Evaluación de la capacidad de desarrollo in vitro de ovocitos bovinos provenientes de vacas con predominancia fenotípica bos taurus y bos indicus

Evaluación de la capacidad de desarrollo in vitro de ovocitos bovinos provenientes de vacas con predominancia fenotípica bos taurus y bos indicus

El estudio se centró en evaluar la capacidad de desarrollo in vitro de ovocitos bovinos que provienen de vacas mestizas con predominancia fenotípica de dos subespecies de bovinos, conocidas como Bos taurus y Bos indicus. Los ovocitos se recolectaron de ovarios de hembras bovinas que se obtuvieron de un matadero comercial. Luego, se realizaron una serie de procedimientos para seleccionar y evaluar estos ovocitos en términos de maduración y fecundación in vitro.

El proceso de selección de ovocitos se llevó a cabo utilizando la técnica de "slicing", que consiste en cortar la superficie del ovario y seleccionar los ovocitos que tenían al menos una capa de células del cumulus y un citoplasma homogéneo. Estos ovocitos seleccionados se sometieron a maduración y fecundación in vitro (MIV-FIV) utilizando semen de un toro de la raza Brahman, que pertenece a la subespecie B. indicus.

Para evaluar la MIV y FIV, se fijaron los ovocitos y se tiñeron con aceto-orceína. Los resultados mostraron que la tasa de maduración de ovocitos de vacas con predominancia fenotípica B. indicus fue del 66.17%, mientras que las vacas con predominancia fenotípica B. taurus alcanzaron un 50.94%. En cuanto a la tasa de fecundación, se obtuvo un 14.28% de ovocitos penetrados normalmente y un 35.72% de ovocitos penetrados anormalmente para el grupo de ovocitos con predominancia fenotípica B. indicus. Mientras que para vacas con predominancia fenotípica B. taurus, un 10.22% correspondió a ovocitos penetrados normales y un 19.31% de ovocitos penetrados anormales.

En resumen, los resultados del estudio indicaron que los ovocitos de vacas mestizas con predominancia fenotípica B. indicus mostraron una mayor competencia en las primeras etapas de desarrollo in vitro en comparación con los ovocitos de vacas mestizas con predominancia fenotípica B. taurus. Esto sugiere que los genes termotolerantes presentes en el ganado B. indicus pueden influir en su capacidad de desarrollo en ambientes tropicales, lo que puede ser relevante para la producción bovina en estas regiones.

Evaluación seminal en laboratorio

La evaluación seminal en laboratorio es un proceso fundamental para determinar la calidad del semen y su capacidad para la fertilización. Se lleva a cabo a través de varios parámetros clave:

1. Recepción del Semen: Se utiliza una vagina artificial para obtener el semen, que consiste en un tubo cilíndrico recubierto con goma que se llena de agua caliente y aire para simular las condiciones ideales para la eyaculación.

2. Evaluación Morfológica: Se analizan las cualidades esenciales de los espermatozoides, incluyendo su morfología normal, motilidad progresiva, metabolismo energético activo, capacidad de motilidad hiperactivada, integridad de la membrana y enzimas asociadas a la fecundación, capacidad de penetración y transferencia genética óptima.

3. Concentración Espermática: La concentración de espermatozoides es crucial, con una inseminación normal requiriendo más de 15 millones de espermatozoides por mililitro. Se considera oligoaspermia cuando la concentración está entre 15 millones y 100,000 por mililitro, y criptoaspermia cuando es inferior a 100,000, mientras que la azoospermia significa la ausencia completa de espermatozoides.

4. Motilidad: La motilidad espermática es uno de los parámetros más importantes. Anteriormente, se evaluaba de manera semi-cuantitativa, pero se han desarrollado métodos más precisos en los últimos años. La motilidad se refiere al porcentaje de espermatozoides móviles y al tipo de movimiento que exhiben.

5. Viabilidad: La integridad de la membrana plasmática es esencial para la viabilidad celular, aunque una membrana intacta no garantiza la viabilidad. La criopreservación puede afectar las membranas espermáticas, y las técnicas de visualización permiten distinguir espermatozoides vivos de muertos.

6. Estado del Acrosoma: El acrosoma en buen estado es esencial para la fecundación. Se evalúan sus tres regiones: la zona acrosomal, la zona post-cromosómica y el segmento ecuatorial.

7. Pruebas de Funcionalidad Espermática: Se analiza la integridad de la membrana espermática, ya que desempeña un papel crucial en el reconocimiento y transporte de moléculas y en la capacitación del espermatozoide.

8. Morfología: La morfología de los espermatozoides es un componente clave de la evaluación. Se busca una cabeza ovalada, núcleo fijo, cola recta y color transparente como indicadores de buena morfología. Las anomalías morfológicas pueden estar asociadas con problemas de fertilidad.

En resumen, la evaluación seminal en laboratorio abarca una serie de parámetros para determinar la calidad del semen y su capacidad para fertilizar. La normalidad en movilidad, morfología y concentración espermática es esencial para una fertilidad adecuada, mientras que condiciones anormales como astenospermia, teratospermia y oligoospermia pueden afectar la fertilidad.

Fertilización In Vitro

Resumen de la Fertilización In Vitro:

La fertilización in vitro (FIV) es la tercera etapa del proceso de producción de embriones in vitro. En esta etapa, los ovocitos maduros se cultivan con espermatozoides para facilitar la fecundación. Aquí se describen los pasos clave del proceso:

1. Preparación del Medio de Fertilización: Se prepara un medio de fertilización que contiene varios componentes, como albúmina, lactato, piruvato, heparina y otros. Este medio se estabiliza en una incubadora durante 2 horas.

2. Capacitación de los Espermatozoides: Los espermatozoides se someten a un proceso de capacitación para adquirir su potencial fecundante. Un método común implica el uso de gradientes de densidad con percol para separar los espermatozoides del líquido seminal y diluyentes.

3. Centrifugación en Gradiente de Densidad: Se centrifuga el semen con gradientes de densidad para separar los espermatozoides móviles e intactos de los demás componentes. Este proceso se basa en el principio de sedimentación.

4. Transferencia de los Espermatozoides: Después de la centrifugación, se transfieren los espermatozoides a un nuevo tubo y se realiza una segunda centrifugación para lavarlos y eliminar las soluciones restantes.

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