Determinación de Urea y Creatinina en sangre

Determinación de Urea y Creatinina en sangre

INTRODUCCIÓN

Los compuestos nitrogenados como la urea, el amonio, Creatinina y ácido úrico son productos del metabolismo y forman parte de lo que se denomina “Balance Nitrogenado”. La acumulación del ion amonio (NH4+), en concentraciones anormales tiene consecuencias tóxicas. Por lo tanto las células deben ser capaces de realizar una desactivación y/o una excreción de este con la misma rapidez con que se genera.  La mayor parte de los mamíferos excretan gran parte del nitrógeno, combinando 2ATP, 1CO2 y NH4+ en forma de urea (hay excepciones). La urea (NH2CONH2 PM=) es muy soluble y, al ser eléctricamente neutra, no afecta al pH cuando se acumula, como ocurre con el NH4, sin embargo el efecto toxico es porque puede desnaturalizar a las proteínas. La urea se sintetiza casi exclusivamente en el hígado, y se transporta luego a los riñones para su excreción. La ruta de síntesis que es cíclica fue descubierta por Hans Krebs y Kurt Henseleit (HK&KH) en 1932, cinco años antes del descubrimiento del otro ciclo que hizo famoso a Krebs. El principio del método para la determinación de urea se basa en que la ureasa cataliza la hidrólisis de urea en amoniaco y anhídrido carbónico. El amoniaco obtenido se incorpora al alfa-cetoglutarato por acción de la glutamato deshidrogenasa con oxidación de NADH, y la disminución de NADH en el medio es proporcional a la concentración de urea.

La creatina (C4H7N3O PM=113g/mol) se produce en pequeñas cantidades de manera habitual y es semejante en su composición a un aminoácido. Se sintetiza en el hígado, los riñones y en el páncreas a partir de glicina y arginina que están presentes en la alimentación diaria. Cuando se convierte en fosfocreatina y después se hidroliza espontáneamente formando creatinina, favorece la síntesis de ATP que en las células musculares se emplea para la actividad muscular. También puede obtenerse a través de la dieta rica en leche, carnes rojas y pescados (5 gramos de creatina por kilogramo de carne). Sin embargo la creatina es sensible al calor y al cocinar se reducen drásticamente las cantidades disponibles en estos alimentos. No está presente en los vegetales, por lo que los "vegetarianos", que no comen carnes ni pescados tienen una cantidad muy baja de creatina en su musculatura, y son los que mejor pueden aprovechar su suplemento.

Después de generar el ATP, la creatina se elimina por los riñones como su metabolito la creatinina. La administración de períodos cortos con altas dosis, (en personas sanas, sin daño renal) no ha demostrado problemas en el organismo. Sin embargo se debe tener cuidado en personas con disfunciones renales o que estén tomando diuréticos u otras sustancias que compitan con la creatina en la secreción tubular renal, como la Cimetidina, Probenecid, Trimetoprima y los antiinflamatorios no esteroideos.

La determinación de creatinina en esta práctica está basado en la reacción de la creatinina con picrato alcalino descrito por Jaffé. La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo, y la intensidad del color es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra. [pic 1]

OBJETIVO GENERAL

El alumno conozca las técnicas para determinar la concentración de creatinina y urea en sangre.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

Que el alumno aprenda como determinar creatinina sérica

Que el alumno aprenda a determinar los niveles de urea

Que el alumno aprenda a identificar los niveles normales de creatinina y urea en individuos sanos o con algún problema de salud.

RESULTADOS

Urea

CONCLUSIONES

La práctica fue realizada en el laboratorio de bioquímica con el objetivo de calcular los niveles de urea, así como los niveles de creatinina en sangre; para poder determinar en base a los niveles normales establecidos si mis compañeros están sanos o tienen algún problema de salud.

BIBLIOGRAFÍA

Nelson, D.L. y Cox, M.M. (2005). Lehninger. Principios de Bioquímica. 4ª Ed. Editorial Omega.

Pacheco Leal, D. (2004) Bioquímica Medica. Editorial Limusa.

Laguna, J., Piña, E.(2009). Bioquímica. 6ª  Ed. Manual Moderno.

