PROTOCOLO DE VALIDACIÓN

PROTOCOLO DE VALIDACIÓN

1.0        OBJETIVO

1. Verificar la confiabilidad de la técnica de análisis por espectrofotometría para detectar  trazas  de metoclopramida, adrenalina y complejo B Inyectable en las muestras de lavado de dicho producto, en equipos y áreas  involucradas en el proceso de fabricación del mismo.

1. RESPONSABLES

1. Es responsabilidad del coordinador de validaciones junto con los analistas de control de calidad, la realización y desarrollo de este protocolo.
2. Es responsabilidad del jefe de control de calidad verificar el cumplimiento de este protocolo.

1. CRITERIOS DE ACEPTACIÓN

1. Especificidad: La absorbancia promedio de los excipientes obtenida a la longitud de onda de máxima absorbancia utilizada para calcular el límite de detección del principio activo, no debe ser mayor que el resultado de dicho límite.
2. Linealidad: Coeficiente de correlación mayor o igual a 0.95 (95 %).
3. Limite de detección y cuantificación: Cantidad mínima que detecta y cuantifica la técnica de cada principio activo.
4. Porcentaje de recuperación mayor o igual al 90%

1. EQUIPOS A UTILIZAR

1. Espectrofotómetro Agilent código ESP 44
2. Ultrasonido ULT 12, ULT 35.
3. Balanza Electrónica Sartorius  BAL 07, SAR 03.

1. DESCRIPCIÓN DEL MÉTODO PARA METOCLOPRAMIDA

1. Linealidad

1. Realizar una curva de calibración, Absorbancia VS  Concentración como se detalla a continuación, realizando  cada concentración por triplicado:

1. Pesar exactamente cerca de 20.0 mg de metoclopramida (Estándar de trabajo) realizando la corrección de pureza y humedad, llevar a balón volumétrico de 100.0 ml, adicionar cerca de 20.0 ml de agua, agitar en ultrasonido 5 minutos, luego completar a volumen con  agua. Tomar una alícuota de 5.0 ml, llevar a balón volumétrico de 100.0 ml y completar volumen con agua para obtener una concentración de 10.0 ppm.

1. Tomar 5.0 ml de la solución de 10.0ppm y llevar a balón volumétrico de 100.0 ml, completar a volumen con  agua para obtener una concentración de 0.5 ppm.

1. Tomar 5.0 ml de la solución de 10.0 ppm y llevar a balón volumétrico de 50.0 ml, completar a volumen con  agua para obtener una concentración de 1.0 ppm.

1. Tomar 3.0 ml de la solución de 10.0 ppm y llevar a balón volumétrico de 20.0 ml, completar a volumen con  agua para obtener una concentración de 1.5 ppm.

1. Tomar 10.0 ml de la solución de 10.0 ppm y llevar a balón volumétrico de 50.0 ml, completar a volumen con  agua para obtener una concentración de 2.0 ppm.

1. Leer en el espectrofotómetro cada una de las  muestras preparadas en forma ascendente de acuerdo a su concentración, realizando un barrido entre 200 nm – 400 nm, utilizando agua como blanco. Determinar la (s) longitud (es) de onda  de máxima absorbancia del principio activo y realizar una curva de calibración.

1. Especificidad

1. Tomar exactamente 20.0 ml de muestra placebo, llevar a balón volumétrico de 100.0 ml,  y completar a volumen con agua. Tomar una alícuota de 5.0 ml, llevar a balón volumétrico de 100.0 ml y completar volumen con el mismo solvente (realizar diez  muestras de placebo).

                Tabla N° 1 excipientes utilizados en la preparación de metoclopramida.

1. Leer las diez  muestras placebo preparadas en el ítem 5.2.1 en el espectrofotómetro, realizando un   barrido entre 200 nm – 400 nm, utilizando agua como blanco.

1. Porcentaje de recuperación

1. Pesar exactamente 20.0 mg de metoclopramida (Estándar de trabajo) realizando la corrección de pureza y humedad, llevar a balón volumétrico de 200.0 ml, llevar al ultrasonido por 5 minutos y completar volumen con agua destilada para obtener una concentración de 100 ppm.
2. Tomar 0.1ml de la solución de 100ppm, distribuir dicho volumen en un espacio de 25cm2, luego frotar la superficie con papel de filtro de fibra de vidrio (2.5cm *2.5cm) en una sola dirección, depositar el papel de filtro en un tubo de ensayo y adicional 10.0ml de agua destilada para obtener una concentración de 1ppm, agitar y filtrar utilizando una membrana de 0.45 µm. leer en el espectrofotómetro a la longitud de onda de máxima absorbancia del activo, utilizando agua destilada como blanco.

1. MÉTODOS ESTADÍSTICOS

1. Suma de cuadrados: Determinar la ecuación de la recta.
2. Gráficos, curvas de Calibración.

ANÁLISIS DE RESULTADOS

1. Linealidad

                          Tabla N° 2 Resultados de la linealidad

1. Especificidad placebo: La técnica analítica demostró que la absorbancia promedio de los excipientes obtenida a la longitud de onda de máxima absorbancia <265nm> utilizada para calcular el límite de detección del principio activo, no es mayor que dicho límite.

Tabla N° 3 Resultados de la especificidad

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