Toxicologia

Práctica 3 Identificación de alcaloides

OBJETIVO:

Identificación de alcaloides en un extracto de cannabis activa mediante la coloración del mismo por el método de Wagner, mayers y cromatografía de capa fina.

FUNDAMENTO: Toxicidad de alcaloides y principio de cromatografía

Los alcaloides son sistemas heterocíclicos nitrogenados derivados de aminoácidos y triterpenos. En general se encuentran formando sales con el ácido acético, oxálico, láctico, málico, tartárico y cítrico.

Sus actividades biológicas son importantes por su mimetismo hormonal y su intervención en las reacciones principales del metabolismo celular.A pesar de ser  sustancias poco similares entre ellas desde el punto de vista estructural, poseen propiedades fisiológicas análogas.

Estos compuestos están ampliamente distribuidos en el reino vegetal (25% de las plantas contienen alcaloides) y en algunas especies su concentración puede alcanzar el 10% (Flores). Muchos alcaloides son la causa de intoxicaciones en humanos y animales. La forma más común es la intoxicación por infusiones con hierbas con fines medicinales, siendo esta una causa importante de muerte sobre todo en niños.

Su presencia en vegetales hace posible su incorporación accidental en alimentos, creando una vía fácil de intoxicación. 

Las pirrolizidinas son metabolitos secundarios de una gran variedad de plantas, que incluye especies que se encuentran en todo el mundo. Estas plantas son la causa de numerosos casos de envenenamiento de ganado, y ha causado grandes pérdidas económicas. También son causa de muerte en humanos, especialmente en países poco desarrollados, como consecuencia de la contaminación de cereales y semillas por lo que son de gran importancia en el campo de los alimentos. Se cree que la ingestión de hierbas y vegetales que contienen estos alcaloides, son causa de dolencias. 

PRINCIPIO DE LA CROMATOGRAFIA

La cromatografía es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Diferencias sutiles en el coeficiente de partición de los compuestos da como resultado una retención diferencial sobre la fase estacionaria y por tanto una separación efectiva en función de los tiempos de retención de cada componente de la mezcla.

La cromatografía puede cumplir dos funciones básicas que no se excluyen mutuamente:

Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más puros y que puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas síntesis).

Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica). En este caso, las cantidades de material empleadas son pequeñas.

MATERIAL:

Pipetas transfer

Vaso de precipitado de 450 ml

3 tubos de ensayo 13x150

Gradilla

Parrilla eléctrica

Pinzas para tubo de ensayo

Frasco con tapa

Pinzas de sujeción

Reactivos:

Ácido clorhídrico (HCl) 5%

Reactivo de Wagner

Reactivo de mayers

Hexano

Acetato de etilo

cloroformo

PROCEDIMIENTO:

1. Poner a hervir agua en el vaso de precipitado con la ayuda de la parrilla.

2. Colocar 2 gotas de extracto de cannabis activa a dos tubos de ensayo rotulados, uno con método de Wagner y otro mayers. Una vez agregadas las dos gotas, agregar 6 gotas de HCl 5 % a cada tubo.

3. Agitar y colocar en el agua previamente hervida durante 1 minuto. Una vez cumplido el tiempo agregar 2 gotas del

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