Fijacion De Tejido Nervioso Por Perfusion Global

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE GUERRERO

UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS NATURALES

QUÍMICO FARMACÉUTICO BIÓLOGO

ANATOMIA Y FISIOLOGÍA HUMANA II

Práctica n°1

“Fijación de tejido nervioso por perfusión global”

Integrantes:

Elida Díaz Pinzón

Osvaldo Hernández Carbajal

Maribel Marcelino Hernández

M.C. Roxana Reyes Rios

601 Q.F.B

Mesa 3

26 de Marzo de 2014

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE GUERRERO

Unidad Académica de Ciencias Naturales

“FIJACIÓN DE TEJIDO NERVIOSO POR PERFUSIÓN GLOBAL”

Díaz, P. E., Hernández, C. O., Marcelino, H. M. Grupo 601- Q.F.B.

RESUMEN

Introducción. La Perfusión es el método de mayor utilización en animales de experimentación, ya que el líquido fijador es inoculado en el sistema circulatorio del espécimen, por lo tanto, fija en principio desde adentro hacia fuera de los órganos a estudiar, lo que da excelentes resultados cuando la técnica es realizada con éxito. La perfusión consiste en anestesiar el animal y, mediante un sistema especial de inyección, reemplazar la sangre con una solución salina y después se inyecta el fijador.

El flujo de solución salina eliminara los eritrocitos del sistema circulatorio del encéfalo (algunas células sanguíneas se marcan visiblemente durante el proceso de tinción y pueden interferir durante la observación al microscopio del tejido)

Objetivo. Fijar el tejido nervioso (encéfalo y médula ósea) de una rata por el método de perfusión global y extraerlo para conservarlo en formaldehido.

Material y métodos. Se realizo la extracción de médula ósea y encéfalo de una rata para fijar sus tejidos por perfusión global, para después conservarlo con formaldehido.

Resultados. Se logro la extracción de encéfalo y médula ósea, al igual que su fijación por perfusión global y mantenerlo en formaldehido para evitar su deterioro.

Discusión. El formaldehido es un fijante que conserva tejidos, órganos, o diferentes partes o sistemas biológicos de animales, la perfusión es una técnica la cual se inserta el fijador directamente al corazón para que se esparza por todo el cuerpo y fije tejidos, órganos y sistemas (todo aquello que esté conectado con el sistema circulatorio) este caso se realizo este método para remover el encéfalo y sistema nervioso el cual está en las vertebras espinales para observar su forma y detalles.

Conclusión. La perfusión es un método para fijar órganos en este caso en una rata por medio de la inserción de un fijante (formaldehido al 10%) al corazón para que se regara el fijante por todo el sistema circulatorio y fijara todo el cuerpo desde el sistema nervioso hasta órganos, para su remoción, y así poder observar sus partes del encéfalo y medula espinal del sistema nervioso central.

ABSTRACT

Introduction. Perfusion is the method most widely used in experimental animals, as the fixative is inoculated into the circulatory system of the specimen, therefore, set to start from the inside out bodies to study, which gives excellent results when the technique is performed successfully. The infusion is to anesthetize the animal and, using a special injection system, replace the blood with a saline solution and then injected the fixative.

Saline flow eliminate erythrocytes circulatory system of the brain (some blood cells are marked visibly staining during and may interfere during the microscopic observation of tissue).

Objective. Fasten the nervous tissue (brain and bone marrow) of a rat by the method of overall perfusion and extract to preserve in formaldehyde.

Material and methods.

Results. Removal of brain and bone marrow achievement, like its overall perfusion fixation and keep formaldehyde to prevent spoilage.

Discussion. Formaldehyde is a fixative that preserves tissues, organs, or different parts or biological systems of animals, the infusion is a technique which the fastener is inserted into the heart so that it spread throughout the body and fixed tissues, organs and systems (everything that is connected to the circulatory system) this case this method was performed to remove the brain and nervous system which is in the spinal vertebrae to observe its shape and details.

