Calculo UFC

GUÍA DE PRÁCTICAS  

LABORATORIO                   TALLER                                 SIMULACIÓN        CAMPO[pic 3][pic 4][pic 5][pic 6]

CARRERA: Ingeniería Bioquímica

ASIGNATURA: Ingeniería de las fermentaciones

ESTUDIANTES: Guanoquiza Kelly, Telenchana Erika        

NIVEL: 7                                                  GRUPO: 1                   

ÁREA ACADÉMICA: Profesional            DOCENTE: Lic. Danae Fernández Rivero Mg.

CICLO ACADÉMICO: Marzo – Septiembre 2017        

PRÁCTICA N°: 1

TEMA:

AISLAMIENTO DE LEVADURAS

1. OBJETIVOS

GENERAL

• Preparar medios de cultivo YEPD y YEPS para el aislamiento de levaduras de la especie Saccharomyces cerevisiae mediante la técnica de estriado y vertido en caja de Petri.

ESPECÍFICOS

• Calcular el número de Unidades Formadoras de Colonias (UFC) y el peso seco de la levadura.

• Determinar el medio de cultivo más eficiente para el crecimiento de las levaduras de la especie Saccharomyces cerevisiae.

1. CÁLCULOS Y RESULTADOS

CÁLCULOS

• Preparación de 500ml de medio de cultivo YEPD y YEPS.

Medio de cultivo YEPD

Extracto de levadura

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        Peptona

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Dextrosa

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        Agar

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Medio de cultivo YEPS

Extracto de levadura

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Peptona

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Sacarosa

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        Agar

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• Cálculo del número de Unidades Formadoras de Colonias (UFC) de los medios de cultivo YEPD y YEPS.

       Cálculo de unidades formadoras de colonia en medio YEPD

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Cálculo de unidades formadoras de colonia en medio YEPS

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• Cálculo del peso seco de la levadura de los medios de cultivo YEPD y YEPS.

Tabla Nº1: Peso de tubos de centrífuga vacíos y con muestra.

Elaborado por: Guanoquiza K, Telenchana E. 2017.

Fuente: Laboratorio de Ingeniería de las fermentaciones.

Cálculo demostrativo

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Tabla Nº2: Peso seco celular

Elaborado por: Guanoquiza K, Telenchana E. 2017.

Fuente: Laboratorio de Ingeniería de las fermentaciones.

RESULTADOS

• Lectura de las absorbancias de las suspensiones de levadura  utilizadas para la siembra

                  Tabla N°3. Datos de las absorbancias medidas a 700 nm.

   Elaborado por: Guanoquiza K, Telenchana E. 2017.

   Fuente: Laboratorio de Ingeniería de las fermentaciones.

                  Tabla N°4. Datos de las absorbancias medidas a 700 nm.

    Elaborado por: Guanoquiza K, Telenchana E. 2017.

    Fuente: Laboratorio de Ingeniería de las fermentaciones.

• Sembrado por estrías

Medio de cultivo YEPD

[pic 40]Fig. 1. Estriado de la dilución 10-1

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Fig. 2. Estriado de la dilución 10-2

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Fig. 3. Estriado de la dilución 10-4

Medio de cultivo YEPS

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Fig. 4. Estriado de la dilución 10-1

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Fig. 5. Estriado de la dilución 10-2

• Siembra por vertido (para conteo de levaduras)

Medio de cultivo YEPD

[pic 45]Fig. 6. Vertido de dilución 10-1

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Fig. 7. Vertido de dilución 10-2

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Fig. 8. Vertido de dilución 10-4

Medio de cultivo YEPS

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Fig. 9. Vertido de dilución 10-1

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Fig. 10. Vertido de dilución 10-2

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Fig. 11. Vertido de dilución 10-4

1. DISCUSIÓN

La especie Saccharomyces cerevisiae son un tipo de microorganismos pertenecientes a la familia de los hongos de tipo unicelular incapaces de emplear fotosíntesis para su alimentación pero sí metabolizar hidratos de carbono como glucosa, fructosa, manosa, sacarosa y dextrosa. En la práctica realizada se aisló levaduras de la especie Saccharomyces cerevisiae  mediante medios de cultivo ligeramente ácidos (ph 5.8 y 5.4) enriquecidos con dextrosa (YEPD) y sacarosa (YEPS) realizando diluciones (10-1, 10-2,1 0-4, 10-6, 10-8) y aislando los microorganismos mediante siembra por estriado  y vertido en placa. Según Negroni 2009, el medio más completo para obtener un buen rendimiento en el crecimiento de levaduras es el YEPD, ya que la dextrosa al ser considerada un monosacárido (unidad de azúcar simple)  resulta más fácil su asimilación por parte de las levaduras, como se puede observar en las Fig. 6,7 y 8 del medio YEPD, la proliferación de levaduras es mayor en comparación con el crecimiento que se observa en las Fig. 9, 10, 11 del medio YEPS, ya que la sacarosa a pesar de considerarse como fuente energética para el crecimiento de levaduras es un disacárido, lo que significa que está compuesto de dos unidades de azúcar (glucosa + fructosa) siendo químicamente más difícil de digerir por el microorganismo. Otro factor considerado fue el pH, Cortés 2004, menciona que los medios de cultivo utilizados para el crecimiento de levaduras deben tener un pH bajo (ácido) que oscile entre 4,5 y 5,5 con el fin de inhibir la proliferación bacteriana, y por ende evitar la contaminación del cultivo, sin embargo en el medio YEPD el ajuste de pH realizado fue de 5,8 a diferencia del medio YEPS que fue de 5,4, logrando evidenciar la contaminación  del cultivo en la Fig. 6.

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