Microscopia: Reconocimiento Y Preparados Y Colorantes.

“Año de la Integración Nacional y el Reconocimiento de

Nuestra Diversidad”

UNP: FACULTAD INGENIERIA INDUSTRIAL

ESCUELA PROFESIONAL INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

CURSO: Biología General

DOCENTE: Santiago Coronel Chávez

INFORME DE LABORATORIO: 01

TEMA: Microscopia: Reconocimiento y

manejo del microscopio;

Preparados y colorantes.

ESTUDIANTE: Álvarez Huamán Katirin Astrilinda.

FECHA DE EJECUCION: Piura, Martes 12 de Setiembre del 2012.

INTRODUCCIÓN

En su afán de llegar siempre más lejos en la investigación de la naturaleza, de los límites de sus órganos sensoriales, ha construido múltiples instrumentos que le han permitido acceder allí donde los sentidos no podían penetrar.

El microscopio ha hecho posible conocer los mundos de dimensiones ínfimas, entre ellos la célula, base de la vida.

En el siguiente informe presentaré el fundamento teórico seguido de los objetivos a lograr ;así mismo hare una descripción completa del microscopio, después dejare bien en claro algunas definiciones de ciertos preparados y colorantes.

Se hará una descripción del procedimiento experimental, junto con sus observaciones y gráficos. Seguidamente expondré mis conclusiones de la práctica del laboratorio ,basándome en resaltar la importancia del microscopio y su gran aporte a la ciencia.

Finalmente se presentará el cuestionario resuelto y las respectivas referencias bibliográficas.

Con todo ello presentado se espera ,que se pueda cumplir los objetivos propuestos al inicio de la practica para beneficio de nosotros los estudiantes.

PRÁCTICA N° 1

MICROSCOPIA: RECONOCIMIENTO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO; PREPARADOS Y COLORANTES

I OBJETIVOS:

Los objetivos de esta práctica de laboratorio son:

1. Manejar correctamente el microscopio y reconocer sus partes, así como observar preparados en fresco y en seco.

2. Obtener correctamente un preparado en fresco y en seco y usar adecuadamente los colorantes ácidos, básicos y neutros en las preparaciones microscópicas .

I I.FUNDAMENTO TEÓRICO:

Su nombre, está formado por dos palabras griegas: MIKROZ (pequeño) y ZCOPIUM (observación). Es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. El tipo más común y el primero que se inventó es el microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico que contiene dos o más lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. La ciencia que investiga los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama microscopía.

El microscopio fue inventado hacia los años 1610, por Galileo según los italianos, o por Zacharias Janssen en 1590, en opinión de los holandeses. En 1665 aparece en la obra de William Harvey sobre la circulación sanguíneaal observar al microscopio los capilares sanguíneos y Robert Hooke publica su obra Micrographia.

En 1665 Robert Hooke observó con un microscopio un delgado corte de corcho y notó que el material era poroso, en su conjunto, formaban cavidades poco profundas a modo de celditas a las que llamó células. Se trataba de la primera observación de células muertas. Unos años más tarde, Marcello Malpighi, anatomista y biólogo italiano, observó células vivas. Fue el primero en estudiar tejidos vivos al microscopio.

A mediados del siglo XVII un holandés, Antón van Leeuwenhoek, utilizando microscopios simples de fabricación propia, describió por primera vez protozoos ,bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos. El microscopista Leeuwenhoek, sin ninguna preparación científica, puede considerarse el fundador de la bacteriología. Tallaba él mismo sus lupas, sobre pequeñas esferas de cristal, cuyos diámetros no alcanzaban el milímetro (su campo de visión era muy limitado, de décimas de milímetro). Con estas pequeñas distancias focales alcanzaba los 275 aumentos. Observó los glóbulos de la sangre, las bacterias y los protozoos; examinó por primera vez los glóbulos rojos y descubrió que el semencontiene espermatozoides. Durante su vida no reveló sus métodos secretos y a su muerte, en 1723, 26 de sus aparatos fueron cedidos a la Royal Society de Londres.

Durante el siglo XVIII continuó el progreso y se lograron objetivos acromáticos por asociación de Chris Neros y Flint Crown obtenidos en 1740 por H. M. Hall y mejorados por John Dollond. De esta época son los estudios efectuados por Isaac Newton y Leonhard Euler. En el siglo XIX, al descubrirse que la dispersión y la refracción se podían modificar con combinaciones adecuadas de dos o más medios ópticos, se lanzan al mercado objetivos acromáticos excelentes.

