Reconocimiento de macromoléculas

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Informe de laboratorio

Reconocimiento de macromoléculas

Asignatura: BIO-001

Natalia Rivera

Javiera Rivera

Benjamín Sola

Johanna Zepeda

Tecnología Médica

Sección 3, Mesa 5

Profesor del práctico: Carlos Mellado

Profesor ayudante: Juan Tirado

Fecha de realización: martes 09 de abril de 2019

Fecha de entrega: martes 30 de abril de 2019

1. Introducción.

Objetivo general:

Reconocer macromoléculas biológicas a través de reactivos químicos.

Reconocer la presencia de macromoléculas biológicas de distintas sustancias.

Objetivos específicos:

Analizar la importancia de los reactivos al momento de reconocer macromoléculas biológicas.

Aprender a utilizar reactivos químicos.

Establecer el reactivo más adecuado para cada sustancia de estudio.

1. Procedimiento experimental

1. Reconocimiento de macromoléculas

2.1.1 Hidratos de carbono: Se roturaron tubos de ensayo del 1 al 5 con diferentes muestras y reactivos. El quinto tubo se utilizó como tubo control.

Tubo 1: Se agregó con la pipeta graduada 1 ml de glucosa más tres gotas de Lugol.

Tubo 2: Se agregó 1 ml lactosa, más tres gotas de Lugol.

Tubo 3: Se agregó 1ml de glucógeno más tres gotas de Lugol.

Tubo 4: Se agregó 1 ml de almidón más tres gotas de Lugol.

Tubo 5: Se agregó 1ml de agua destilada más tres gotas de Lugol. Usando éste como tubo control para análisis de resultados.

Se dejaron que estos reactivos interactúan y decantaron para ver el resultado de las distintas mezclas. Se anotaron las observaciones.

Se dispusieron de 5 tubos de ensayos, los cuales se enumeraron del 6 al 10, en donde el quinto tubo se utilizó como tubo control.

Tubo 6: Con una pipeta graduada, se tomó una muestra de 1 ml de glucosa y se añadió 1 ml de reactivo de Benedict.

Tubo 7: Se pipeteó 1 ml de lactosa y se agregó a la muestra 1 ml de reactivo de Benedict.

Tubo 8: Se tomó una muestra de 1ml de glucógeno y se agregaron 1 ml de reactivo de Benedict a la muestra.

Tubo 9: Se tomó una muestra de 1 ml de almidón y se añadió 1ml de reactivo de Benedict.

Tubo 10: Se pipeteó 1 ml de agua destilada y se añadió 1ml de reactivo de Benedict.

Todos los tubos de ensayo se sometieron a 90°C en un baño termorregulado por 5 minutos.

Se retiraron y se anotaron los cambios.

2.1.2 Proteínas: Para este paso, se roturaron 3 tubos de ensayos del 11 al número 13. Utilizando el tubo 13 como tubo control.

 Tubo 11:  Se agregó 1 ml de albúmina con una pipeta graduada, más un 1 ml de hidróxido de sodio (NaOH) y 3 gota de sulfato cúprico 1%. El tubo se agitó con cuidado y se anotaron los resultados.

 Tubo 12: Se agregó 1ml de alanina, más 1ml de hidróxido de sodio (NaOH) y 3 gota de sulfato cúprico 1%. Se agitó el tubo y se anotaron las observaciones.

Tubo 13: En un tubo de ensayo de tomó una muestra de 1ml de agua destilada y se agregó 1ml de hidróxido de sodio (NaOH), más tres gotas de sulfato cúprico 1%.

Se observaron los resultados y fueron anotados sus cambios.

2.1.3 Lípidos o grasas: Se dispusieron de dos tubos de ensayo, enumerados 14 y 15 respectivamente. El tubo 15 se utilizó como tubo control.

Tubo 14: Se realizó una disolución de 3 ml de agua destilada, con una pequeña cantidad de Sudán III (la punta de una espátula), se agitó y se añadió 1 ml de aceite. Se agitó nuevamente y se anotaron las observaciones.

Tubo 15: Se tomó una muestra de 4 ml de agua destilada con una pipeta y se añadió una pequeña cantidad de Sudán III (la punta de una espátula). Se agitó la muestra hasta que la muestra fue homogénea.

1. Reconocimiento de macromoléculas en diferentes muestras

2.2.1 Serie 1: Se dispusieron de 4 tubos de ensayo, en donde todas tenían 2 ml de orina con cuatro reactivos distintos, todos utilizados en la primera parte.

Tubo 1.1: Con una pipeta graduada se tomó una muestra de 2 ml de orina y se añadieron 3 gotas de Lugol. Se agitó y se anotaron las observaciones.

Tubo 1.2: Con la pipeta graduada de tomaron 2 ml de orina y se añadió una pequeña cantidad de Sudán III (la punta de una espátula). Se agitó el tubo y se anotaron las observaciones.