Conclusion. The infusion is a method for fixing bodies in this case a rat by inserting a fixative (formaldehyde 10%) the heart to the fixing is watered throughout the circulatory system and fix the whole body from the nervous system up bodies for removal, so you can watch parts of the brain and spinal cord of the central nervous system.

GENERALIDADES

Muchas de las investigaciones científicas son realizadas en animales de experimentación principalmente las ratas y los ratones. La rata constituye un excelente modelo de estudio desde el punto de vista anatómico y en gran parte fisiológico, debido a la considerable similitud que tiene con el ser humano.

La Perfusión es el método de mayor utilización en animales de experimentación, ya que el líquido fijador es inoculado en el sistema circulatorio del espécimen, por lo tanto, fija en principio desde adentro hacia fuera de los órganos a estudiar, lo que da excelentes resultados cuando la técnica es realizada con éxito.

La perfusión consiste en anestesiar el animal y, mediante un sistema especial de inyección, reemplazar la sangre con una solución salina y después se inyecta el fijador.

El flujo de solución salina eliminara los eritrocitos del sistema circulatorio del encéfalo (algunas células sanguíneas se marcan visiblemente durante el proceso de tinción y pueden interferir durante la observación al microscopio del tejido).

La fijación de tejido es el proceso que nos permite conservar los tejidos de forma que se asemejen, en un mayor grado posible, a su estado in vitro. La exposición a sustancias fijadoras provoca en el tejido la formación de enlaces cruzados entre las proteínas de las estructuras que lo componen. Este hecho es causante del aumento considerable de la dureza del tejido. Además, la exposición a estos agentes fijadores provocan la desactivación de ciertas enzimas celulares y la eliminación de las bacterias y los gérmenes del medio y, por tanto, interrumpen los procesos de autolisis y degeneración del tejido.

Hay dos tipos de fijación por perfusión: De gran circuito y de pequeño circuito.

El primero, se realiza inoculando el fijador a partir del corazón (ventrículo izquierdo) por lo que la fijación ocurre en todos los órganos del espécimen.

En la perfusión de pequeño circuito, el fijador se inyecta solo en una porción del animal, fijando solo la parte de interés para el investigador.

Los fijadores son:

a) Gaseosos: como el formaldehído

b) líquidos: como el ácido acético, al alcohol etílico, la acetona, etc.

c) sólidos: como el bicloruro de mercurio, el bicromato de potasio, etc.

OBJETIVO GENERAL

 Fijar el tejido nervioso de una rata por el método de perfusión global.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

• El alumno conoce y aprende a realizar la perfusión de tejidos y órganos.

• Comprende en qué consiste la perfusión con ayuda de un animal de laboratorio.

• Extrae del animal la medula ósea y el encéfalo.

MATERIAL

• Equipo para venoclosis

• Punzocat de 19

• Estuche de disección

• Pentobarbital sódico

• Sol. Salina 0.9 %

• Formaldehido al 10 %

• Guantes

• Cubreboca

• Rata

• Balanza Granataria

• Algodón

• Jeringa

• Charola de disección

METODOLOGÍA

1.- Se pesó la rata con la finalidad de saber la dosis de anestesia que se le aplico, posteriormente se procedió anestesia al animal, con ayuda de la solución de fenobarbital.

2.- Sobre una charola de disección, se colocó papel estraza y encima colocamos la rata.

3.-se hiso un corte en la parrilla costal, dejando al descubierto el corazón.

4.- Introducimos el punzocat en el corazón (ventrículo izquierdo), ya con el equipo de venoclosis, abrimos el sistema con el líquido lavador (solución salina), después aplicamos el formaldehido para la fijación de los órganos.

5.- Retiramos las vísceras y observamos cada una.

6.- se disecto el encéfalo y medula ósea, separando cráneo y columna vertebral, teniendo mucho cuidado de no fragmentar el tejido nervioso.

7.- Se guardó en un frasco el tejido extraído (encéfalo y médula ósea).

Se anestesio la rata con 2.5 mL de pentobarbital sódico vía intraperitonial como lo muestra la imagen 1.