Complementaria:

Baynes WJ., Dominiczak HM. (2005). Bioquímica Médica. 2a. Ed. Editorial Elsevier Mosby.

Berg, J.M., Tymoczko, J.L., Stryer, L. (2003) Bioquímica. 5ª Ed. Editorial Reverté

Champe CP., Harvey AR., Ferrier RD. (2012). Bioquímica. 4a. Ed. Editorial Lippincott Williams & Wilkins.

Devlin, T. M. (2004). Bioquímica. Un texto con aplicaciones clínicas. 4ª Ed. Editorial Reverté.

Determinación de Colesterol y Triglicéridos

INTRODUCCIÓN

El colesterol es un componente esencial de las membranas de las células en el humano así mismo es precursor de importantes componentes biológicamente activos, como los ácidos biliares, las hormonas esteroideas y la vitamina D. La homeostasis del colesterol es importante en la etiología de la aterosclerosis y es un componente principal de las litiasis biliares. Los humanos sintetizan 1 g de colesterol cada día, principalmente en el hígado. La tasa de síntesis de colesterol y la ingesta dietética determinan su concentración plasmática. La dieta occidental habitual aporta aproximadamente 500 mg (1,2 mmol) de colesterol al día, principalmente contenido en la carne, los huevos y los productos lácteos . Bajo circunstancias normales, entre el 30 y 60% del colesterol se absorbe durante su tránsito a través del intestino.

Tras su absorción intestinal, es transportado al hígado y a los tejidos periféricos como un componente de partículas lipoproteicas denominadas quilomicrones. Éstos son recaptados por el hígado, que reempaqueta el colesterol y los triglicéridos en otras lipoproteínas más pequeñas, las VLDL). Los triacilglicéridos contenidos en las VLDL experimentan una hidrólisis secuencial en los tejidos periféricos, Transformándose las partículas en remanentes de VLDL y después, tras una hidrólisis más extensiva, en LDL. Los remanentes de VLDL y las LDL devuelven el colesterol al hígado mediante su unión al receptor de membrana apoB/E (receptor de LDL). Sin embargo, éstas también pueden penetrar la pared vascular.

En sus pasos iniciales, la vía metabólica de la síntesis del colesterol proporciona sustratos para la síntesis de compuestos importantes para la proliferación celular y para el crecimiento tumoral, en el transporte electrónico y en la mejora del estrés oxidativo. Los oxiesteroles generados en estadios más avanzados de la vía son moléculas de señalización que participan en la regulación de la homeostasis del colesterol

Tiene un peso molecular de 386 Da y contiene 27 átomos de carbono, de los cuales 17 se encuentran incorporados en cuatro anillos fusionados (el núcleociclopentanoperhidrofenantreno), 2 se encuentran en los grupos metilos angulares, enlazados en las intersecciones entre los anillos AB y CD, y 8 se encuentran en la cadena lateral periférica. El colesterol se encuentra casi enteramente compuesto por átomos de carbono y de hidrógeno. Sólo existe un grupo hidroxilo enlazado al carbono 3. Además, el colesterol se encuentra casi completamente saturado, presentando un único doble enlace entre los átomos de carbono 5 y 6.El colesterol reduce la fluidez de la membrana El colesterol (principalmente el colesterol libre) es un componente esencial de las membranas celulares. Se encuentra en sus mayores concentraciones en las membranas plasmáticas (hasta un 25% del contenido lipídico), a la vez que está virtualmente ausente en las membranas mitocondriales internas.

El colesterol es poco soluble en agua. Sólo alrededor del 30% del colesterol circulante se encuentra en forma libre, mientras que la mayor parte se encuentra esterificado a través del grupo hidroxilo a ácidos grasos de cadena larga como los ácidos oleico y linoleico. Los ésteres de colesterol son aún menos solubles en agua que el colesterol libre.

El colesterol se sintetiza a partir de la acetil-coenzima A. La HMG-CoA reductasa es la enzima limitante en esta vía metabólica Virtualmente, la totalidad de las células humanas tienen la capacidad de sintetizar colesterol. El hígado es el lugar principal de biosíntesis de colesterol, mientras que en el intestino, la corteza suprarrenal y las gónadas se sintetizan cantidades menores.

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