Durante el siglo XVIII el microscopio tuvo diversos adelantos mecánicos que aumentaron su estabilidad y su facilidad de uso, aunque no se desarrollaron por el momento mejoras ópticas. Las mejoras más importantes de la óptica surgieron en 1877, cuando Ernst Abbe publicó su teoría del microscopio y, por encargo de Carl Zeiss, mejoró la microscopía de inmersión sustituyendo el agua por aceite de cedro, lo que permite obtener aumentos de 2000. A principios de los años 1930 se había alcanzado el límite teórico para los microscopios ópticos, no consiguiendo estos aumentos superiores a 500X o 1,000X. Sin embargo, existía un deseo científico de observar los detalles de estructuras celulares (núcleo, mitocondria, etc.).

III MATERIALES DE LABORATORIO.

-Microscopio -Mechero - Leishman -células de cebolla – Células de Almidón -Pipetas -Asa de Koll -Eosina -Gradillas

Material que debe traer el alumno:

-Agua estancada

-Alcohol

- fósforos

-Lanceta

-Gotero

-Láminas y Laminillas

-Algodón

DESCRIPCIÓN DEL MICROSCOPIO COMPUESTO:

2. El Microscopio

El microscopio compuesto es un instrumento óptico que se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio óptico común está conformado por tres sistemas:

 Parte óptica : comprende un conjunto de lentes dispuestos de tal manera que produce el aumento de las imágenes que se observan a través de ellas

 Parte mecánica: está constituido por una serie de piezas en las que van instaladas las lentes que permiten el movimiento para el enfoque.

 El sistema de iluminación: comprende las partes del microscopio que reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observación a través del microscopio.

En los siguientes puntos describiremos cada uno de los sistemas nombrados, a fin de tener un conocimiento completo del microscopio.

PARTE ÓPTICA:

El sistema óptico es el encargado de reproducir y aumentar las imágenes mediante el conjunto de lentes que lo componen. Está formado por los oculares y los objetivos.

• Los oculares

Los oculares están constituidos generalmente por dos lentes, dispuestas sobre un tubo corto. Los oculares generalmente más utilizados son los de: 8X, 1OX, 12.5X, 15X. La X se utiliza para expresar en forma abreviada los aumentos.

• Los objetivos.

Los objetivos producen aumento de las imágenes de los objetos y organismos y, por tanto, se hallan cerca de la preparación que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersión.

Clases de Objetivos:

Los objetivos secos

Se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparación. En la cara externa llevan una serie de índices que indican el aumento que producen, la abertura numérica y otros datos

Por el numero de aumento son de 3 clases :

1. De parte aumento =mayor de 0x y menor de10x

2. De mediano aumento=mayor de 10x y menor de 30x

3 De gran aumento=mayor de 30x y menor de 90x.

El objetivo de inmersión:

Está compuesto por un complicado sistema de lentes. Para observar a través de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparación, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 1OOX y se distingue por uno o dos círculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior.

Características:

1. Es el mayor aumento (100x, 150x)

2. La lente frontal es más pequeña.

3. Lleva inscrita una fracción :1/ 12;o un decimal :1,20,1,30 o la palabra oil inmersión .

4. De acuerdo a la procedencia lleva una franja o una raya negra para facilitar su identificación .

Distancia Focal:

Es la distancia que media entre la parte inferior de la lente frontal y el objeto a observar ,cuando se tiene un enfoque perfecto.

Estas distancias focales para los diferentes objetivos son:

-pequeño aumento=entre 0,5 y 3 cm

-mediano aumento= entre 3 mm y 5 mm

-Gran aumento =entre 1mm y 3 mm

-inmersión=entre 0.8mm y 1.20 mm

Sistema de Iluminación

Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la preparación u objeto que se va a observar en el microscopio. Comprende los siguientes elementos:

• El espejo o lámpara de iluminación: Tiene dos caras: una cóncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara cóncava se emplea de preferencia con iluminación artificial, y la plana, para iluminación natural (luz solar). Modernamente se prescinde del espejo en la fabricación de microscopios, ya que éstos traen incorporada una lámpara colocada en el eje del microscopio.

