FRACCIONAMIENTO DE TEJIDO Y CARACTERIZACION DE CARBOHIDRATOS

UNIDAD ACADEMICA: Medicina Veterinaria y Zootecnia

CURSO: Bioquímica I

PRACTICA Nº 3: FRACCIONAMIENTO DE TEJIDO Y CARACTERIZACION DE CARBOHIDRATOS

1. OBJETIVOS

• Emplear los métodos de solubilidades diferenciales y de centrifugación para el fraccionamiento de un

tejido animal en sus principales constituyentes.

• Comprobar la presencia de carbohidratos en el tejido de origen animal, utilizando para ello reacciones

características de cada uno de los componentes anteriores.

2. CONSULTA PREVIA

¿Cuál es el funcionamiento de la centrifugación? Realice una breve explicación de sus principios.

Consulte los diferentes métodos de ruptura de células.

¿Por qué se recomienda mantener los tejidos que se fraccionan a bajas temperaturas?

Escriba y explique cada una de las reacciones de las diferentes pruebas realizadas en esta práctica.

3. FUNDAMENTO TEORICO

El objetivo del fraccionamiento celular es separar la célula en sus principales componentes y así permitir el

estudio de un componente sin las interferencias de otras partes. En términos generales primero se debe elegir

un tejido adecuado según el interés teniendo como criterio la facilidad para su fraccionamiento, la disponibilidad

del constituyente de interés y homogeneidad del tipo de célula. Para la presente practica se obtendrán las

fracciones de los diferentes constituyentes de un tejido de origen animal en y términos de sus biomoléculas,

utilizando para ello las técnicas de centrifugación y propiedades de solubilidad diferencial.

3.1 Acción del ácido tricloroacético a baja temperatura sobre carbohidratos: A baja temperatura los

monosacáridos son estables en medio acido, mientras al ser tratados en caliente sufren deshidratación

produciéndose los furfurales. En general se puede decir que los carbohidratos son solubles en solución de

ácido tricloroacetico (ATA) al 10% a temperaturas inferiores a 4°C y no sufren cambios químicos en estas

condiciones.

3.2 Carbohidratos

Los carbohidratos o sacáridos, están compuestos principalmente por carbono, oxigeno e hidrogeno. Este grupo

de componentes incluyen azucares simples (monosacáridos) así como sus polímeros (polisacáridos). Todos los

monosacáridos y los residuos de los polisacáridos contienen varios grupos hidroxilo y son por tanto

polialcoholes. La mayoría de los monosacáridos comunes contienen ya sea cinco o seis átomos de carbono.

Otro grupo presente en los monosacáridos es el grupo carbonilo, ya sea en la forma de cetosas o aldosas.

Es precisamente los grupos funcionales constituyentes de los sacáridos lo que me permite identificar si hay

presencia de carbohidratos y el tipo de carbohidrato mediantes ensayos basados en diferentes reacciones

características. En la presente práctica se emplearán las siguientes pruebas de identificación para sacáridos:

Ensayo de Molish, ensayo Benedict, ensayo de Lugol y ensayo de Lugol con HCI.UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS CÓDIGO: FO-DOC-112

VERSIÓN: 01 PÁGINA: 2 de 4

PROCESO GESTION DE APOYO A LA ACADEMIA FECHA: 02/09/2016

FORMATO GUÍA PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO VIGENCIA: 2016

LABORATORIO DE QUIMICA

ELABORADO POR: Daniel Aguilera

MODIFICADO POR: Jorge Alberto

Jiménez M.

CARGO: Docente FECHA: 11 de septiembre de 2017

4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Equipos y/o montajes Materiales Reactivos

Centrifuga Vidrio de reloj (1) Ácido tricloroacético (ATA)

10%

Balanzas de precisión Gradilla (1) Arena lavada

Baño maría Tubos de ensayo (10) Glucosa 5%

Pinza para tubo de ensayo (1) Almidón 5%

pipetas pasteur (2) Reactivo de Molish

tubos centrifugadas (2) [HSO4]

Mortero Reactivo Lugol

Papel aluminio HCl 2.0 N

Bandas de caucho Benedict

Cuchillo Hígado de pollo u otro tejido

(Traer estudiantes)

5. PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA

Cada grupo hará el fraccionamiento químico sobre tejido según el siguiente protocolo:

3 g de tejido 0°C

Cortar en trozos pequeños. Adicionar alrededor de 0,7 g de arena lavada.

Macerar en el mortero con ATA 10% (1,5 mL/g tejido). Centrifugar 2500 rpm

5 min.

SOBRENADANTE

Carbohidratos

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