CONTRIBUCIÓN DE LAS MUTACIONES JAK2 AL DESARROLLO DE LINFOMA LINFOBLÁSTICO DE CÉLULAS T

CONTRIBUCIÓN DE LAS MUTACIONES JAK2 AL DESARROLLO DE LINFOMA LINFOBLÁSTICO DE CÉLULAS T

Las  neoplasias linfoblásticas de células T precursoras se consideran neoplasias malignas hematológicas agresivas, las mismas que se caracterizan por poseer células blásticas pequeñas y medianas, que se van a desarrollar principalmente en niños (en especial varones adolescentes) aunque también pueden estar  afectados adultos. Estas malignidades se van a manifestar en mayor frecuencia con afectación extensa de la médula y la sangre (llamada leucemia linfoblástica aguda de células T, LLA-T) y con menor frecuencia como una lesión masiva en el mediastino timo / anterior o en los ganglios linfáticos, con menos de 25% de médula blastos (llamados linfoma linfoblástico de células T, T-LBL).  Existe una vía denominada JAK-STAT esta  tiene un papel sustancial en la proliferación, supervivencia y diferenciación de las células precursoras linfoides. Pero no obstante, la contribución de JAK2 al desarrollo del linfoma linfoblástico de células T (T-LBL) sigue siendo poco conocida. Se ha descubierto que mutaciones activadoras de JAK2 en  neoplasias hematológicas, como neoplasias mieloproliferativas, en particular la ganancia de función de la sustitución de valina por fenilalanina en el codón 617 en el dominio pseudoquinasa de JAK2 encontrado en los pacientes con policitemia vera, mostraron que la relevancia clínica de este gen recibió más atención por su posible implicación en la leucemia / linfoma linfoblástico de células T.         Por tal motivo se considera que mutaciones de JAK2 son un evento importante en la patogenia de estas neoplasias aunque como se dijo anteriormente aún no está claro.  Como JAK2 media eventos fisiológicos cruciales, su actividad está estrechamente regulada a través de mecanismos adicionales. La desfosforilación de JAK2 esta mediado por proteínas-tirosina-fosfatasas, tales como SHP1 de igual manera proteínas de señalización de citocinas (SOCS), están implicadas en la regulación negativa de la señalización JAK-STAT por diferentes mecanismos. La expresión reducida de SOCS1 es un evento frecuente en ciertos tipos de linfoma y síndrome mielodisplásico, incluye en pacientes que albergan una mutación activante de JAK2. De igual manera la expresión de otro miembro de la misma familia de proteínas, SOCS3, que se une e inhibe directamente los dominios catalíticos de las proteínas JAK1 y JAK2 se encuentra reducida. Estudios recientes han demostrado un papel nuclear para la activación de JAK2 en la regulación de LMO2.  El JAK2 está presente dentro de los núcleos de las células hematopoyéticas, por tal razón es capaz de aumentar la expresión del gen LIM Only 2 (LMO2). El LMO2 es una proteína necesaria en el proceso de eritropoyesis y en el desarrollo normal hematopoyético y se lo ha implicado como un oncogen potente en un subconjunto de leucemia linfoblástica de células T.  De acuerdo a esto el LMO2 ha sido reportado como uno de los genes cuyos niveles de ARN mensajero fueron más disminuidos por la inhibición de JAK2. Debido a que LMO2 es un oncogén clave que opera en una fracción de linfocitos / linfomas linfoblásticos de células T, los  linfoma linfoblástico de células T que albergan mutaciones sin sentido o la translocación TEL-JAK2 (460, 734 y 829) exhibieron aumentos significativos en la expresión de JAK2 y LMO2 . Esto sugiere que la expresión aumentada de LMO2 puede ser consistente con una mayor presencia de proteína mutante JAK2 en el núcleo.  Los eventos de fusión TEL-JAK2 se han asociado con Leucemia linfoblástica aguda de células T, así como con la leucemia mieloide crónica atípica. La fusión TEL-JAK2 es una fusión génica resultante de una translocación cromosómica entre los cromosomas 9 y 12 observada en la leucemia humana.  Al  menos estas dos mutaciones son capaces de activar constitutivamente la vía de señalización JAK2-STAT5. También en estudios se ha demostrado altos niveles de pSOCS3 (fosforilación de SOCS3) en muestras específicas mutantes de JAK2 de neoplasias mieloproliferativas. Actualmente existen un sin número de métodos que se utilizan para estudiar las mutaciones de este gen y su relación con enfermedades hematológicas, para identificar el TEL-JAK2 translocations se realiza por amplificación por PCR de cDNA la cual usa primers específicos. En lo que respecta al análisis mutacional de JAK2 la transcripción inversa se lleva a cabo usando el sistema de síntesis SuperScript First-Strand para RT-PCR (Invitrogen) seguido de PCR con el sistema Fast Start High Fidelity PCR. En cuanto a la expresión de JAK2 se detecta mediante inmunohistoquímica en secciones de tejido recién congelado. La distribución subcelular de la proteína JAK2 se estudia mediante inmunofluorescencia en células γ2A utilizando conejo anti-JAK2. El fragmento de PCR humano de JAK2 -cDNA se amplifica usando los cebadores. La actividad funcional de los mutantes JAK2 se mide en células γ2A mediante el uso de ensayos de luciferasa dual, entre otros.(1)

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