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Punto Isoelectrico de Proteínas


Enviado por   •  20 de Octubre de 2021  •  Prácticas o problemas  •  379 Palabras (2 Páginas)  •  85 Visitas

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL[pic 1][pic 2]

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

BIOQÍMICA GENERAL

PRECIPITACIÓN, SEPARACIÓN Y PUNTO ISOELÉCTRICO DE PROTEÍNAS 

Alumna: Guerrero De la Luz Lesli Celeste, Venegas Sánchez Melani Fernanda; Grupo: 4QV2; SECCIÓN # 3

Introducción

Las proteínas son macromoléculas formadas por cadenas de aminoácidos. Son uno de los componentes fundamentales y más abundantes de la célula. La solubilidad de una proteína se ve afectada por:

(a) Factores inherentes a las proteínas,  uno de ellos es la composición de los aminoácidos, es decir, una proteína con abundantes aminoácidos polares es en general más soluble que una rica en aminoácidos hidrofóbicos, también a su estructura molecular, ya que las proteínas fibrosas son menos solubles que las globulares.

(b) Factores físicos y químicos presentes en el medio, como son: la temperatura, la constante dieléctrica del medio, el pH y la fuerza iónica.

Objetivos

1.- Identificar

Resultados

Para cada uno de los ensayos se obtuvieron los siguientes resultados:

Tabla 1: Resultados del ensayo de precipitación de proteínas de la clara de huevo por el método de Salting out

Biuret

Interpretación

Filtrado 1

(-)

El proceso no fue suficiente para separar completamente las  proteínas de la clara de huevo.

Precipitado 1

(+)

Presencia de proteínas

Filtrado 2

(+)

Presencia de proteínas

Precipitado 2

(-)

Se precipitaron todas las proteínas

Tabla 2: Precipitación de proteínas de la clara de huevo por efecto del pH y etanol como solvente orgánico

Tubo

1

2

3

Clara de huevo filtrada diluida 1:3 ( mL)

3.0

3.0

3.0

HCl 0.1 N (mL)

1.0

-

-

NaOH 0.1 N (mL)

-

1.0

-

Regulador de acetatos 0.1 N, pH=4.7 (mL)

-

-

1.0

Observaciones

Se observa opalescente

Se solubilizó, se observa un tono claro

Se observa un precipitado

Etanol 96° (mL)

3.0

3.0

3.0

Observaciones

Precipitado color blanco

Ausencia de precipitado, se sigue observando claro

Precipita completamente

Tabla 3: Resultados de la precipitación de las proteínas de la clara de huevo por efecto de la adición de metales pesados

Tubo

1

2

3

4

5

6

Clara de huevo filtrada diluida 1:3 ( mL)

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

HgCl2 5%

0.25

-

-

-

-

-

AgNO3 2%

-

0.25

-

-

-

-

Pb(C2H3O2)2 2%

-

-

0.25

-

-

-

NaCl 5%

-

-

-

0.25

-

-

BaCl2 5%

-

-

-

-

0.25

-

Agua

-

-

-

-

-

0.25

Observaciones

++++

+++

+++

+

Nota: Cuatro cruces significan un completo precipitado, ninguna cruz significa ausencia de precipitado.

Tabla 4: Determinación del punto isoeléctrico de la insulina

...

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