Microbiologia

Introducción

Los medios de cultivo en microbiología

Por su minúsculo tamaño, los microorganismos no pueden estudiarse como individuos, sino que es necesario manejarlos como poblaciones. Para ello es necesario cultivarlos, es decir, favorecer su multiplicación in Vitro, en ambientes especiales que proporcionen las condiciones semejantes a las de sus hábitats naturales. En estos ambientes se debe eliminar a todos aquello microorganismos que interfieren en el estudio del microorganismo de interés, al que además de proporcionar los nutrientes necesarios para su crecimiento y multiplicación.

En muchos aspectos, el pequeño tamaño de los microorganismos los hace sujetos ideales para la experimentación. Se pueden cultivar millones de organismos en un solo mililitro de medio para su estudio. La rápida multiplicación de estas diminutas criaturas constituye también una ventaja experimental, ya que se puede trabajar con muchas generaciones en un solo día. Para llevar a cabo experimentos con microorganismos es usualmente necesario cultivarlos en el laboratorio.

Materiales:

Medio de cultivo sólido para preparación en cajas

Medio de cultivo sólido para preparación en tubos inclinados

Medio de cultivo semisólido para preparación en tubos

Medio de cultivo líquido para preparación en tubos

Agua destilada o purificada

Erlenmeyer de 250 ml

Probetas de b100 ml

Pipetas serológicas (1, 5, 10 ml)

Cajas petri estériles

Tubos de 15 ml

Guantes de asbesto

Mascarilla

Equipos

Autoclave

Balanza

Mecheros

Cocineta

Procedimiento:

Paso 1

1. Leer las instrucciones del fabricante

2. Realizar los cálculos respectivos tomando en cuenta el volumen final a prepararse

3. Escoger el material necesario para la preparación

Paso2:

1. En un recipiente adecuado pesar los gramos necesarios en la balanza, teniendo la precaución de tararla antes de pesar el medio de cultivo.

2. Colocar el volumen final de agua destilada o purificada utilizando los materiales necesarios para obtener este volumen lo más exacto posible.

3. Tratar de disolver el medio lo más posible en frio y luego llevarlo al calor siguiendo las instrucciones especificadas en la etiqueta.

Paso 3

1. Dispensar los medios en los recipientes finales dependiendo del caso, si su recipiente final es en tubo colocar las cantidades adecuadas, si es para un medio sólido inclinado 5 ml, medio líquido 3 ml y semisólido 3ml. Llevar a autoclavar con las tapas flojas.

2. Si el recipiente final es en cajas petri llevar en el recipiente de preparación el medio al autoclave

3. Tener la precaución de rotular todos los recipientes

Paso 4

1. Preparar el autoclave tomando en cuenta lo siguiente:

- Chequear limpieza

- Volumen de agua hasta el nivel

2. Colocar en la bandeja el material a esterilizar tomando en cuenta el volumen de carga del autoclave.

3. Colocar los parámetros de presión 15 psi, temperatura 121°C y 15 minutos, generalmente al colocar el tiempo el autoclave está ya programado para llegar a los parámetros indicados.

4. Para sacar el material esterilizado se DEBE esperar que la presión esté en cero y la temperatura haya bajado por lo menos hasta 60-80 °C. Además utilizar guantes adecuados para evitar accidentes, si el recipiente contenedor es un tubo de ensayo proceder a cerrarlo para evitar contaminaciones.

Paso 5

1. Dependiendo de la consistencia del medio, inclinarlo o dejarlo en posición vertical en una tubera si es un medio líquido o semisólido.

2. En el caso de los medios que deben ser dispensados en cajas colocar

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