• Condensador: El condensador está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparación. El condensador se halla debajo de la platina. El condensador puede deslizarse sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo que determina su movimiento ascendente o descendente.

• Diafragma: Generalmente, el condensador está provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura y controla la calidad de luz que debe pasar a través del condensador.

• Porta filtro: Es un dispositivo que permite colocar filtros de diferentes colores ,con la finalidad de dar contraste al campo microscópico y facilitar una mejor observación .

La parte mecánica del Microscopio

La parte mecánica del microscopio comprende: el pie, el tubo, el revólver, el asa, la platina, el carro, el tornillo macrométrico y el tornillo micrométrico. Estos elementos sostienen la parte óptica y de iluminación, además permite los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.

• El pie: Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de Y o bien es rectangular

• El tubo Óptico: Tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para evitar las molestias que ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares.

• El revólver. Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se enroscan los objetivos. Al girar el revólver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posición de trabajo, la cual se nota por el ruido de un piñón que lo fija.

• La columna: llamada también asa o brazo, es una pieza colocada en la parte posterior del aparato. Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo inferior se adapta al pie.

• La platina: Es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación u objeto que se va a observar. Presenta un orificio en el eje óptico del tubo que permite el paso de los rayos luminosos a la preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmóvil; en otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.

• Carro: Es un dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizar la preparación con movimiento ortogonal de adelante hacia atrás y de derecha a izquierda.

• El tornillo macrométrico: Girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio, deslizándose en sentido vertical gracias a una cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rápido de la preparación.

• El tornillo micrométrico: Mediante el movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y nítido de la preparación. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

Iluminación y enfoque:

Trayectoria del Rayo de Luz a través del Microscopio

El haz luminoso procedente de la lámpara pasa directamente a través del diafragma al condensador. Gracias al sistema de lentes que posee el condensador, la luz es concentrada sobre la preparación a observar. El haz de luz penetra en el objetivo y sigue por el tubo hasta llegar el ocular, donde es captado por el ojo del observador.

.Poder de definición. Se refiere a la nitidez de las imágenes obtenidas, sobre todo respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la corrección de las aberraciones de las lentes utilizadas.

PREPARADOS Y COLORACIONES

Los preparados para las observaciones microscópicas pueden ser de dos clases.

1) Preparados en fresco:

Son aquellos en donde las sustancia examen no se encuentra fija en la lamina porta-objeto, esta sumergida en una sustancia liquida y generalmente se utiliza una laminilla cubre –objetos para las observaciones Esta clase de preparados se observa comúnmente con objetivos a seco y el microscopio en posición normal (vertical).

2) Preparados en seco:

Son aquéllos donde la sustancia examen se encuentra fija a la lámina portaobjeto.

La observación de estos preparados ,se hace generalmente con el objetivo de inmersión ,aunque inicialmente se utiliza objetivos de menor aumento

Los preparados en seco se hacen por extensión o por frotis.

Extensión:

Consiste en extender la sustancia examen en la lámina portaobjeto, tratando de hacerlo en el centro, uniformemente posible utilizando para ello un asa Koll, mondadientes, etc.

Frotis:

Consiste en extender la sustancia examen en el portaobjeto, utilizando para ello dos laminas portaobjetos .En el tercio externo de una de ellas se coloca la sustancia examen ,sobre el cual se coloca el borde de la otra lamina, de tal manera que forma un ángulo de 45 grado aproximadamente. Después de observar que la sustancia examen se extienda en todo el borde de la lamina superior ,deslizar esta hasta el otro extremo ,mediante un movimiento rápido ,tratando de obtener un frotis fino y uniforme .

Fijación

Consiste en matar la célula, tratando de conservar su estructura morfológica manteniéndola adherida a la lamina portaobjeto .

COLORANTES:

Son sustancias capaces transmitir su color a otros cuerpos.

Clases:

A) por su origen: Naturales y artificiales

- Naturales :son aquellos que se obtienen de organismos animales o vegetales ,tales como :el carmín ,Azafrán ,Hematoxilina,Orceina,etc

- Artificiales :llamados también sintéticos ,son aquéllos que se obtienen con productos derivados de la destilación fraccionada de la hulla ,generalmente se les conoce con el nombre de anilinas.