Tubo 1.3: Se tomó una muestra de 2 ml de orina y una de 1ml de reactivo de Benedict. Se mezclaron en el tubo. Se llevó al baño termorregulador por 5 minutos, se retiró y se observaron los cambios.

Tubo 1.4: Se pipetearon 2 ml de orina, 1 ml de hidróxido de sodio (NaOH) y se agregó 1 gota de sulfato cúprico 1%. Se agitó la muestra y se anotaron sus cambios.

2.2.2 Serie 2: Se utilizaron cuatro tubos de ensayo, cada una con 2 ml de leche descremada y un reactivo diferente en cada tubo.

Tubo 2.1: Se tomó una muestra de 2 ml de leche descremada con la ayuda de una pipeta graduada y se añadieron 3 gotas de Lugol. Se agitó la muestra y se anotaron los cambios.

Tubo 2.2: Se midieron 2 ml de leche descremada con una pipeta graduada y se agregó una pequeña cantidad de Sudán III (la punta de la espátula). Se agitó la muestra y se observaron los cambios ocurridos.

Tubo 2.3: Se volvió a tomar una muestra de 2ml de leche descremada, pero se agregó 1ml de reactivo de Benedict. La muestra se calentó en el baño termorregulado a 90°C por al menos 5 minutos. Se retiró y se anotaron los cambios observados.

Tubo 2.4: Se tomó una muestra de 2ml de leche descremada con una pipeta graduada y se agregó 1 ml de hidróxido de sodio (NaOH) y se agregaron 5 gotas de sulfato cúprico 1%. Se agitó el contenido y se observaron los cambios.

2.2.3 Serie 3: Para este procedimiento se ocuparon cuatro tubos de ensayo con una muestra denominada “solución problema I”, y cada una de las muestras se utilizaron diferentes reactivos.

Tubo 3.1: Se pipetearon 2 ml de solución problema I y se añadieron 3 gotas de Lugol. Se agitó y se anotaron los cambios que fueron observados.

Tubo 3.2: Se tomó una muestra de 2 ml de solución problema I y se añadió una pequeña cantidad de Sudán III (la punta de una espátula). Se agitó y se anotaron los cambios.

Tubo 3.3: Se agregaron 2 ml de solución problema I y se añadió 1ml de reactivo de Benedict. Se lleva al baño termorregulado a 90°C por 5 minutos. Se retiró y se anotaron los cambios.

Tubo 3.4: Se volvieron a medir 2 ml con la pipeta graduada y a la muestra se le agregó 1ml de hidróxido de sodio (NaOH) y una gota de sulfato cúprico 1%. Se agita la muestra y se anotan los cambios.

2.2.4 Serie 4: Para esta serie también se dispusieron de 4 tubos de ensayos, en los cuales contenían “solución problema II”, pero cada tubo con un reactivo diferente.

Tubo 4.1: Se tomó una muestra de 2ml de solución problema II y se agregaron 3 gotas de Lugol. Se agitó ya se observan los cambios.

Tubo 4.2: En un tubo de ensayo se añadieron 2 ml de solución problema II y se agregó una pequeña cantidad de Sudán III (la punta de una espátula). Se agita el tubo y se anotan las observaciones.

Tubo 4.3: En el penúltimo tubo de ensayo, se agrega 2 ml de solución problema II, más 1 ml de reactivo de Benedict. Se lleva al baño termorregulador por 5 minutos. Se retira la muestra y se anotan los cambios ocurridos.

Tubo 4.4: En un tubo se mezclan 2 ml de solución problema II, con hidróxido de sodio (NaOH) y una gota de sulfato cúprico 1%. Se agitó la muestra y se anotaron los cambios observados.

1. Resultados

3.1 Registro de resultados de reconocimiento de macromoléculas

• Especificación de los contenidos de los tubos, reacciones y resultados de la unión de las macromoléculas con un reactivo en específico.

3.2 Registro de resultados de reconocimiento de macromoléculas en diferentes muestras

• Especificación del contenido de tubos de ensayo, especificación de las reacciones de los reactivos con las muestras, con sus respectivas observaciones al respecto.

1. Discusión 

Discusión de proteínas (tubos: 11,12,13,3.1,3.2,3.3,3.4)

A través de los experimentos realizados en las dos experiencias de laboratorio se puede comprobar por los resultados positivos de las tablas que el NaOH (Hidróxido de sodio) junto el Sulfato cúprico (CuSO4) reaccionan a la presencia de proteínas debido a las desnaturalización de esta por el pH de los reactivos. En extremos de pH altos o bajo, desaparecen al menos algunas de las cargas de la proteína, lo que reduce en forma drástica las interacciones electrostáticas que normalmente estabilizarián la forma nativa (activa) de la proteína. esto da pie a desnaturalización, [1] y estos se puede probar con los tubos 11 y 3.4 que dieron la misma reacción a los reactivos previamente descritos y los resultados visto en las tablas anteriores, y de paso comprobó que el contenido en la serie 3 de la segunda experiencia  donde ocupamos la Solución Problema I  tiene como compuesto orgánico la proteína.

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