Fundamentos De Espectrofotometria

CONOCIMIENTO DE TÉCNICAS ANALÍTICAS

PARTE I: FUNDAMENTOS DE ESPECTROFOTOMETRÍA

I. OBJETIVO GENERAL

Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometría para la determinación de concentraciones en soluciones.

II. OBJETIVOS PARTICULARES

a. Conocer los fundamentos de la espectrofotometría y las variables involucradas en la ley de Lambert-Beer-Bourger.

b. Seleccionar la longitud de onda apropiada para las mediciones de absorbancia.

c. Construir una curva patrón de soluciones de yodo (serie tipo).

INTRODUCCIÓN

La espectroscopia de absorción es la medida de la cantidad de luz absorbida por un compuesto en función de la longitud de onda de la luz. La región visible, a la que es sensible el ojo humano, se localiza entre los 380 y 780 nm.

La radiación que incide sobre la muestra absorbente debe de ser lo más monocromática posible, es decir, debe tener sólo un pequeño rango de longitudes de onda, porque: Cuanto más monocromática sea la radiación, mejor se cumplirá la ley de Beer- Bourger.

¿Qué nos dice la ley antes mencionada? La ley de Beer- Bourger, establece una relación lineal entre la absorbancia y la concentración:

A = -log TA = log ( I / I0 ) = (εx b) x c

ABSORBANCIA = (ε x b) x c

Mediante el registro de la absorbancia adecuada se construye una curva patrón y a partir de aquí realizarlos análisis cuantitativos para determinar las concentraciones desconocidas en disoluciones de las muestras. La curva patrón es un marco de referencia que se construye de cantidades conocidas de una sustancia para conocer valores desconocidos. Una curva patrón se construye usando soluciones de concentraciones conocidas de un compuesto determinado. Por ejemplo se grafica concentración Vs absorbancia y se establece una recta en la que cada punto corresponde a una concentración distinta y por ende una absorbencia distinta.

PROPUESTA DEL DISEÑO EXPERIMENTAL

1.- Espectro de absorción.

¿Qué? Deseamos saber a partir de que longitud de onda dada, una disolución que tiene una concentración constante, presenta valores de absorbancia semiconstante.

¿Cómo? Se calibrará antes de cambiar de longitud de onda al equipo con un blanco, en este caso con agua destilada, después de esto, se varía la longitud y por tanto la absorbancia es distinta.

¿Para qué? Para hacer una gráfica del espectro del yodo, y así seleccionar la longitud de onda a trabajar para realizar la curva patrón.

2.- Curva patrón

¿Qué? Con el dato de longitud de onda, se medirá absorbancia de diferentes diluciones de una solución yodo-yodurada (solución colorida: amarilla).

¿Cómo? De la dilución menos concentrada a la más, la longitud de onda no cambiará, pero la absorbancia cambiará.

¿Para qué? Generar la curva patrón.

METODOLOGÍA EMPLEADA POR EL EQUIPO.

Se encendió el espectrofotómetro y se dejó así aproximadamente 25 min, para que este pudiera funcionar de manera correctamente. Se explicó el funcionamiento, una compañera del grupo, realizó la dilución para llevarla a una concentración de 2x10-4 M, la cantidad necesaria se colocó en una celda, y en otra más se colocó el agua destilada.

Se debía colocar desde la onda de longitud más baja e ir aumentando de 10 en 10, sin dejar de calibrar con el blanco cada que se debía colocar la dilución de la solución de yodo-yodurada. Así se anotaban cada valor de absorbancia en la tabla 1, de ahí, debimos seleccionar una longitud de onda, en la cual ya no variara mucho, y ese valor fue el de 505.

Para la realización de la curva patrón, se llevaron a cabo diferentes diluciones, agregando cierta cantidad de la solución de yodo-yodurada, y agua, y colocando cada dilución en un tubo de ensaye diferente, en total se etiquetaron 5.

Al igual que en procedimiento anterior, antes de colocar la celda con cada dilución, se calibraba con el blanco, y la longitud de onda se mantenía en este caso constante a un valor de 505nm.

Se empezó con la más diluida a la más concentrada, antes de colocar la siguiente muestra, se enjuagaba con un poco de la misma, y después se llenaba hasta una marca que la celda

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