B) Por su afinidad tintórea:

Erilich, los divide en colorantes ácidos, básicos y neutros.

Colorantes Ácidos: Son aquellos que tienen afinidad espacial por colorear el citoplasma de la célula ,por lo que se les llama colorantes citoplasmáticos .Los más usados son :eosina ,fucsina acida ,acido pícrico,etc.

Colorantes Básicos: Son aquellos que tienen afinidad especial por la cromatina nuclear, llamándoles por eso colorantes nucleares, entre los más usados están : la hematoxilina, azul de metileno ,fucsina básica ,violeta de genciana, thionica,etc

Colorantes neutros: son aquéllos que en el momento de colorear se disocian en sus partes acidas y básica , la primera colorea el citoplasma y la segunda al núcleo, los más usados son:Giemza,Wrigth,May Grunwall,Leishman,etc.

Coloración:

La coloración es el proceso mediante el cual un cuerpo toma color bajo

La acción de otro cuerpo o sustancia llamada colorante y que no se decolora con lavados de agua o cualquier otra sustancia empleada como disolvente.

IV- PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL Y RESULTADOS

PREPARADOS EN FRESCO:

1-Limpiar una lamina portaobjeto con un pedazo de lino o con papel para lentes.

2-con un gotero colocar una gota de agua estancada en el centro de la lámina portaobjetos y sobre la muestra del cubreobjetos.

3-Efectuar la iluminación del microscopio

4)Colocar el portaobjetos en la platina del microscopio, fijarla con las pinzas .La parte que contiene el cubreobjeto y la preparación ,deberá estar sobre el orificio de la platina .

5) Enfocar ,mientras observa por el ocular eleve ligeramente el tubo con el tornillo micrométrico hasta que se visualice el preparado, haga la imagen más nítida con el tornillo micrométrico .

6) El ajuste de la intensidad de la luz se hará con el diafragma

7)se enfoca girando el tornillo micrométrico ,lentamente hacia atrás o hacia adelante para obtener detalles en varios niveles.

8) Las observaciones se inician con el objeto de pequeño aumento, procurando enfocarlo bien.

OBSERVACIONES:

En el agua estancada se ha podido observar algunos seres microscópicos llamados paramecios

Los paramecios se desplazan rápidamente.

Como se observa en la figura:

Muestra de agua estancada

PREPARADOS EN SECO:

a) coloración simple

Cuando se emplea un solo colorante ,acido o básico .

Procedimiento:

1. Extinción o Frotis: sustancia examen , mucosa labial

2. Fijación: al alcohol, calor, etc.

3. Agregar de una a tres gotas con un colorante acido o básico ,dejar reposar por 2 minutos

4. Lavar: en agua corriente hasta que salga incolora.

5. Secar :al medio ambiente o a calor moderado

6. Observar: a objetos de menor y mayor aumento.

7. Observar a inmersión: colocar una gota de aceite de cedro.

(No se pudo realizar en el laboratorio)

b) coloración neutra:

cuando se emplea un colorante, que se va a disociar en su parte ácida y básica .

Procedimiento:

1. Obtención de muestra: con una lanceta estéril realizar una punción en el dedo medio.

2. Frotis: Sustancia examen, sangre.

3. Colorear con dos o tres gotas de colorante Leishman, inmediatamente agregarlas misma cantidad de gotas de agua destilada.

4. Lavar: con agua destilada.

5. Secar: al medio ambiente.

6. Observar: Objetivos de pequeño, mediano y gran aumento.

7. Observar a inmersión. Colocar una gota de aceite de cedro.

8. Esquematizar lo observado.

OBSERVACIONES

Se logra observar presencia de glóbulos rojos en la sangre que se ha obtenido para la experimentación.

Se observan así mismo algunos componentes de la sangre, dependiendo de cuanto se puede graduar el microscopio.

Como se muestra en la figura:

Muestra de sangre

V CONCLUSIONES:

Conclusiones

Las limitaciones para el estudio de las células y tejidos han sido superadas a lo largo del tiempo, gracias al desarrollo tecnológico que ha permitido la construcción de instrumentos de laboratorio, tales como el microscopio, cual permite la observación y obtención de imágenes aumentadas de esos especímenes diminutos, que a simple vista resultan invisibles.

