Determinación de fenoles en guarapo

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DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE FENOLES TOTALES DE UNA MUESTRA DE GUARAPO DE DIFERENTES VARIEDADES DE CAÑA.

Jorge Eliecer Urrego Sabogal

Análisis Instrumental. Programa de Química. Facultad de Ciencias Básicas. Universidad de la Amazonia.

28 de mayo 2022

Resumen

Se determina el contenido de fenoles totales mediante el desarrollo de un método espectrofotométrico y mediante el método folin-ciocalteu que consta en utilizar ácido gálico como estándar, por lo que los resultados se expresan como porcentaje de ácido gálico en cada extracto. Las muestras utilizadas fueron guarapo de diferentes variedades de caña utilizando un espectrofotómetro para medir sus absorbancias para así determinar el contenido de fenoles totales. Donde se encontró que la muestra M3 contiene un mayor contenido de fenoles siendo de 362,7482993 ppm y que la muestra M2 también presenta una cantidad significativa de fenoles siendo de 241,1156463 ppm, pero en comparación con las demás muestra es la de menos cantidad. Por otra parte, se visualizó en la curva de calibración que las muestras diluidas con H2O  M1 y M3 al 50 y 25% respectivamente se nota que su concentración de fenoles disminuyo.

Palabras claves:  fenoles, determinación, concentración, curva de calibración, guarapo, caña

Abstract

The content of total phenols is determined by the development of a spectrophotometric method and by the folin-ciocalteu method that consists of using gallic acid as standard, so the results are expressed as a percentage of gallic acid in each extract. The samples used were guarapo of different varieties of cane using a spectrophotometer to measure their absorbances in order to determine the content of total phenols. Where it was found that the M3 sample contains a higher content of phenols being 362.7482993 ppm and that the M2 sample also presents a significant amount of phenols being 241.1156463 ppm, but compared to the other samples it is the one with the least quantity. On the other hand, it was visualized in the calibration curve that the samples diluted with H2O M1 and M3 at 50 and 25% respectively show that their concentration of phenols decreased.

 Keywords: phenols, determination, concentration, calibration curve, guarapo, cane.

Introducción

Partiendo de que una curva de calibración está construida con cantidades conocidas de una sustancia que se utiliza para determinar la cantidad de esta sustancia presente en una muestra incógnita. En diversas determinaciones se cumple una relación proporcional entre la magnitud o intensidad de color que da una reacción y la cantidad del reactivo;(Coto, s. f.) Pero en este trabajo de determino la cantidad de fenoles totales presentes en las muestras de guarapo de diferentes cañas.

Desarrollando un método espectrofotométricas son útiles para determinar el punto de equivalencia de una titulación, siempre que el anualito, reactivo o producto de una titulación absorba radiación. Otra posibilidad es que el indicador de absorbancia proporcione el cambio de absorbancia necesario para determinar el punto de equivalencia. (Kenneth A, 2001) 

Para así determinar la concentración de fenoles totales dichos fenoles son compuestos fenólicos o polifenoles son un gran grupo de sustancias químicas, con diferentes estructuras y propiedades químicas y actividades biológicas, que incluyen más de 8.000 compuestos diferentes. Químicamente, los compuestos fenólicos son compuestos aromáticos con uno o más grupos hidróxido. (Marina et al., 2008), además de la aplicación del método de folin-ciocalteu que consiste en la capacidad de fenoles para reaccionar con agentes oxidantes. El reactivo de FolinCiocalteu contiene molibdato y tungsteno sódico, que reacciona con cualquier fenol para formar un complejo fosfomolíbdico-fosfotúngstico.    

La transferencia de electrones a pH básico reduce el complejo fosfomolíbdico-fosfotúngstico a óxidos que dan el tungsteno azul oscuro (W8O23) y molibdeno (Mo8O23), este color es proporcional al número de grupos hidroxilo en la molécula. (Marina et al., 2008). Teniendo así la práctica como objetivo desarrollar un método espectrofotométrico para la determinación del contenido de fenoles totales de una muestra vegetal y además construir una curva de calibración y por último determinar el contenido de fenoles en una muestra natural.

Materiales y métodos

Los materiales que se usaron para esta práctica son:

• Espectrofotómetro
• 20 tubos eppendorf
• Vidrio de reloj
• Espátula
• Transferpipetas
• 4 balones volumétricos de 10 ml
• 2 Beacker de 200 ml
• Gradilla para tubos eppendorf
• Balón volumétrico de 50 ml
• 2 Erlenmeyer de 100 ml
• 1 pipeta de 2ml
• 4 Beacker de 50 ml
• 1 pipeta de 10 ml
• Puntas para transferpipetas

Reactivos que se usaron:

• Folín-Ciocalteu
• Ácido gálico

• Na2CO3
• Guarapo de diferentes variedades de caña

Se determinó la cantidad de fenoles totales en una muestra de guarapo de diferentes variedades de caña, usando curvas de calibración y el método de Folín-Ciocalteu con 50 μL de la muestra.

Para dicha determinación, vamos a tener dos procesos, desarrollar una curva de calibración y determinar la cantidad de fenoles presente en la muestra representándolo con el ácido gálico.

Para la primera parte el desarrollo de la curva de calibración donde se pesó en la balanza analítica 0,158 gramos de ácido gálico que posteriormente se llevó a un balón volumétricos de 10 ml y luego se aforo con agua destilada para así obtener 10ml de una solución madre de ácido gálico como patrón de 1000ppm, a partir de ella se realizó diluciones en concentraciones (50, 100, 200, 300, 400 y 500 ppm) en tubos eppendorf de 1,5ml.

En la segunda parte se añadió a los tubos de ensayos por triplicado con la ayuda Transferpipetas, 50 μL de muestra a un tubo de ensayo, 425 μL de agua destilada, luego 125 μL del reactivo comercial de Folín-Ciocalteu y por último se agregó 400 μL de Na2CO3 al 7,1 % p/v. En el blanco de la muestra se agrega, 50 μL de muestra en este caso, 550 μL de agua destilada y 400 μL de Na2CO3 al 7,1 % p/v. Se dejó reaccionar por ~40 minutos y se midió la absorbancia a 760 nm. Se prepara una curva estándar de 50 a 500 ppm de ácido gálico (50, 100, 200, 300, 400 y 500 ppm).

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