La rata tubo un peso de 89.00 gr.

RESULTADOS

Bulbo Raquídeo:(Médula Oblonga).

Es la continuación de la médula que se hace más gruesa al entrar en el cráneo , Control de las funciones básicas como circulación de la sangre a través del corazón y respiración, Regula el funcionamiento del corazón y de los músculos respiratorios, además de los movimientos de la masticación, la tos, el estornudo, el vómito .4 Médula espinal:

La médula espinal es un cordón nervioso, blanco y cilíndrico encerrada dentro de la columna vertebral. En él la sustancia gris está en el interior, rodeada por sustancia blanca. Su función más importante es conducir, mediante los nervios de que está formada, la corriente nerviosa que conduce las sensaciones hasta el cerebro y los impulsos nerviosos que lleva las respuestas del cerebro a los músculos.4

Cerebelo:

Tiene la forma de una ostra, parcialmente abierta hacia adelante. Está alojado en la fosa posterior del cráneo, por detrás del tallo cerebral y del IV ventrículo, por debajo de los lobos occipitales del cerebro Control de movimiento, energía muscular, postura.3 Cerebro:

Es la parte más importante, está formado por la sustancia gris (por fuera, formada por cuerpos neuronales) y la sustancia blanca (por dentro, formada por haces de axones).3

Hemisferios cerebrales:

Unidos por el cuerpo calloso. En los hemisferios se distinguen zonas denominadas lóbulos, que llevan el nombre del hueso en que se encuentran en contacto (frontal, parietal...).3 Hemisferio derecho:

Reconoce imágenes. Controla las facultades artísticas y la sensibilidad espacial. Procesa la información de manera global y simultánea. Controla la mano izquierda, la imaginación y las emociones.

Hemisferio izquierdo:

Controla las funciones lógicas. Es analítico y verbal, fragmentario y secuencial. Controla la mano derecha, la habilidad numérica, el lenguaje y el pensamiento racional, la escritura y la lectura.3

DISCUSIÓN

El formaldehido es un fijante que conserva tejidos, órganos, o diferentes partes o sistemas biológicos de animales, la perfusión es una técnica la cual se inserta el fijador directamente al corazón para que se esparza por todo el cuerpo y fije tejidos, órganos y sistemas (todo aquello que esté conectado con el sistema circulatorio) este caso se realizo este método para remover el encéfalo y sistema nervioso el cual está en las vertebras espinales para observar su forma y detalles, ya que la rata es muy parecida en el acomodamiento y formas de sus órganos al cuerpo humano (excepto por el páncreas ya que este es una masa amorfa de tejido).

Ya extraído el sistema nervioso se paso a observa sus partes del encéfalo como los hemisferios, cerebelo, corteza cerebral y en medula espinal: cervical, torácica, lumbar y sacra. Para después conservarlos en un vaso de precipitado con formaldehido al 10%.

CONCLUSIÓN

La perfusión es un método para fijar órganos en este caso en una rata por medio de la inserción de un fijante (formaldehido al 10%) al corazón para que se regara el fijante por todo el sistema circulatorio y fijara todo el cuerpo desde el sistema nervioso hasta órganos, para su remoción, y así poder observar sus partes del encéfalo y medula espinal del sistema nervioso central.

LITERATURA REVISADA

1.- Armstrong G.G. Anatomía Macroscópica de los Sistemas de Órganos. En: Manual de

Prácticas de Fisiología. Editorial Interamericana. México. pp 3-12. 1970.

2.- http://docencia.izt.uam.mx/retana/fisiologia_general/practicas/practica1.pdf.

Fecha de consulta:[16 de Marzo de 2014]

3.-http://anatolandia.blogspot.mx/2013/10/caracteristicas-partes-funciones-encefalo.html. Fecha de consulta:[15 de Marzo de 2014]

4.-http://www.mclibre.org/otros/daniel_tomas/1bachillerato/nervioso/encefalo1b.html. Fecha de consulta:[15 de Marzo del 2014]

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