Elena
Rodríguez Zambrano Edgar Uriel
Prof.: Bañuelos Ávila Rosa María
Objetivos:
1. Evidenciar los grupos funcionales existentes en los aminoácidos y la reactividad de proteínas con ayuda de diversas reacciones cualitativas.
2. Realizar la hidrolisis total de una proteína.
3. Identificar algunos aminoácidos presentes en el hidrolizado de una proteína a través de reacciones que manifiesten sus propiedades físico-químicas.
4. Identificar por cromatografía en placa fina algunos aminoácidos presentes en un hidrolizado de proteína.
Resultados y Observaciones:
Pruebas de Identificación:
Prueba 1: Reacción Xantoproteíca:
Tubo Resultado Observaciones Con NaOH
Solución A Positivo De un color ligeramente blanco al agregar el ácido nítrico cambio a un color amarillo canario. Se vuelve de un color naranja brillante
Solución D Positivo De un color ligeramente blanco a un color amarillo canario y se formó espuma en la parte superior del tubo. Se forma una gran cantidad de espuma y el color se hace más brilloso y casi naranja.
Prueba 2: Reacción de Precipitación:
Se tenían tres tubos, los cuales fueron marcados como tubo A y tubo B. El primero contenía un sustrato de la Sol. A (Grenetina hidrolizada), el segundo Sol. D (albúmina) y el tercero sería el tubo testigo con dos mililitros de agua destilada. Al agregar 5 mL de solución de hidróxido de sodio al 10% y 1.0% de solución de acetato de plomo al 10%, en el tubo A se presento una reacción exotérmica, ya que este comenzó a calentarse demasiado, en el tubo B no hubo calentamiento. En ambos tubos casi en la superficie se formó una sustancia blanquecina de aspecto grumoso, posteriomente al someter a los tubos a calentamiento, la solución D obtuvo un aspecto café-anaranjado, sin embargo no hubo precipitado, el tubo A no cambio de color pero el precipitado fue constante hasta que se retiro del baño maría.
Tubo Resultado Observaciones
Solución A Positivo Al momento de agregar el acetato de plomo se observó la formación de un precipitado de color gris-negro (Sulfuro de plomo precipitado)
Solución D Negativo Viro de un color blanco a un color café-naranja, pero no se observó la formación de precipitado.
Agua destilada (Tubo testigo) Negativo No hubo cambio de color
Reacción de Biuret:
En esta reacción se demostró la presencia de aminoácidos o cadenas de péptidos mayores a tres unidades.
Se tenía una gradilla con seis tubos de ensayo con distintas sustancias, a cada tubo al final se le agregó 2mL de solución de sulfato de cobre al 2%. Todos los tubos incluyendo el testigo tomaron una coloración azul “aqua”, de ser positiva la prueba este color se tornaría aun más oscuro. En los tubos 2 (sol. C Grenetina sin hidrolizar) y 5 (sol. De albúmina), después de agitar el color azul aqua se convirtió en un azul mucho mas fuerte lo cual nos indica que la prueba para estas dos soluciones fue positiva y cadenas de péptidos mayores a tres unidades están presentes. Los demás tubos no tuvieron cambios significativos
Positivo:
• Sol. C (Grenetina sin hidrolizar)
• Sol. De albúmina
Reacción con Ninhidrina:
•
• Para esta reacción se utilizaron cinco tubos ensayo: un tubo testigo con agua destilada, un tubo con solución B (Grenetina hidrolizada neutra), un tubo con solución C (Grenetina sin hidrolizar), un tubo con solución de albúmina (Sol. D) y un tubo con solución de u aminoácido patrón (Lisina).
• Se obtuvieron los siguientes resultados:
Sustrato Observaciones
Agua destilada Sin cambios
Sol. B Positiva
Sol. C Negativa-tubo contaminado
Sol. D Positiva
Sol. Aminoácido patrón Positiva
Prueba 5: Reacción con Acido nitroso.
Tubo Resultado Observaciones
Solución A Positivo Al agregar HCl viró a amarillo claro; al agregar NaNO2 viró a naranja claro.
Solución C Positivo Al agregar HCl viró a amarillo claro; al agregar NaNO2 viró a amarillo un poco más fuerte.
Solución D Negativo Al agregar HCl viró a amarillo claro y en la parte de arriba se formó un precipitado blanco; al agregar NaNO2 no hubo cambios.
Agua destilada (Testigo) Negativo
Prueba 6: Cromatografía.
Cuestionario experimental:
1. ¿Cómo sabría si la hidrólisis fue parcial o total?
Gracias a las pruebas de identificación que posteriormente a la hidrolisis realizamos lograremos saber si ésta fue parcial o total, en especial la prueba 3 (de Biuret) nos ayuda a identificar si existen enlaces peptídicos, si esta prueba resulta positiva se sabe que no hubo una hidrolisis total, ya que aún existen enlaces entre los aminoácidos, si viraba a un color azul violáceo la reacción era positiva, y por lo tanto se tenía una hidrólisis parcial.
2. Describa: tres tipos de hidrólisis de proteínas.
Hidrólisis ácida: Se basa en la ebullición prolongada de la proteína con soluciones ácidas fuertes (HCl y H2SO4). Este método destruye completamente el triptófano y parte de
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