Tesis Genomica variantes geneticas

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FACULTAD DE FARMACIA

ESCUELA DE QUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE NEUROGENÉTICA

DETERMINACIÓN DE POLIMORFISMOS EN EL GEN DE OXITOCINA Y EL GEN DEL RECEPTOR DE OXITOCINA EN PACIENTES CON DIAGNÓSTICO DE ESQUIZOFRENIA REFRACTARIA EN TRATAMIENTO CON CLOZAPINA

Tesis para optar al Título de Químico Farmacéutico

PATRICIO NICOLÁS GONZÁLEZ NAVARRO

Director de Tesis: Dr. Pablo Moya Vera

2017

Agradecimientos

La realización de esta tesis ha sido posible gracias al financiamiento otorgado por el Proyecto ICM-MINECOM NC130011, Núcleo Milenio NuMIND, en el cual, el director de esta tesis, Dr. Pablo Moya, es Director Alterno.

Agradecimientos a Alexandra Elbakyan por crear Sci-Hub, la página de donde descargué casi un 80% de los papers que utilicé en esta tesis.

A todos ustedes, las personas que conocí en este largo camino, les quiero decir que me siento muy afortunado de que el azar nos haya juntado, que hayan sido ustedes las personas que ya estaban en la Universidad o en el laboratorio cuando llegué o que llegaron después que yo. Y agradecido de todo el amor y confianza compartidos en amistades, conversaciones y buenos y malos momentos.

Afortunado y agradecido de todas las personas que conocí en “MoyaLab” -que ya son casi como mi otra familia- partiendo por mi director de tesis, Pablo Moya, y en especial a Marisol, Isa, Cote, Fran y René.

Afortunado y agradecido de los amigos y compañeros que conocí en el transcurso de la carrera, en especial, a Yasmín, la mejor amiga que pude haber tenido. Y a Xavi, Óscar, Vicky, Nico, David, Niccole, Carlos, Fabo, Manu, Seba, Ale, Naty, Dani, Claudia, Carrasco.

Mención aparte merece CEFUV 2014, Cote, Chachi, Tita, Rositas, gracias por tantas risas, tonteras y el trabajo que hicimos juntos.

Afortunado y agradecido de mis amigos del Coro UV, Naty, Pablo, Renzo, Benja, Paula y Belu.

Y, por supuesto, afortunado y agradecido de mi familia, mis papás Luchy y Pato, y mis hermanas Vale y Bárbara, por todo.

Resumen

La esquizofrenia es un trastorno psiquiátrico grave e incapacitante, caracterizado por un conjunto de desórdenes mentales que incluyen alucinaciones, alteraciones en el afecto, en la conducta, juicio de las emociones y problemas cognitivos como atención y concentración. Uno de los principales tratamientos farmacológicos incluye a la clozapina. Sin embargo, existe un porcentaje de pacientes que no responden a ella. Estudios reportan que la presencia de polimorfismos de nucleótido simple podría condicionar la respuesta a tratamiento, y dentro de éstos estarían involucrados los genes de la oxitocina y su receptor. A la fecha, no existen estudios publicados en población chilena que den cuenta de la posible relación entre polimorfismos de oxitocina y su receptor con la etiología de esquizofrenia. La presente tesis evaluó la frecuencia de los polimorfismos de nucleótido único rs877172, rs274010, rs2740204 en el gen de oxitocina y rs2254298, rs53576, rs2228485 en el gen del receptor de oxitocina en un grupo de individuos con diagnóstico de esquizofrenia refractaria. Se compararon frecuencias entre pacientes respondedores y no respondedores a tratamiento con clozapina. Se encontraron asociaciones significativas en la distribución alélica del SNP rs53576, y en las distribuciones genotípicas de rs53576 y rs877172 en los pacientes resistentes. Para los otros polimorfismos no hay diferencias significativas entre los grupos. Estos resultados sugieren que la presencia de estos polimorfismos podría influir en la respuesta al tratamiento con clozapina.

Polymorphisms determination in oxytocin gene and oxytocin receptor gene in patients with refractory schizophrenia diagnosis in clozapine treatment.

Schizophrenia is a serious and incapacitating psychiatric disorder, characterized by a combination of mental disorders that included hallucinations, affection alterations, behavior changes, emotional judgment and cognitive process like attention and concentration. One of the main pharmacological treatments includes clozapine. However, exist a percentage of patients that does not respond to treatment. Evidence suggests the presence of Single Nucleotide Polymorphisms can modify the treatment outcome, and among these, the oxytocin and oxytocin receptor genes could be involved. Up to date, there are not published studies of the Chilean population that reports the possible relation between oxytocin and oxytocin receptor polymorphisms with the etiology of the schizophrenia. In this thesis, the frequency of different Single Nucleotides Polymorphisms was assessed, including the rs877172, rs2740210, rs2740204 in the oxytocin gene and the rs2254298, rs53576, rs2228485 in oxytocin receptor gene in a population of individuals diagnosed with refractory schizophrenia. Frequencies of Polymorphisms were compared between patients that respond or not to the treatment with clozapine. Significant associations were found in the allelic distribution of rs53576 SNP, and in the genotypic distribution of rs53576 and rs877172 of non-responder treatment patients. In the other polymorphisms are not significant difference among groups. These results suggest that the presence of these polymorphism could modify clozapine treatment outcome.

Índice

Introducción        1

1.        Esquizofrenia        1

2.        Oxitocina        4

3.        Rol de la OXT en esquizofrenia        4

4.        Justificación del estudio        6

Hipótesis        8

Objetivos        9

Objetivo general        9

Objetivos específicos        9

Pacientes y métodos        10

Pacientes        10

Extracción de ADN        10

Cuantificación del ADN        11

PCR (discriminación alélica)        11

Análisis estadístico        12

Resultados        14

Caracterización de pacientes        14

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