Laboratorio De Microbiologia

Practica 2.

Condiciones de crecimiento y Metabolismo Bacteriano

a. ¿Qué factores intrínsecos y extrínsecos afectan el crecimiento de los microorganismos?

Los factores intrínsecos son aquellos que por naturaleza se les adjudican a los microorganismos. Como: habitad, disponibilidad de alimentos, éxito reproductivo.

Los factores extrínsecos son todos aquellos que no dependen del microorganismo, están en función del medio ambiente. Como: agua, acidez, potencial de óxido reducción, temperatura, refrigeración, congelación, oxigeno.

b. Defina los diferentes sistemas de siembra: Punción y estría, agotamiento, rejilla y profundidad.

Siembra por punción y estría: Es la siembra de una colonia bacteriana en un tubo con agar, donde de toma un asa recta, se punza una colonia bacteriana y se punza el agar en tubo.

Siembra por agotamiento: Se toma una caja de Petri, la base se marca con los números de 1 al 3, se toma la muestra y se estría en la caja primero el número uno hasta la mitad, se esteriliza el asa, se voltea la caja y se realiza el mismo procedimiento en los siguientes números.

Siembra en rejilla: Se toma la muestra y se realizan estrías que atraviese el centro de la caja de Petri, luego se realiza estrías en ángulo recto a la primera y paso a segur se da vuelta a unos 90º para realizar de nuevo estrías y cubrir así toda la superficie de la caja.

Siembra de profundidad: Se marca una caja de Petri, con el número de grupo, fecha y siembra. Cerca del calor del mechero se abre la caja de Petri y se toma una muestra del microorganismo a cultivar del tubo de ensayo con la pipeta y verter un poco de agar nutrido. Realiza los movimientos necesarios para distribuir el contenido uniformemente y dejar al el laboratorio a 37ºC por 48 horas para su incubación

c. Qué se entiende por metabolismo Bacteriano

Es la suma de transformaciones químicas que ocurren en la célula.

Se pueden diferenciar en dos clases: Generadoras de energía o degradativas (catabolismo) y las Consumidores de energía o biosintéticas (anabolismo).

d. Indique cual es la importancia de realizar el antibiograma en una muestra clínica.

Es la de medir la sensibilidad de una cepa bacteriana que se sospecha es la responsable de una infección a uno o varios antibióticos, y en primer lugar, para orientar las decisiones terapéuticas individuales.

La segunda importancia del antibiograma es el de seguir la evolución de las resistencias bacterianas.

e. Defina medio selectivo y medio diferencial

Los medios selectivos suelen ser de alta o moderada selectividad, este permite el cultivo y el aislamiento del microorganismo a estudiar.

Medio diferencial permite distinguir un microorganismo de otro por la característica que presenta dicha colonia, se evalúan las características fisiológicas específicas de cada microorganismo.

RESULTADOS

FACTORES EXTRÍNSECOS E INTRÍNSECOS

De acuerdo a la lectura de los medios de cultivo incubados complete las siguientes tablas:

Influencia de la temperatura

TEMPERATURA CRFECIMIENTO(POSITIVO/NEGATIVO)

4°C Transparente lo que nos indica que es negativo

37°C Se presenta turbidez lo que nos indica que es un microorganismo que crece a temperatura de 37° c

55°C Transparente lo que nos indica que es negativo

Tipo de microorganismo según la temperatura de crecimiento: MESOFILO

Influencia del Ph

PH CRFECIMIENTO(POSITIVO/NEGATIVO)

3.0 Transparente lo que nos indica que es negativo

7.0 Se presenta turbidez lo que nos indica que es un microorganismo que crece a PH 7.

11 Transparente lo que nos indica que es negativo

Tipo de microorganismo según el pH de crecimiento: NEUTROFILO

Influencia de la tensión de oxígeno

TENSION DE 02 CRFECIMIENTO(POSITIVO/NEGATIVO)

Aerobio Se presenta turbidez lo que nos indica que es un microorganismo que crece sin presencia de oxigeno.

