Determiacion De Creatinina

INTRODUCCION

La creatinina proviene de la creatina, una molécula muy importante para la producción de energía músculo esquelético y que cumple un rol fundamental en el metabolismo energético, como sustrato (en la forma de fosfocreatina) para la formación de ATP. El requerimiento diario es de 2g, de los cuales 1g se incorpora a la dieta a través del consumo de carnes y pescado, y el resto se sintetiza en el hígado, páncreas y riñones, a partir de aminoácidos precursores.

MATERIALES

Sangre

Tubos de boro silicato

Pipetas de y 2 mL.

Micropipeta

Agua destilada

Balanza

Macro Centrifuga

Reactivo de creatinina

Espectrofotómetro

Tips

Pinza

Gradilla

Gotero

PROCEDIMIENTO

Preparar 11 tubos con la numeración correspondiente: blanco 1, estándar 1, agua 3, muestras 3 y reactivos 3.

Una vez que saco la sangre de los pacientes, se procede a colocar en los tubos de boro silicato, en el cual se procederá a esperar a que la sangre coagule.

Una vez que haya coagulado se procederá a pesar las muestras, una vez pesadas estas se procede a tomar otros tubos de boro silicato e insertar el agua en ellos y pesarlos.

Una vez obtenido el mismo peso que anteriormente se obtuvo en las muestras de sangre, se procederá a colocarlas en la centrifuga, de esquina a esquina, o sea lateralmente.

La centrifuga será programada a 5 minutos a 2500 revoluciones.

Trascurrido los 5 minutos la centrifuga se apagara automáticamente, y se observara que los sueros se separaron de la sangre.

Se pipetean 3 volúmenes diferentes; con la pipeta de 2 ml se pipetea 1 ml del reactivo de la creatinina y se procederá a ponerlos en otros tubos de boro cilicato.

Con la micro pipeta se procederá a pipetear 100 microlitros de los sueros para mezclar con las tres muestras del reactivo de creatinina (se deberá limpiar el tubo), una vez que la muestra llega a hacer contacto con el reactivo, se lo agita y se procederá a llevarlo a la lectura en el espectrofotómetro.

La lectura se realizará en un lapso de 1.5 minutos

luego realiza la lectura de la muestra y se procederá a sacar los resultados por la absovancia y la transmitancia.

RESULTADOS

Creatinina:

CONCENTRACIÓN St ABSORBANCIA

MUESTRA #1 0,023 1,0 mg/dl

MUESTRA #2 0,029 1,3 mg/dl

MUESTRA #3 0.022 0,9 mg/dl

Valores de referencia: 0,6 – 1,4 mg/dl.

Fundamento químico de la creatinina

Este procedimiento está basado en una modificación de la reacción original del picrato (Jaffe). La creatinina en condiciones de alcalinidad reacciona con los iones picrato con formación de un complejo de un cromógeno. La velocidad de formación del complejo medido a través del aumento de la absorbancia en un intervalo de tiempo prefijado es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra.

Creatinina + Acido pícrico pH >12 Complejo de un cromógeno

37ºC

Especificaciones analíticas para Creatinina

Principio de Reacción Cinético

Temperatura 37 °C

Tipo de Reacción Punto Final

Dirección de Reacción Positiva

Longitud de onda primario 510 nm

Tiempo de lectura 1 min. 30 seg.

Linealidad 20 mg.

CONCLUSIONES

A modo de conclusión se debe manifestar sobre la formación de creatinina, es constante transformándose cada 24 horas una cantidad aproximada de un 2% de creatina en creatinina es un compuesto orgánico generado a partir de la degradación de la creatina, que es un nutriente útil para los músculos.

Es un producto de desecho del metabolismo normal de los músculos que usualmente es producida por el cuerpo en una tasa muy constante, dependiendo de la masa de los músculos, y normalmente filtrada por los riñones y excretada en la orina. La medición de la creatinina es la manera más simple de monitorear la función de los riñones.

INVESTIGACIÓN

Creatinina

La creatinina es una molécula de deshecho que se genera a partir del metabolismo muscular. La creatinina proviene de la creatina, una molécula muy importante para la producción de energía muscular. Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se convierte en creatinina cada día. La creatinina se transporta desde los músculos por medio de la sangre hacia el riñón. Los riñones filtran la mayoría de la creatinina y la eliminan en la orina.

