TRABAJO DE BIOLOGIA, TEMA: BIOMOLECULAS I –PROTEINAS Y ENZIMAS

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA[pic 1]

INFORME N°02

TEMA: BIOMOLECULAS I –PROTEINAS Y ENZIMAS

CURSO : BIOLOGIA GENERAL

PROFESORA: OGATA Gutiérrez , katty

FACULTAD: PESQUERIA

 INTEGRANTES:

-MUÑOZ jabo , marina

-ISIDRO cayhualla , getzabel

-FIGUEROA palomino, CESAR

-LOZA choque , nicol

-LUYO chaman , sofia

-DE LA TORRE ubillus , ana paula

LIMA-PERU

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Las proteínas son macromoléculas constituidas a partir de aminoácidos que desempeñas diversas funciones, que son de extraordinaria importancia en los seres vivos .Se encuentra en cualquier tipo de organismo, representado la mitad del peso seco de sus células.

Existen veinte aminoácidos que entran a formar parte de las proteínas, esto permite que existan posibilidades casi infinitas de polímeros diversos, por consiguiente, pueden múltiples  funciones como: Catalíticas, reguladoras, de transporte o de reserva; dependiendo de la estructura que tengan. La pérdida de esta estructura producida por el calor, exposición con ácidos o bases fuertes, detergente, disolventes orgánicos; se llama desnaturalización.

En caso de las enzimas, son aquellas que aceleran la velocidad de los procesos metabólicos en determinadas temperaturas , ph , presión del medio .Además como cualquier otro catalizador ,las enzimas recuperan su estado inicial después de cada ciclo catalítico. Por otra parte, son catalizadores específicos tanto para el tipo de reacción como para los compuestos sobre los que actúan.

                                                                                                         Biologia - Audesirk, Audesirk, Byers.

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• Identificar la presencia de proteínas.
• Observar la reacción de la enzima catalasa en los distintos sustratos.
• Identificar la reacción de desnaturalización.

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DESNATURALIZACIÓN DE PROTEINAS

Se denomina desnaturalización al proceso por la cual una proteína pierde su estructura nativa, lo que frecuentemente conlleva la pérdida de su actividad biológica. Esta desnaturalización se induce por diferentes tipos de factores, entre los que destacan el calor, los PH extremos y los agentes caotrópicos, como la urea y los detergentes iónicos.

Las estructuras que resultan más afectadas son la cuaternaria y la terciaria si es globular como es en este caso la albumina, aflorando los residuos más hidrófos, y disminuyendo la solubilidad. También llega a afectar la estructura secundaria pero no la primaria, por lo que la cadena polipeptidica queda desplegada pero íntegra.

Llega a ser un proceso irreversible en la mayoría de los casos como por ejemplo hervir un huevo o asar un filete, ilustran tanto la irreversibilidad del proceso como el cambio en las propiedades que sufren las proteínas cuando se desnaturalizan. (BIOLOGIA MOLECULAR Y BIOQUIMICA.PAG 71-72)

ENZIMA CATALAZA

La catalasa es una enzima antioxidante presente en la mayoría de los organismos  aerobios, en este caso podemos resaltar al hígado y a otras muestras como carne y vegetales. Necesaria para descomponer el peróxido de hidrógeno, un compuesto tóxico, que se produce durante el metabolismo celular.  

La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su función es convertir el agua oxigenada (H2O2 ) en agua (H20) y oxígeno (O2), el desprendimiento de oxígeno se pone de manifiesto como un intenso burbujeo. La actividad de la catalasa puede medirse por diversos procedimientos. En todos ellos, sin embargo, hay que procurar operar con la menor concentración posible del sustrato, agua oxigenada y a temperatura baja para evitar la inactivación.(BIOQUIMICA TECNICA PAG 62-64)

REACCION DE BIURET

La reacción es un método colorímetro  ,la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se debe a la presencia  del enlace peptídico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse los aminoácidos. Cuando una proteína se pone en contacto con un alcalino concentrado, se forma una sustancia  compleja  denominada Biuret . El reactivo de Biuret contiene CuSO4.(QUIMICA DE LOS ORGANISMOS VIVOS. Pág. 598-601)

REACCION AMILOLITICA

En esta reacción ocurre cuando la amilasa contenida en la saliva reacciona con el almidón , convirtiéndolo en glucosa y maltosa . Luego al añadir el lugol nos daremos cuenta si reaccionό con la amilosa o la amilopectina ,ya que este reactivo nos indicara el color azul marino intenso para el primero y marrón rojizo para el segundo(BIOQUIMICA . Pág. 480-481) [pic 5]

-        1 huevo

-        Semillas frescas de frijol

-        Goteros

-        Papa

-        1 botella pequeña de agua oxigenada

-        Pequeños trozos de carne e hígado

-        Palitos mondadientes

-        Tubos de ensayo

-        Vaso de precipitado

-      Solución de almidón 1%              

-        Gradilla

-        Cocina

-        Pipetas de 10 y 5 ml

-        Pinzas de madera

-        Lugol

-        Acetona

-        CuSO4  al 1%

-        Solución de albumina

-        Agua destilada

-        Ácido nítrico concentrado

-        NaOH al 40%

-        Ácido sulfhídrico al 75%

-        Placas de porcelana

-        Solución de NaCl al 20%

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1°DESNATURALIZACION DE PROTEINAS:

-Colocar 6 tubos de ensayo(enumerado del 1 al 6)en una gradilla y verter 1ml de solución albúmina a cada uno de ellos (verificar que la solución albúmina haya sido colocada adecuadamente).

-Realiza los siguientes tratamientos a cada uno de ellos:

Tubo 1: Someter a baño maría por 3 minutos.

Tubo 2: Añadir 1ml de acetona.

Tubo 3: Añadir 1ml de ácido sulfhídrico al 75%.

Tubo 4: Añadir 1ml de cloruro de sodio  al 20%.

Tubo 5: Añadir 1ml de ácido nítrico.  

Tubo 6: Añadir 1ml de agua destilada.

2°DETERMINACION DE PRESENCIA DE PROTEÍNAS(REACCIÓN DE BIURET):

-En un tubo de ensayo colocar 1ml de solución de albúmina al 1%, agregar 1ml de solución de NaOH al 40% y mezclar.

-A la mezcla añadir 2 gotas de sulfato de cobre al 1%. La reacción es positiva si se observa un color violeta en la mezcla.

-Hacer blanco negativo o control repitiendo el experimento y sustituir la albúmina por agua destilada .Anotar en el cuadro de soluciones.

3°RECONOCIMIENTO DE LA ENZIMA CATALASA:

-Coger aproximadamente el mismo peso de hígado, carne, papa picada y frijol;y colocarlos en el tubo de ensayo.

-Luego al mismo tiempo añadir 1ml de agua oxigenada (H2O2)a cada tubo de ensayo.

-Anotar lo que sucede en cada tubo .

-Ordenar los tubos según su actividad enzimática (burbujeo-velocidad, cantidad) y anotar en el cuadro de resultados.

4° REACCION AMILOLITICA

-Utilizar los cuatro pozos extremos de una placa de porcelana .

-colocar en cada pozo :

A)Cuatro gotas de lugol.

B)15 gotas de almidón  + 2 gotas de lugol.

C)15 gotas de almidon + 10gotas de saliva,después de 10 minutos , 2 gotas de lugol.

D) D)10 gotas de saliva + 10 gotas de ácido sulfúrico , después de 10 minutos , 10 gotas de almidón ; luego 7 minutos , 2 gotas de lugol.

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1°DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS        

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