PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN PATRÓN DE BIOMASA

PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN PATRÓN   DE BIOMASA

En un matraz Elermeyer de 500 mL se agregó 250 mL de agua destilada, se agito por 5 minutos y se  agregó 0.3 g de Peptona caseína y disolvimos, nuevamente agregamos 2.0 g de levadura Saccharomyces cerevisiae (grado comercial) y se obtuvo  Solución Madre o Patrón con concentración de 8.0 g/L.  Se agito suavemente para homogeneizar y se dejó reposar por 10-15 minutos. Posteriormente se realizó en tubos de ensayo 5 diluciones con un rango de concentración de 1.0 mg/mL a  5.0 mg/mL a partir de la Sol. Madre, con un volumen total de dilución de 5.0 ml (utiliza la formula V1C1= V2C2)

METODO GRAVIMETRICO

Se obtuvo el peso constante de cápsulas de porcelana (P0). (identificadas).  De cada dilución preparada a partir de la Sol. Madre, se vacío 3.0 mL a 2 cápsulas de porcelana y se realizó duplicado por la cantidad de cápsulas en existencia. Cuando se obtuvo todas las muestras de dilución, se procedió a meterlas en horno a  105 ± 5 ºC hasta que se logro la evaporación completamente. Se secaron las cápsulas del horno y dejaron en el desecador por 20 min. Pesamos las cápsulas en la balanza analítica, para obtener el P1. Y se obtuvo el peso constante y aseguraro que ya no hay más humedad que retirar, continuar con el siguiente paso.

1. Ingresarlas al horno a 105 ± 5 ºC por 1 hr y después dejarlas en el desecador por 20 min, para después pesarlas y obtener el peso Pcte1.
2. Si no se mantienen constante estos pesos entre la variabilidad de 0.0005g, volver al paso 6, hasta lograr obtenerlo.
3. Gráfica la relación de la concentración teórica & el peso promedio de la biomasa seca.
4. Obtener la Ecuación y la r2 del gráfico.  

METODO GRAVIMETRICO

1. Obtener el peso constante de las cápsulas de porcelana (P0). (identificadas)
2. De cada dilución preparada a partir de la Sol. Madre, vaciar (agitar antes) 3.0 ml a 2 cápsulas de porcelana (se realizará duplicado por la cantidad de cápsulas en existencia). No olvides usar las pinzas para la manipulación.
3. Ya que se tengan todas las cápsulas con las muestras de dilución, meterlas al horno a          105 ± 5 ºC hasta que se logre la evaporación completamente.
4. Sacar las cápsulas del horno y dejarlas en el desecador por 20 min.
5. Pesar las cápsulas en la balanza analítica, para obtener el P1. Y para obtener el peso constante y asegurar que ya no hay más humedad que retirar, continuar con el siguiente paso.
6. Ingresarlas al horno a 105 ± 5 ºC por 1 hr y después dejarlas en el desecador por 20 min, para después pesarlas y obtener el peso Pcte1.
7. Si no se mantienen constante estos pesos entre la variabilidad de 0.0005g, volver al paso 6, hasta lograr obtenerlo.
8. Gráfica la relación de la concentración teórica & el peso promedio de la biomasa seca.
9. Obtener la Ecuación y la r2 del gráfico.  

METODO ESPECTROFOTOMETRICO

1. En una celda vaciar agua destilada y calibrar el espectrofotómetro a una longitud de onda de 600 nm, con una absorbancia de cero y una transmitancia del 100 por ciento.
2. De cada dilución preparada a partir de la Sol. Madre, vaciar 2.5 ml (previamente agitada) a una celda para espectro y medir la densidad óptica de la biomasa a 600 nm.
3. Construir una gráfica de Conc.teórica & Prom.abs.
4. Obtener la Ecuación y la r2 del gráfico.  

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