El laboratorio Nº 5 “Bioenergía: Fermentación alcohólica”

Introducción

El laboratorio Nº 5 “Bioenergía: Fermentación alcohólica” lo primero será explicar que es fermentación alcohólica y sobre que trata el pH, la fermentación responde a cualquier proceso donde sustancias orgánicas sufren cambios químicos con la finalidad de producir energía, generados exclusivamente en condiciones anaerobias (sin participación del oxígeno), ya que algunos microorganismos sólo viven en ausencia de oxígeno, la fermentación alcohólica corresponde a un proceso biológico en las levaduras donde el piruvirato producido en la glicolisis toma esta vía fermentativa al no tener disponibilidad de Oxigeno y no poder seguir la respiración celular  esta vía fermentativa tendrá como producto final etanol y CO2, pH  es una unidad de medida alcalinidad o acides de solución, mas específicamente el pH mide la cantidad de iones de Hidrogeno que contiene una solución determinada su escala de medición será de 0 a 14 (pH: potencial de hidrogeniones) (1) (2)

Objetivos

• Observar levadura en microscopia
• Observar cambio de pH en distintas soluciones
• Observar la fermentación de los distintos tipos de soluciones en levadura

Procedimiento experimental

Fermentación alcohólica en levaduras: Se rotulo 4 tubos de ensayo  en los cuales se coloco tubo Nº1 3ml de glucosa y 3ml de levadura, tubo Nº2  3ml de sacarosa y 3ml de levadura, tubo Nº3  3ml de almidón y 3ml de levadura, tubo Nº4 3ml de agua y 3ml de levadura, luego se etiqueto 4 pipetas graduadas con Glucosa, Sacarosa, Almidón y Agua y se agregó de manera contra gradiente succionando desde la parte superior de la pipeta hasta llegar a respectivamente 4ml en cada uno de las pipetas  tapando con parafilm la parte superior e inferior y colocando en tubos de ensayo con agua tibia para luego cronometrando 15 minutos

Determinación indirecta de la producción de CO2 por fermentación alcohólica: Se rotulo 4 tubos de ensayo, en los cuales se coloco en 2 tubos azul de bromotimol midiendo su pH inicial y 2 tubos de ensayo con distintas soluciones, separando estos 4 tubos en 2 conjuntos conjunto Nº1 tubo Nº1 se coloco 2 ml de azul de bromotimol midiendo su pH inicial y tubo Nº2 se coloco 2 ml de sacarosa y 2 ml de levadura conectándolos con la manguera de anaerobiosis la cual no toco el fondo del tubo Nº1 tapando su parte superior con parafilm colocándolo en el baño termorregulador por 30 minutos sacándolo para medir su pH final, conjunto Nº2  tubo Nº3 se agregó 2 ml de azul de bromotimol midiendo su pH inicial y tubo Nº4 se coloco 2 ml de glucosa y 2 ml de levadura y coloco la manguera de anaerobiosis entre los tubos y tapo con parafilm colocándolo en el baño termorregulador por 30 minutos sacándolo para medir el pH final

Observe en el microscopio la levadura: Se coloco 2 gotas de levadura en el portaobjeto y coloco en el microscopio en 10X enfocando con el tornillo macrometrico, luego se observo en 40X  ajustando la imagen con el tornillo micrométrico

Resultados

Fermentación alcohólica en levadura

• Tubo Nº1 se observo la aparición de burbujas que es una reacción de fermentación constante entre el minuto 0 al minuto 15 llegando a 11,3 cm de reacción donde las mayores diferencias  se presento entre los minutos 6 al 10 y el 10 al 15 donde las  diferencias fueron 3,7 cm y 3,4 cm respectivamente
• Tubo Nº2 se observo la aparición de burbujas que es una reacción de fermentación constante entre el minuto 0 al minuto 15 llegando a 6 cm de reacción
• Tubo Nº3 pasado los 15 minutos no se observo reacción
• Tubo Nº4 pasado los 15 minutos no se observo reacción

Determinación indirecta de la producción de CO2 por fermentación alcohólica

• Conjunto de tubos Nº1 solución sacarosa-levadura en el azul de bromotimol pH inicial 8 se observo el cambio de color de azul a amarillo y al medir su pH final fue de 4
• Conjunto de tubos Nº2 solución glucosa-levadura en el azul bromotimol pH inicial 8  se observo el cambio de color de azul a verde y al medir su pH final fue de 5

Observar al microscopio la levadura:

• Se logro observar dentro de la muestra células con pequeñas diferencias de tamaño y con forma circular en agrupaciones de dos  pero también dispersas de manera unitarias

Discusión

Fermentación alcohólica en levadura

En el experimento se debía observar la reacción rápida de glucosa y sacarosa, no así la de almidón y agua, el almidón al ser un oligosacárido no reaccionaria con rapidez o facilidad esto debido a su compleja estructura y fueres uniones las cuales no pueden romperse con facilidad, el agua al no ser un hidrato de carbono no habría fermentación, en la glucosa se observa una reacción rápida esto debido al ser un monosacárido su descomposición será rápida y constante pero no tan prolongada, la sacarosa al ser un disacárido la reacción también será rápida al producirse un rompimiento o descomposición  rápida pero esta debería ser un poco mas prolongada que la anterior al ser formado por dos glucosas los experimentos fueron satisfactorios ya que en se observo en la glucosa y sacarosa reacciones rápidas y prolongadas durante los 15 minutos glucosa variando con pequeños saltos entre reacciones no así sacarosa que fue mas pareja su reacción. (3)

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