Practica De Biologia

PRACTICA N° 3

OBTENCION DEL ADN

OBJETIVOS:

• Conocer la estructura del ADN en diferentes vegetales.

• Extraer el ADN de diferentes vegetales por rompimiento de las estructuras que lo protegen y envuelven.

INTRODUCCION:

La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por ultimo hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que se precipite para su correcta purificación en alcohol.

La solución de lavavajillas y sal ayudada por la acción de la licuadora es capaz de romper la pared celular y la membrana plasmática y nuclear.

Los zumos de piña y papaya contienen enzimas, la papaína, que contribuye a eliminar las proteínas que puedan contaminar el ADN.

El alcohol se utiliza para precipita el ADN que es soluble en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol y el agua.

El proceso de extracción del ADN requiere de ciertas pautas para su correcta purificación que son muy diferentes a los empleados en la purificación de proteínas, lo que refleja las diferencias básicas en la estructura de estos dos tipos de macromoléculas. El primer paso en la purificación del ADN por lo general, consiste en homogeneizar las células y aislar los núcleos de los cuales se extrae el ADN. El medio de extracción ordinario contiene un detergente, enseguida se le agrega solución de te para resuspender el ADN, luego los ácidos nucleicos se precipitan añadiendo etanol. Para concluir el análisis de la extracción del ADN hay que resaltar que en este proceso ocurre una lisis celular lo cual significa que el ADN queda libre por consiguiente hay que protegerlo de las enzimas porque estas podrían degradarlo.

El acido desoxirribonucleico o ADN, es la molécula que guarda el código genético de todas las células, sin importar que el organismo sea multicelular o unicelular, eucariota o procariota, todos tienen el ADN como vehículo de su código genético.

DIFERENCIA ENTRE LA MOLECULA DEL ADN Y ARN

Observamos la secuencia de eventos que indican los esquemas; y que al agregar ablandador de carne, rápidamente se levanta de la mezcla pequeñas estructuras de ADN, parecidas a pequeños hilos expandidos entre la mezcla, como la muestra el tercer esquema.

En la observación microscópica encontraremos el ADN unido a las moléculas de proteínas histonas como la muestra el siguiente esquema.

MATERIAL Y REACTIVOS:

• Microscopio

• Licuadora

• Colador

• Palillos para dientes

• 6 vasos de precipitado de 250 ml.

• 1 probeta de 100 ml

• 3 pipetas de 10 ml

• 1 agitador de vidrio

• 3 tubos de ensayo

MATERIAL BILOGICO:

• Espinacas

• Brócoli chico

• Media taza de chicharos secos color verde

DESARROLLO:

1.- Dentro de la licuadora coloca 1 taza de espinacas picadas, agrega 1.5 gr. De cloruro de sodio, y una taza de agua fría.

2.- Licua a velocidad alta por 15 segundos.

3.- Cuela la mezcla y recíbela en 1 vaso de precipitado

4.- Mide el volumen de la mezcla obtenido utilizando una probeta y agrega 30 ml de detergente líquido.

5.- Agita suavemente hasta que se mezcle el detergente líquido y el licuado.

6.- Deja reposar la mezcla 10 minutos

7.- Vacía la mezcla en 3 tubos de ensayo, llenando hasta la tercera parte.

8.- Agrega una pizca de ablandador de carne a cada uno y agita suavemente, ya que de hacerlo bruscamente se rompiera el ADN dificultándose a la observación.

9.- A cada uno de los tres tubos de ensayo agrega lentamente

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