El microscopio ha sido y será el instrumento de mayor utilidad en el estudio de las células y tejidos.

La interrelación de disciplinas ha sido y será siendo necesaria para permitir el diseño de los microscopios y otros instrumentos de laboratorio empleados para resolver limitaciones en el estudio de las células.

Su rol en la formación de las imágenes ha permitido comprender las diferencias entre una imagen real y una imagen virtual

Los microscopios son instrumentos que permiten tanto la observación del aspecto y forma de las células y tejidos como la cuantificación de variables observadas, tales como dimensiones, diámetros, longitudes, cantidades, entre otras. Además de su uso en la biología, tienen un sinfín de aplicaciones en medicina forense, mineralogía, ciencia de los materiales, entre otras.

VI CUESTIONARIO:

1) ¿Cuál es la diferencia entre un microscopio Óptico y un microscopio electrónico?

Comparación entre un Microscopio Óptico y Electrónico

La mayoría de los microscopios electrónicos modernos pueden lograr una resolución de 0,2 nm, unas 1000 veces mejor que la obtenida con el microscopio óptico.

El microscopio electrónico revela muchas organelas que son imposibles de resolver con Microscopio óptico. Pero el Microscopio óptico ofrece muchas ventajas especialmente para el estudio de la célula viva. Una desventaja de Microscopio electrónico es que los métodos químicos y físicos usados para preparar la muestra, no sólo matan a las células sino que puedan introducir artefactos, estructuras peculiares vistas en micrografías que no existe en una célula viva.

La preparación de la muestra para el Microscopio óptico y el Microscopio electrónico resulta similar si se trabaja con las células muertas.

En el microscopio óptico, el poder separador máximo conseguido es de 0,2 décimas de micra, y en el microscopio electrónico, el poder separador llega hasta 10 ángstrom.

Las diferencias más notables de los principales componentes del microscopio óptico y del microscopio electrónico y sus características singulares se especifican en la siguiente tabla.

Tabla 1.13 - Diferencias entre el Microscopio óptico y Microscopio electrónico

MICROSCOPIO ÓPTICO CARACTERÍSTICA MICROSCOPIO ELECTRÓNICO

De interferencia de rayos luminosos 1) IMAGEN DADA POR MECANISMO: De dispersión de electrones

Simple con aire 2) TUBO Al vacío con gran diferencia de potencial

Luz (fotones) 3) FUENTE Filamento de tungsteno (electrones)

Lentes: Ocular, objetivo y condensador 4) ELEMENTOS Bobinas electromagnéticas

Células vivas o muertas 5) ESTUDIAN Células muertas

Coloreadas o no 6) OBSERVACIÓN DE LA IMAGEN Distintas tonalidades de gris. En la actualidad se ven imágenes "sombreadas" electrónicamente.

0,25m 7) LIMITE DE RESOLUCIÓN 3 Å a 5 Å (teórico)

10 Å (en la práctica)

5.500 Å (término medio) 8) LONGITUD DE ONDA 0,056 Å

500 X a 1500 X 9) AUMENTO (el signo X significa aumento) 30.000 X a 1.000.000 X

Carnoy u otros fijadores 10) FIJACIÓN Bicromato de potasio, tetróxido de osmio, formaldehído.

Parafina o coloidina 11) INCLUSIÓN Acrílicos o resinas de epoxi.

Con el micrótomo. (cuchilla de acero). Cortes de 10m 12) CORTES Con ultramicrótomo. (cuchilla de diamante o vidrio) Cortes de 100 a 500 Å.

De vidrio 13) PORTAOBJETO Placas de Colodion, aluminio o berilio.

Nivel microscópico:

ESTRUCTURA 14) NIVEL DE OBSERVACIÓN Nivel submicroscópico:ULTRAESTRUCTURA

2) ¿Por qué se utiliza el aceite de cedro en la observación con los objetos de inmersión?