Anaerobio Transparente lo que nos indica que es negativo

Microaerofilo Crece en presencia de bajas tensiones de oxigeno

Tipo de microorganismo según las necesidades de oxígeno de crecimiento: MICROAEROFILO – AEROBIO

.2. METABOLISMO MICROBIANO

Realice la lectura de la reacción metabólica de cada uno de los tubos y cajas inoculadas con anterioridad. Interprete y analice las reacciones obtenidas con los fundamentos de los medios de cultivo que investigó y complete la siguiente tabla:

MEDIO Reacción que se evalúa en

medio de cultivo

Color de las colonias o medio según reacción de cultivo.

Agar MacConkey Fermentación de lactosa Traslucido (negativo)

Agar EMB Fermentación de lactosa Traslucidos (negativo)

Agar XLD Fermentación de lactosa Color rojo negativo

TSI Fermentación de sacarosa, lactosa y glucosa , producción de gas y h2s Fondo amarillo lo que nos indica que es un microorganismo que fermenta la glucosa.

LIA Formación de lisina Morado lo que indica que no produce este aminoácido.

Simmons Citrato AGAR Si utiliza el carbono como fuente Azul

SIM Producción de indol – motilidad- Color amarillo y el anillo que se forma con el reactivo kovach es de color amarillo lo que nos indica que la reacción es negativa para producción de indol

BRILLA Fermentación de lactosa Hay turbidez y se producción de gas en la campana de durham

Klinger agar Producción de lactosa, glucosa Tubo amarillo hay producción de lactosa y glucosa

ACCIÓN DE AGENTES QUÍMICOS SOBRE MICRORGANISMOS

Se realizo el antibiograma con cinco antibióticos:

• Gentamicina

• Eritromicina

• Ceftriaxona

• Cefalexina

• Amoxicilina

• Mida el tamaño de los halos de inhibición con la ayuda de la regla.

• Según sus observaciones indique cual sustancia es mejor en el control de cada

Microorganismo de prueba.

SENSIDISCO Halo (mm) Interpretación

Ceftriaxona 10mm Nos indica que el enterobacter aerogenes es sensible a este antibiótico que es una cefalosporina de tercera generación que combate bacterias gran positivas.

Cefalexina 8 mm Nos indica que el enterobacter aerogenes es sensible a este antibiótico que es una cefalosporina de primera generación que combate bacterias gran positivas.

CUESTIONARIO

a. De acuerdo a los resultados obtenidos indique las características metabólicas del microorganismo que le correspondió y señale la importancia de conocer estas características.

Enterobacter aerogenes

Es una bacteria Gram negativo, en forma de vara bacteria. E. aerogenes es una bacteria causante de enfermedades nosocomiales y la bacteria patógena que causa las infecciones oportunistas, incluyendo la mayoría de los tipos de infecciones.

La mayoría son sensibles a la mayoría de los antibióticos diseñados para esta clase bacterias, pero esto se ve complicado por sus mecanismos inducibles de resistencia, particularmente lactamasa que significa que se convierten rápidamente en resistentes a los antibióticos estándar durante el tratamiento, que requiere un cambio en los antibióticos para evitar el empeoramiento de la sepsis.

E. aerogenes se encuentra generalmente en el ser humano tracto gastrointestinal y generalmente no causa enfermedad en individuos sanos. Se ha encontrado que viven en diversos residuos, productos químicos de higiene, y el suelo. La bacteria también tiene cierta importancia comercial - el gas hidrógeno producido durante la fermentación se ha experimentado con el uso de melaza como sustrato.

b. Defina los términos bactericida y bacteriostático e indique la importancia del antibiograma bacteriostático es aquel que aunque no produce la muerte a una bacteria, impide su reproducción; la bacteria envejece y muere sin dejar descendencia.

Bactericida son los sistemas que sí “matan” a los microorganismos que causan enfermedades.

El antibiograma es la prueba microbiológica que se realiza para determinar los síntomas del resfriado causado por una colonia bacteriana a un grupo de antibióticos

La importancia del antibiograma es la de medir la sensibilidad de una cepa bacteriana que se sospecha es la responsable de una infección a uno o varios antibióticos. En efecto, la sensibilidad in vitro es uno de los requisitos previos para la eficacia in vivo de un tratamiento antibiótico. El antibiograma sirve, en primer lugar, para orientar las decisiones terapéuticas individuales. En segundo lugar el antibiograma sirve para seguir la evolución de las resistencias bacterianas.

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