..Determinar la concentración de albúmina en la clara de huevo por el método de Lowry.
Enviado por Anai Hernandez • 29 de Marzo de 2016 • Prácticas o problemas • 897 Palabras (4 Páginas) • 2.183 Visitas
Universidad Nacional Autónoma de México[pic 1][pic 2]
Facultad de Estudios Zaragoza
Bioquímica Celular y de Tejidos l
Curva Estándar de Proteínas
Objetivos:
- Desarrollar y analizar una curva estándar
- Determinar la concentración de albúmina en la clara de huevo por el método de Lowry.
Análisis de resultados:
Contenido de cada tubo de la curva estándar.
Tubo | Blanco | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
Solución problema de proteínas | - | 0.15 | 0.3 | 0.6 | - | - | - | - |
Solución patrón de proteínas ()[pic 3] | - | 0.1 | 0.2 | 0.4 | 0.8 | |||
Destilada[pic 4] | 2.0 | 1.85 | 1.7 | 1.4 | 1.9 | 1.8 | 1.6 | 1.2 |
Reactivo 3 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
Agitar y dejar reposar 10 min. | ||||||||
Reactivo 4 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
Agitar inmediatamente y dejar reposar 20 min. | ||||||||
Medir absorbancia a 640 nm. |
Tabla 1. Contenido de cada tubo de la curva estándar.
Absorbancias obtenidas
Tubo | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
Absorbancia | 0.131 | 0.193 | 0.298 | 0.105 | 0.139 | 0.237 | 0.332 |
Tabla 2. Valores registrados durante la medición con el espectrofotómetro.
Valores para realizar la curva estándar de proteínas
Tubo | Concentración | absorbancia |
blanco | 0 | 0 |
4 | 0.01 | 0.105 |
5 | 0.02 | 0.139 |
6 | 0.04 | 0.237 |
7 | 0.08 | 0.332 |
Tabla 3. Resultados obtenidos en los tubos para la elaboración de la curva estándar
[pic 5]
Grafico 1.- Curva estándar de proteína (albúmina), así como los valores de regresión lineal.
Datos obtenidos estadísticamente
Coeficiente de correlación | Coeficiente de variación |
0.9634 |
Cantidad de proteínas en las muestras problema
tubo | Cantidad (ml) | Absorbancia | Proteína (mg) |
1 | 0.15 | 0.131 | 0.0218 |
2 | 0.3 | 0.193 | 0.0378 |
3 | 0.6 | 0.283 | 0.0611 |
Tabla 5. Cantidad de proteínas en la muestra problema por regresión lineal.
Cálculos de la cantidad de albumina presente en los 3 primeros tubos
Tubo 1
[pic 6]
Tubo 2
[pic 7]
Tubo 3
[pic 8]
Cuestionario
1.- ¿Cuál es el fundamento del método de Lowry?
Es un método colorimétrico de valoración cuantitativa de las proteínas. A la muestra se añade un reactivo que forma un complejo coloreado con las proteínas, según la ley de Lambert-Beer [pic 9]
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