Pruebas bioquimicas. Las bacterias son capaces de realizar una serie de transformaciones químicas

INTRODUCCION

Las bacterias son capaces de realizar una serie de transformaciones químicas mediante reacciones enzimáticas que se traducen en síntesis de nuevos productos, transporte, movimiento y duplicación celular. Así mismo, las bacterias pueden obtener del medio ambiente los sustratos que serán utilizados para su crecimiento. De este modo, nutrición bacteriana es el proceso mediante el cual las bacterias captan nutrientes a partir del medio que las rodea. Dichos nutrientes deben estar en solución, aún aquellos que son gaseosos. Si bien los constituyentes generales de las bacterias son muy similares, la capacidad de captación de nutrientes y de síntesis de nuevos productos es muy variable entre distintas especies bacterianas. Sin embargo, todas las bacterias necesitan nutrición para desarrollar ciertos elementos básicos como ser C, P, S, N y agua. (Curtis, 2008)

Para las pruebas bioquímicas, el conocimiento de los requerimientos metabólicos y de las condiciones de crecimiento de las bacterias es útil para predecir la forma correcta de obtención, remisión y conservación de muestras; para seleccionar los medios de cultivo que se utilizarán en el diagnóstico y para estimar el tiempo necesario en el que la bacteria alcance un número suficiente como para que su desarrollo se haga visible. (Rodríguez et al, 2003)

Así mismo, las pruebas bioquímicas han sido ampliamente utilizadas para diferenciar bacterias. Estas pruebas se fundamentan en demostrar si el microorganismo es capaz de fermentar azúcares, la presencia de enzimas, la degradación de compuestos, la producción de compuestos coloreados, entre otros. Aun bacterias fuertemente relacionadas pueden separarse en dos especies diferentes con base a pruebas bioquímicas. Por ejemplo, las bacterias entéricas Gram negativas, forman un grupo muy grande y heterogéneo cuyo hábitat natural es el tracto gastrointestinal de humanos y otros animales. (MacFaddin, 2003)

De este modo, en la práctica se espera lograr identificar los tipos de metabolismo bacteriano utilizando las pruebas bioquímicas, observando la capacidad de utilización de diferentes sustratos y condiciones de oxígeno por las bacterias problemas, mediante el uso de diversos tipos de claves diagnósticas.

MATERIALES Y METODOS

En la práctica de laboratorio se hizo uso de medios de cultivo tanto sólidos, como líquidos, cada uno de ellos contenía 7 mL del medio:

Caldo lactosa[pic 1]

Caldo sacarosa

Medio de MR-VP

Caldo Urea

Medio SIM (Sulfuro, Indol, Movilidad)        

Medio TSI (triple azúcar hierro)[pic 2]

Medio LIA

Medio de citrato de Simmons

[pic 3][pic 4]

En el caso de los medios de cultivo sólidos se sembró por punción hasta el fondo, y de otra manera en el caso de los medios de cultivo líquidos, se sembró por estriado.

Tras ocho días, se evaluaron los resultados con pruebas bioquímicas complementarias, usando el manual de Bergey`s  de bacteriología.

RESULTADOS

Después de inocular las dos bacterias problemas en los ocho diferentes sustratos tanto líquidos como sólidos, contenidos en tubos de ensayo y además de incubar durante ocho días, se observaron los siguientes cambios físicos en los sustratos, en cuando a reacciones bioquímicas como tal, se obtuvieron los siguientes resultados descritos a continuación:

Tabla Bacteria problema # 1

Tabla Bacteria problema # 2

...