Tarea Microbiologia

Cultivo

Uso

Fundamento

Interpretación

Citrato de Simmons

Identificación de microorganismos como bacilos de enterobacterias y otros no fermentadores de glucosa.

Algunas bacterias la ausencia de fermentación, necesitando conseguir energía por otros medios. Hay una única fuente de carbono: citrato.

-: color verde sin crecimiento visible.

+: Azul por presencia de productos alcalinos detectados por el indicador de pH.

LIA

Para diferenciar microorganismos como Salmonella spp.

La peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes para el desarrollo bacteriano, mientras la glucosa es el hidrato de carbono fermentable y la lisina el sustrato utilizado para detectar la presencia de las enzimas decarboxilasa y deaminasa. Basado en la decarboxilación y desaminación de la lisina y en la producción de ácido sulfhídrico.

Decarboxilación de la lisina:+: Superficie alcalina con profundidad alcalina (violeta/violeta).              -: Superficie alcalina con profundidad ácida (violeta /amarillo).

Desaminación de la lisina: +: superficie rojiza por SH2, ennegrecimiento del medio de cultivo.           -: sin cambios cromáticos.

Nitratos o Griess reactivo solución “A”

Prueba de reducción de nitratos a nitritos o gas nitrógeno libre.

Permite diferenciar bacilos Gram negativos en base a la presencia de la enzima nitrato reductasa por la formación de un compuesto diazoico coloreado entre los nitritos generados y los reactivos reveladores.

+: Color rosado-rojo luego del agregado de los reactivos Griess A y B. Reducción de los nitratos a nitritos.

-: Sin color rosado-rojo.

SIM

Verificar la movilidad, producción de indol y de sulfuro de hidrógeno por los microorganismos. Diferenciar miembros de la familia Enterobacteriaceae.

La tripteína y la peptona aportan nutrientes para el desarrollo microbiano. El triptófano constituyente de la tripteína puede ser metabolizado por algunas bacterias para formar indol con la intervención de un conjunto de enzimas llamadas triptofanasa.

Movilidad +: turbidez o crecimiento mas allá de la línea de siembra. -: crecimiento solamente en la línea de siembra.

Producción de SH2 +: ennegrecimiento del medio. -: sin cambio de color.

Prueba del indol +: color rojo. -: incoloro o amarillento.

MIO

Identificación de miembros de la familia Enterobacteriaceae en base a la movilidad, producción de indol y actividad enzimática ornitina decarboxilasa.

Altamente nutritivo por extracto de levadura, peptona y tripteína. Indol puede ser revelado con el reactivo de Ehrlich

Movilidad +: turbidez o crecimiento mas allá de la línea de siembra. -: crecimiento solamente en la línea de siembra.

Ornitina decarboxilasa +: púrpura. -: color amarillo.

Urea o Medio Christensen

Diferenciar microorganismos en base a la actividad ureásica. Identificar bacterias que hidrolizan urea, como Proteus spp. otras enterobacterias y estafilococos.

La tripteína y la glucosa, aportan los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico, y el rojo de fenol es el indicador de pH. El agar es el agente solidificante.

Hidrolizan la urea: color rosado-rojizo.

No hidrolizan la urea: color amarillo.

O/F (Hugh-Lelfson)

Identificar microorganismos con problemas metabólicos oxidativos o fermentativos frente a un determinado hidrato de carbono.

Indica del tipo de metabolismo energético: respiratorio (O) o fermentador (F). Se suele utilizar glucosa como sustrato. Se detecta la acumulación de ácidos con un indicador ácido-base (azul de bromotimol). La bacteria se inocula con el hilo recto (por picadura ) y se incuba en condiciones de aerobiosis (sin parafina)  y de anaerobiosis (con parafina, tubo cerrado), simultáneamente.

Si el pH < 7 (ácido) color amarillo.

Con un pH > 7 (básico) azul verdoso.

pH 7 (neutro) color verde.