Recuento en placa
Enviado por jesica_Yul • 29 de Marzo de 2020 • Informes • 1.006 Palabras (5 Páginas) • 1.147 Visitas
SENA
CDA Chía
Evaluación del crecimiento microbiano por la Técnica Estándar de Recuento en Placa
Objetivos:
- Determinar la cantidad de microorganismos viables en una muestra problema por el método estándar de recuento en placa.
- Reconocer la importancia de la técnica estándar de recuento en placa en microbiología básica y aplicada.
- Adquirir destrezas en el desarrollo de la Técnica estándar de recuento en placa.
Fundamentos:
Para evaluar el crecimiento microbiano es necesario realizar medidas cuantitativas de la biomasa microbiana, del número de células por unidad de volumen, el peso de las mismas o algunas de sus actividades metabólicas.
El número total de microorganismos se puede determinar por recuento microscópico directo de los microorganismos, ya sea en frotis coloreado o en cámaras de recuento, por filtración de membrana, coloración y conteo al microscopio, por conteo electrónico (citometria de flujo). En algunas ocasiones es necesario conocer la cantidad de células microbianas que están viables, para este propósito se usan técnicas como: recuento de colonias en placa (ya sea en profundidad o en superficie), filtración por membrana e incubación de esta sobre un medio de cultivo sólido, en medio líquido por el método del Número más probable NMP.
La masa celular se puede determinar directamente por el peso seco de las células o de manera indirecta por el análisis de algún elemento como C, N,S, etc.
La actividad celular relaciona cierta actividad al tamaño de una población, se estudia la concentración de sustancias como: enzimas, CO2 consumo de O2, ATP o algún metabolito.
El recuento de microorganismos viables en placa, permite la determinación de los microorganismos presentes en una muestra en base a su desarrollo en medio de cultivo en placas, formando colonias. Por lo tanto sólo se determinan las células microbianas viables en las condiciones de trabajo.
Las colonias se consideran originadas a partir de una célula, pero a veces la metodología conduce a que puedan surgir de un grupo de células, por lo que se utiliza el término Unidades Formadoras de Colonias (ufc). Además para que todas las células presentes en una caja tengan una adecuada disponibilidad de nutrientes, y que los errores del método sean menores, se establece que las condiciones óptimas de conteo se dan cuando se desarrollan entre 30 y 300 colonias por placa o menos según el caso.
La técnica estándar de recuento en placa es la metodología más usada en el laboratorio de microbiología de alimentos, por esta razón es de vital importancia adquirir destrezas en su aplicación e interpretar adecuadamente los resultados de un recuento microbiológico.
Materiales: (por grupo de trabajo)
Materiales | Cantidad |
Tubos tapa rosca con 9 ml de solución NaCl 0,9% | 3 |
Espátula | 1 |
Beaker 50 ml | 1 |
Erlenmeyer 500 ml | 1 |
Agitador de vidrio | 1 |
Caja de Petri esteril | 6 |
Pipeta 10 ml estéril | 1 |
Pipeteador 10 ml | 1 |
Bolsa para Stomacher estéril | 1 |
Gradilla | 1 |
Pipeta 1 ml | 3 |
Pipeteador de 2 ml | 1 |
Probeta 150 ml | 1 |
Insumos | Cantidad |
Muestra de alimento | 20 g ó ml |
Reactivos | Cantidad |
Jabón líquido | 100ml |
Alcohol 70% | 100 ml |
Agar Plate Count o Estándar Methods | 1 frasco |
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