Determinación Cualitativa De Algunos Componentes Del Protoplasma Celular

Determinación cualitativa de algunos componentes del protoplasma celular

INTRODUCCIÓN

Durante este laboratorio se realizaron identificaciones de los compuestos protoplasmáticos que componen a la célula. Estos compuestos están formados por biomolecular, que son compuestos de carbono que poseen una variedad de grupos funcionales y se encuentran jerárquicamente organizados en la célula. Estas pueden establecer unidades monomericas, como es el caso de los monosacáridos y aminoácidos, que al polimerizarse permiten la formación de macromoléculas como son los polisacáridos, almidón y glucógeno. Para identificar estas estructuras o los componentes protoplasmáticos se utilizaron dos reactivos, como fueron el de Benedict, que permite identificar los azucares reductores de algunos monosacáridos y disacáridos, en el que se presenta una reacción oxidativa donde el oxido cúprico se reduce a oxido cuproso, lo que provoca la coloración rojo ladrillo de la solución, y Sudan III que es un compuesto liposoluble que demuestra la presencia de triglicéridos y algunos lípidos. En el caso de la identificación de las proteínas, se utiliza una solución de sulfato de cobre al 0,5 % y una de hidróxido de sodio al 10 %, que dan como resultado una mezcla color violeta, que determina la presencia de proteínas. Por otro lado, para determinar la presencia de colesterol, se llevó a cabo la reacción de Lieberman Burchard, en la cual es positiva la presencia de colesterol, si la coloración se torna café pálida. Esta práctica ayudara a reconocer e identificar algunas de las macro moléculas que componen a la membrana plasmática de las células animales, adquiriendo el conocimiento de sus funciones para la conservación de la estructura y funcionamiento de las células que nos compete en el estudio de las organelas celulares.

MATERIALES Y MÉTODOS

Para determinar los componentes del protoplasma celular, se realizaron métodos cualitativos que ayudarán a la identificación de estos durante la práctica, Se utilizaron:

• Tubos de ensayo

• pipetas

• goteros

• gradilla para tubo de ensayo

• mechero de alcohol

• pinzas

• reactivo de benedict

• solución de glucosa al 3%

• fruta madura

• levadura activa

• almidón

• maceteros de pan

• lugol

• solución de clara de huevo

• solución de gelatina

• suero fisiológico

• hidróxido de sodio al 10%

• sulfato de cobre al 0.5%

• aceite vegetal

• grasa animal

• sudan III o IV

• baño de maría

• agua destilada

• solución sanguínea

• suspensión de levadura activa

• reactivo de difenilamina

• papel filtro

• anhídrido acético

• cloroformo

• ácido sulfúrico concentrado

• solución reactivo de almidón al 1%

Los procedimientos se realizaron de forma distinta cada uno, con la finalidad de lograr obtener los resultados que permitieran el reconocimiento de los componentes del protoplasma celular.

DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS. Determinación de los carbohidratos y más específicamente monosacáridos, en un tubo de ensayos se vertieron 5 ml del reactivo de Benedict y luego se calentó hasta ebullición, se hicieron las respectivas descripciones de lo observado. Luego se añadió al mismo tubo de ensayo 1 ml de una solución de glucosa y se calentó hasta llegar a su punto de ebullición y se anotaron las respectivas conclusiones. En otro tubo de ensayo, se vertieron también 5 ml del reactivo de Benedict, se le añadió un macerado de fruta a la solución y se calentó hasta ebullición. Luego se realizaron las respectivas descripciones de lo observado.

IDENTIFICACIÓN DE POLISACÁRIDOS. Se realizó una suspensión acuosa de 2 ml de almidón y se vertió en un tubo de ensayo, se le agrego a esta solución dos gotas de lugol. Luego se calentó por dos minutos hasta ebullición, se dejo en reposo para que se enfriara y se describieron las observaciones. Como otra muestra para la identificación de polisacáridos, se depositaron dos gotas de lugol en una solución acuosa de macerado de pan, luego se describieron los resultados.

PROTEÍNAS Para identificar las proteínas, se diluyó la clara de un huevo en 50 ml de agua. Luego de extrajo 1 ml de esta solución, se añadieron dos gotas de sulfato de cobre al 0.5 % y 1 ml de hidróxido de sodio al 10 %, finalmente se sacaron conclusiones de los resultados. En otro tubo de ensayo se colocaron 2 ml de gelatina sin sabor y se procedió a agregar 2 gotas de sulfato de cobre y 1 ml de hidróxido de sodio, como en el caso anterior y se agitó, luego se sacaron conclusiones.

LÍPIDOS Para observar los lípidos, se coloco en tubo de ensayo 3 ml de agua, se agregó una pisca del reactivo Sudan III, se agitó y se hicieron descripciones de lo observado. En el mismo tubo de ensayo, se adiciono 1 ml de aceite vegetal, se agitó y se dejó en reposo por dos minutos. Al pasar este tiempo se observaron resultados que permitieron sacar las respectivas descripciones. En otro tubo de ensayo se adicionaron 2 ml de grasa animal, se agregó una pizca de Sudan III, se agitó y se sacaron descripciones de los resultados.

REACCIÓN DE LIEBERMAN BURCHARD PARA COLESTEROL Para observar colesterol, se diluyó una parte de la yema de huevo en 10 ml de cloroformo. Se tomó 1 ml de esta solución colocándola en tubo de ensayo limpio y seco. Luego se adicionó

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