El aceite tiene un índice de refracción similar al del vidrio (1,5 aprox.) y se utiliza para el objetivo de 100X. Se usa generalmente aceite de cedro. No se puede usar el objetivo de 100X en seco, a diferencia del de 40X, 10X y menores

a) Los objetivos de mayor aumento, tienen una distancia focal muy pequeña y además la primera lente del objetivo es de pequeño diámetro.

b) Los rayos que desde la muestra se dirigen al objetivo atraviesan el vidrio del cubreobjeto y al pasar al aire se separan de la normal. Algunos rayos incluso sufren reflexión total en la interfase vidrio-aire

c) Solo llega al microscopio una pequeña parte de la luz que parte de la muestra, con el problema que conlleva para la visión.

d) Al intercalar, entre el objetivo y el cubreobjeto una gota de aceite de cedro, de índice de refracción casi igual al vidrio, los rayos emergentes ya no se apartan de la normal, sino que continúan su camino sin desviación, consiguiendo así que una mayor cantidad de luz llegue al objetivo, mejorando notablemente la visión.

La función del aceite de inmersión es restringir el movimiento de la muestra, además de evitar el rozamiento entre el cubre objetos y el objetivo, generalmente se lo utiliza cuando vamos a observar con el objetivo 100x. Otra función del aceite de inmersión es evitar que la luz se desvíe; al contrario lo que se pretende es que la luz llegue concentrada hacia la muestra.

¿Qué tipo de imagen da el acular y el objetivo? ¿Cuáles son las funciones del objetivo y del ocular?

El objetivo forma una imagen real aumentada e invertida. Se dice que la imagen es real porque los rayos luminosos pasan realmente por el lugar de la imagen. El ocular está situado de modo que no forma una segunda imagen real, sino que hace diverger los rayos luminosos, que al entrar en el ojo del observador parecen proceder de una gran imagen invertida situada más allá del objetivo.

3)

4) * Ocular:lente situada cerca del ojo del observador. Capta y amplía la imagen formada en los objetivos.

5) 2 *Objetivo:lente situada cerca del revolver. Amplía la imagen, es un elemento vital que permite ver a través de los oculares

6) Aunque todos los componentes que constituyen un microscopio son importantes, los objetivos son de suma importancia, puesto que la imagen, en definitiva, depende en gran medida de su calidad. Los mejores objetivos son aquellos que están corregidos para las aberraciones.

Ocular: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo.

Objetivo: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta.

Para obtener el aumento total del sistema se multiplica el valor del lente ocular por el objetivo.

ocular :virtual derecha aumentada

objetivo: real invertida aumentada

imagen final : virtual invertida aumentada

Los objetivos

Representan el componente óptico más importante del microscopio. Su principal función consiste en colectar la luz proveniente del espécimen y proyectar una imagen nítida, real, invertida y aumentada hacia el cuerpo del microscopio.

Constituyen un sistema óptico formado por una o varias lentes, las cuales deben estar centradas y los ejes ópticos de cada una deben coincidir exactamente para formar el eje óptico del sistema. Sus lentes están hechas a partir de cristales (espatos, fluorita, entre otros) con un alto grado de calidad y funcionamiento; su precio depende del poder de aumento, resolución y de la corrección de las aberraciones. Muchos fabricantes elaboran objetivos que pueden ser intercambiados y empleados en microscopios de otras marcas comerciales.

.-El ocular

El ocular (del latín oculus = el ojo) está formado por lentes que generalmente son separadas por un diafragma, montadas en las extremidades de un cilindro que va introducido en la parte superior del tubo. El ocular sirve para observar la imagen real e invertida que produce el objetivo, ejerciendo dos funciones:

• Aumenta la imagen y la transforma en una imagen virtual, derecha con respecto a la imagen del objetivo, pero aun invertida, con respecto al objeto. Posteriormente el ojo endereza la imagen.

• Aplana y aclara el campo óptico o plano circular en el que aparece el objeto.

La lente superior se denomina lente ocular y es la que produce el aumento de la imagen real del objetivo; la lente inferior también se denomina colectora y es la que aplana y aclara el campo

¿Cómo se calcula el número de aumentos de una muestra?

3.4.1.-Aumento

El poder de aumento de una lente está determinado por el grado de curvatura de su superficie y la distancia focal. En las lentes convexas mientras mayor sea la curvatura, menor será la distancia focal y mayor será el aumento. Se ha enunciado anteriormente que el microscopio compuesto aumenta en dos etapas y puesto que una sola lente no es suficiente se deben colocar varias lentes una detrás de la otra, potenciando de esta manera el poder de aumento. El primer juego de lentes, cercano al objeto en estudio, se denomina objetivo y el segundo juego, cercano al ojo del observador se denomina ocular (11). Cada sistema de lentes es capaz de producir una imagen aumentada cuyo valor se enuncia con la letra x, así que 10x significa que la imagen está aumentada 10 veces.

