Método Enzima unida Ensayo de inmunoabsorción
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CÓDIGO DAI # 16
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AccuDiag ™
TSH
kit ELISA
Cat # 3122-16
96 Pruebas
Prueba TSH ELISA
Método Enzima unida Ensayo de inmunoabsorción
Principio Complejo Sandwich
Rango de detección 0-20 UI / ml
Muestra Suero de 50 L
Especificidad 100%
Sensibilidad 0,20 UI / ml
Tiempo Total ~ 80 min
Duracion12-14 meses desde el fecha de fabricación
USO PREVISTO
Para la determinación cuantitativa de la hormona estimulante de la tiroides (TSH)
Concentración en suero humano.
RESUMEN Y EXPLICACIÓN
La determinación de los niveles séricos o plasmáticos de la hormona estimulante del tiroides
(TSH) se reconoce como un método sensible en el diagnóstico de
Hipotiroidismo secundario. La TSH es secretada por el lóbulo anterior de la pituitaria
E induce la producción y liberación de tiroxina y triyodotironina
De la glándula tiroides. Es una glicoproteína con un peso molecular de
Aproximadamente 28.000 daltons, consistente en dos subunidades químicamente diferentes,
Alfa y beta. Aunque la concentración de TSH en la sangre es extremadamente
Baja, es esencial para el mantenimiento de la función tiroidea normal. La liberación
De TSH es regulada por una hormona liberadora de TSH (TRH) producida por la
Hipotálamo Los niveles de TSH y TRH están inversamente relacionados con el nivel de
Hormona tiroidea Cuando hay un alto nivel de hormona tiroidea en la sangre,
Menos TRH es liberado por el hipotálamo, por lo que menos TSH es secretada por el
pituitaria. La acción opuesta ocurrirá cuando hay disminución del tiroides
Hormona en la sangre. Este proceso se conoce como una retroalimentación negativa
Y es responsable de mantener los niveles sanguíneos adecuados de estos
Hormonas TSH y las glicoproteínas pituitarias: hormona luteinizante (LH),
Hormona folículo-estimulante (FSH) y gonadotropina coriónica humana (hCG),
Tienen cadenas alfa idénticas. La cadena beta es distinta pero contiene
Secuencias de aminoácidos idénticas, que pueden causar reactividad cruzada considerable
Con algunos antisueros policlonales de TSH. El uso de un anticuerpo monoclonal en este
La prueba de EIA de TSH elimina esta interferencia, lo que podría
Los valores de la TSH en mujeres menopáusicas o embarazadas - una población
La evaluación del estado tiroideo es clínicamente significativa
PRINCIPIO DE PRUEBA
La prueba de TSH EIA se basa en el principio de una fase sólida ligada a enzima
Inmunosorbente. El sistema de ensayo utiliza un anticuerpo monoclonal único
Dirigida contra un determinante antigénico distinto en la molécula de TSH intacta.
El anticuerpo monoclonal anti-TSH de ratón se usa para la fase sólida (pocillos de microtitulación)
Inmovilización y un anticuerpo anti-TSH de cabra está en el anticuerpo-enzima
(Peroxidasa de rábano picante). La muestra de ensayo se deja reaccionar
Simultáneamente con los dos anticuerpos, dando lugar a que las moléculas de TSH sean
Intercalados entre la fase sólida y los anticuerpos ligados a enzimas. Después de 60
Minutos de incubación a temperatura ambiente, los pocillos se lavan con agua para
Eliminar los anticuerpos marcados no unidos. Se añade una solución de TMB y se incuba
Durante 20 minutos, resultando en el desarrollo de un color azul. El color
El desarrollo se detiene con la adición de HCl 2N y se cambia el color
A amarillo y se midió espectrofotométricamente a 450 nm. La concentración
De TSH es directamente proporcional a la intensidad de color de la muestra de ensayo.
RECOPILACIÓN Y PREPARACIÓN DE MUESTRAS
El suero debe prepararse a partir de una muestra de sangre entera obtenida
Técnicas médicas. Este kit es para uso con muestras de suero sin aditivos
solamente.
MATERIALES Y COMPONENTES
Materiales provistos con los kits de prueba
1. Pocillos de microtitulación recubiertos con anticuerpos. 96 pozos por bolsa.
2. Conjunto de Estándares de Referencia: 0, 0,5, 2,0, 5,0, 10,20 y 40 ⎧ UI / ml, en forma líquida
Forma (listo para el uso) o forma liofilizada
3. Reactivo Conjugado Enzimático, 12 ml.
4. Substrato TMB, 12 ml.
5. Solución de parada, 12 ml.
6. Concentrado de Tampón de Lavado (50X), 15 ml.
7. Juego de control (opcional) X1
Materiales requeridos pero no suministrados
1. Pipetas de precisión: 40 ⎧ l ~ 200 ⎧ l, 200-1000μl.
2. Puntas de pipeta desechables.
3. Agua destilada.
4. Mezclador Vortex o equivalente.
5. Papel absorbente o toalla de papel.
6. Papel de gráfico.
7. Lector de placas de microtitulación
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
1. Todos los reactivos deben estar a temperatura ambiente (18-22 ° C) antes de su uso.
2. Si las normas de referencia son liofilizadas, reconstituya cada estándar con 0,5
Ml de agua destilada. Deje reposar el material reconstituido durante al menos 20
minutos. Los estándares reconstituidos deben ser sellados y almacenados a 2-8 ° C
3. Diluir 1 volumen de Tampón de Lavado (50x) con 49 volúmenes de agua destilada.
Por ejemplo, diluir 15 ml de tampón de lavado (50x) en agua destilada para
Preparar 750 ml de tampón de lavado (1x). Mezclar bien antes de usar.
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