Aunque es una sustancia de deshecho, la creatinina es una prueba diagnóstica esencial, ya que se ha observado que su concentración en sangre indica con bastante fiabilidad el estado de la función renal. Si los riñones no funcionan bien, no eliminan bien la creatinina y por lo tanto ésta se acumula en la sangre. Por esto la creatinina puede avisar de una posible disfunción o insuficiencia renal, incluso antes de que se presenten síntomas. Por eso la creatinina suele figurar en los análisis de sangre que se realizan comúnmente.

Donde se forma la creatina

La creatina se produce naturalmente en el hígado, el páncreas y los riñones humanos. Se concentra principalmente en el tejido muscular, incluido el corazón. Las proteínas de origen animal, como las del pescado, son la fuente principal de los 1-2 gramos al día de creatina que consume la mayoría de la gente en la dieta.

La creatina fue identificada en el año 1832 cuando el químico francés Michel Eugéne Chevreul descubrió un componente de los músculos esqueléticos.

Formación de creatinina

La creatinina es el producto final del catabolismo de la creatina (o fosfocreatina). Se trata de un anhídrido de la creatina que se forma en los músculos por reacción espontánea e irreversible. La creatinina libre no se reutiliza en el metabolismo del cuerpo y por tanto funciona únicamente como producto de excreción de la creatina.

La formación de creatinina es razonablemente constante, transformándose cada 24 horas una cantidad aproximada de un 2% de creatina en creatinina. En consecuencia, la cantidad producida diariamente esta también relacionada con la masa muscular. La creatinina filtra libremente por el glomérulo (pequeñas cantidades son reabsorbidas y también secretadas por los túbulos renales). Finalmente es excretada de forma principal por los riñones, aunque una pequeña parte con las heces.

Función

Gran parte de la creatina se almacena en todos los músculos del cuerpo (alrededor del 90%), se sabe que un adulto que tenga 70 kg de peso corporal posee cerca de 120 g de creatina. La finalidad del almacenamiento es la creación junto con el fósforo de la fosfocreatina (PCr) presente en las células musculares de los vertebrados así como algunos invertebrados, se encuentra presente con la enzima creatina quinasa. Los músculos no son capaces de sintetizar la creatina y es por esta razón por la que la toman del torrente sanguíneo. La creatina constituye la fuente inmediata y directa para regenerar ATP (Adenosín trifosfato) un constituyente energético de las células musculares.

Depuracion de creatinina

La creatinina endógena proviene del metabolismo muscular y es la forma de eliminación de la creatina de la que se deriva por deshidratación, se elimina únicamente por la orina después de filtrarse en el glomérulo. Las cifras normales oscilan entre 15 y 175 ml por minuto, según la edad y sexo.

Valor del aclaramiento de creatinina

La creatinina se produce a ritmo constante y se filtra libremente por el glomérulo, por lo que conociendo la creatinina sérica, la creatinina urinaria y el volumen de diuresis se calcula el aclaramiento de creatinina para estimar el FG (filtrado glomerular). Esta fórmula resuelve el problema de la variación interindividual dependiente de la masa muscular que produce la creatinina plasmática. Los principales problemas son la recogida de la orina y la variación en la secreción tubular, que pueden sobreestimar el FG. La recogida incorrecta de la orina hace impreciso el cálculo del aclaramiento de creatinina. El coeficiente de variación en la excreción de creatinina llega a ser hasta del 70%, mientras que si se eliminan los errores en la recogida varía entre un 3% y un 14%.

Una fracción sustancial de la excreción de creatinina por el riñón se debe a la secreción tubular proximal de tal manera que el aclaramiento de creatinina en individuos normales excede al de insulina en un 10- 40% y, así, el cociente entre el aclaramiento de creatinina respecto al de inulina varía de 1,1 a 1,4. En los pacientes con IRC grave esta ratio puede alcanzar 2,5, indicando que hasta un 60% de la creatinina urinaria deriva de la secreción tubular.

Además, hay una marcada variabilidad inter e intraindividual en la magnitud de la secreción de creatinina lo que hace imposible predecir los cambios en el FG a partir de cambios en el aclaramiento de creatinina130. Debido a la secreción tubular, en situación de IRC avanzada, el aclaramiento de creatinina sobreestima el FG, con tal variación que hace imposible aplicar ningún factor corrector para conocerlo.

Cambios sistemáticos y progresivos en la secreción tubular de creatinina en cada paciente conduce a una infra o sobreestimación de la variación del FG. Por estos motivos la creatinina y su aclaramiento no son buenos métodos para valorar la progresión de la insuficiencia renal. En

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