Para conocer en el microscopio compuesto el aumento definitivo de una imagen se aplica la siguiente fórmula:

AUMENTO TOTAL: Aumento del objetivo x Aumento del ocular

Aunque esta fórmula básica permite obtener el aumento total de una imagen, con las técnicas de fotografía clásica o fotografía digital y el uso de software de procesamiento de imágenes es posible lograr un aumento suplementario. Para obtener el aumento definitivo habría que considerar los factores de ampliación que se realizan en la pantalla del computador (para luego imprimirla) o al copiar la foto a papel mediante la técnica de fotografía clásica.

El poder de aumento de un sistema óptico tiene sus límites y el aumentar las imágenes acarrea pérdida de información o detalles del objeto estudiado. Esto puede ser resuelto mediante otro principio: La resolución.

Con el microscopio compuesto clásico es posible alcanzar un aumento máximo de 1000x. Esta limitación ha sido resuelta empleando un haz de electrones en lugar de un rayo de luz visible, y se abrió así una nueva era con la microscopía electrónica aplicada al estudio morfológico.

Cuanto más pequeña sea la lente objetivo más aumentos tiene pero la muestra requiere más iluminación externa (ya que deben llegar más fotones a la pequeña zona ampliada para que nos den información de sus partes) y la lente debe colocarse más cerca del objeto.

Cuantos menos aumentos tenga menos luz necesita, cuantos más aumentos más luz. En todo telescopio, el aumento total viene dado por la relación entre la distancia focal del objetivo y la distancia focal del ocular.

Un objetivo de 100 mm de distancia focal combinado con un ocular de 2 mm, ofrecen un aumento de 50 veces (50x). Para calcular este dato no hay más que dividir la distancia focal del telescopio por la distancia focal del ocular, por ejemplo:

Un telescopio con una focal de 600mm y un ocular de 6mm, nos dará como resultado 100x, si al mismo telescopio le ponemos un ocular de 15mm, obtendremos 40x.

Por este motivo, mediante una simple sustitución del ocular es posible variar la capacidad de aumento del telescopio: cuanto menor sea la distancia focal del ocular, mayor será el aumento.

Hay que tener en cuenta que sin embargo, gracias a los oculares no es posible conseguir aumentos portentosos con cualquier tipo de telescopio. El máximo aumento útil depende de la imagen formada por el objetivo y corresponde a unas dos veces su diámetro medido en milímetros.

Por ejemplo, un objetivo de 100mm de apertura, permite hasta 200x como máximo; uno de 150mm hastsa 300x y así sucesivamente.

Se pueden utilizar aumentos mayores a este límite teórico, pero las imágenes obtenidas serán confusas y poco luminosas.

Por lo tanto, no hay que dar crédito a los vendedores o fabricantes que anuncian sus instrumentos como capaces de ofrecer aumentos altísimos: se trata de la clásica trampa para incautos.

He visto en muchos centros comerciales, que vendían pequeños refractores de 60mm de apertura y del que decían que alcanzaba 700x. Mentira no es, ya que en combinación con lentes de barlow (ya explicaremos lo que son) y los oculares adecuados el telescopio puede llegar a ese aumento, pero la imagen será tan lamentable que no merecerá la pena observarla.

7) Ejemplos

8) Esquematice comparativamente la formación de imagen del microscopio óptico con el microscopio electrónico.

Microscopio óptico

Microscopio óptico.Descripción:A) ocular, B) objetivo, C) portador del objeto, D) lentes de la iluminación, E) sujeción del objeto, F) espejo de la iluminación.

VII. Referencias Bibliográficas:

• Enciclopedia Encarta 2000. Microsoft Corporation.

• Enciclopedia Hispánica Millennium. (2000). Volumen 10. Caracas.

• Mazparrote, Serafín. (2000). Biología. 9no. Grado. Editorial Biosfera. Caracas.

• Mundo Científico Nº 27-50. Editorial Fontalba. Barcelona.

ANEXOS

Celulas de cebolla

En el tejido parenquimatozo de la cebolla se observan las celulas con su respectivo nucleo, es de facil observacion tanto en 10x como en 40x

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