Hidrólisis de una proteína y ensayos para proteínas y aminoácidos

Practica 6

Hidrólisis de una proteína y ensayos para proteínas y aminoácidos

Objetivos

• Efectuar la hidrólisis total de una proteína
• Identificar aminoácidos presentes en hidrolizaciones, a través de sus propiedades químicas.
• Identificar aminoácidos presentes en proteínas, a través de sus propiedades químicas.

Fundamentos

Los aminoácidos es una Molécula que contiene un grupo carboxilo (-COOH) y un grupo amino (NH2-) libres. Pueden expresarse en general por NH2-CHR-COOH, siendo R un radical característico para cada ácido

Las proteínas son biomoléculas formadas por cadenas lineales de aminoácidos Las proteínas desempeñan un papel fundamental para la vida y son las biomoléculas más versátiles y más diversas hay diferentes tipos de proteínas como :

Fibrosas: Presentan cadenas polipeptídicas largas y una estructura secundaria atípica. Son insolubles en agua ,de gran resistencia

Globulares: Se caracterizan por doblar sus cadenas en una forma esférica apretada o compacta dejando grupos hidrófobos hacia adentro de la proteína son solubles en agua  y desempeñan diferentes función en el organismo

Mixtas: Poseen una parte fibrilar (comúnmente en el centro de la proteína) y otra parte globular (en los extremos).

Las proteínas  pueden tener varias estructuras  que pueden ser :

Estructura Primaria: es la secuencia de aminoácidos de la proteína y están implicados enlaces peptídicos. Nos indica qué aminoácidos componen la cadena polipeptídica

Estructura Secundaria: es la disposición de la secuencia de aminoácidos en el espacio.

Existen dos tipos de estructura secundaria: α-hélice y hoja plegada-β

Estructura Terciaria: La estructura terciaria se basa en la disposición de la estructura secundaria de un poli péptido al plegarse sobre sí misma originando una conformación globular, esta conformación facilita la solubilidad en agua

Las proteínas cumplen diferentes funciones: enzimas, hormonas, trasportadores, los anticuerpos, receptores de muchas células, etc.

Hidrólisis de las proteínas
es el rompimiento del enlace peptico, fragmentando las proteínas en sus monómeros (aminoácidos). Existen 3 tipos de hidrólisis

Hidrólisis acida

Hidrólisis básica

Hidrólisis enzimática

 Dependiendo de  las condiciones de la hidrólisis se pueden realizar hidrolisis parciales que fragmentaran a la proteína en aminoácidos ,fragmentos peptidicos ,etc  pudiendo así hacer diferentes análisis  que nos ayudaran para poder saber que tipo de aminoácidos presentan les proteínas

Resultados  de las identificaciónes

Reacción Xantoproteica

Tubo 1 que contiene solución A hidrólisis de gelatina  toma un color café claro nos da negativo

Tubo 2 que contiene solución de algumina toma un color amarillo nos da positivo

Reacción de precipitación

Tubo 1  la solución A (Grenetina Hidrolizada), reacción es negativa        

Tubo2  la solución D (solución de Albumina)  la reacción es positiva presento un precipitado

       Tubo 3 agua destilada la reacción es  negativa.

Reacción de Biuret

Tubo 1 ,Tubo Testigo color azul claro y la prueba es negativa

Tubo 2 Tubo 2 (Grenetina sin Hidrolizar + Hidróxido de sodio + CuSO4) El color obtenido es el purpura es positiva

Tubo 3 (solución de Albumina + CuSO4) Se obtiene un  color azul claro la prueba es negativa

Tubo 4 (Grentetina hidrolizada + CuSO4 + NaOH) En la mezcla no se obtiene ningún tipo de color

Tubo 5 (solución de Albumina + NaOH + CuSO4)se obtuvo una colorcion violeta la reacción es  positiva

Tubo 6 (Grenetina Hidrolizada +  CuSO4) En la mezcla no se obtiene ningún tipo de color

Reacción de Ninhidrina

Tubo 1 (Agua destilada + ninhidrina)coloración amarilla

Tubo 2 (Grenetina Hidrolizada + ninhidrina)coloración café

Tubo 3 (Grenetina sin Hidrolizar + ninhidrina )presipitado blanco

Tubo 4 (solución de Albumina + ninhidrina)

Tubo 5 (Glicina + ninhidrina)coloración rosa claro

Reacción de Acido Nitroso

Tubo 1 (Grenetina hidrolizada + HCl + Nitrito de Sodio) presenta burbujeo es positiva

Tubo 2 (Grenetina sin hidrolizar + HCl + Nitrito de Sodio)tiene ligero burbujeo pro la reacción se considera negativa

Tubo 3 (Albumina HCl + Nitrito de Sodio)no presento cambios la reacción es negativa

Tubo 4 (HCl + Nitrito de Sodio)al no aver proteínas no ubo ningún cambio la reacion es negativa

Acción reguladora de aminoácidos en esta prueba se vera la resistencia a cambios de acidez y alcalinidad.

Prueba en acido

Tubo 1 grenetina hidrolisada con PH neutro con rojo congó   en 13 gotas cambio la coloración

Tubo 2 agua destilada  con rojo congó  3 gota cambio la coloración

Prueba de base

Tubo 1 agua con fenolftaleína con 1 gotas tubo una coloración rosa

Tubo 2  solución con Hidrolizado de grenetina neutralizada con fenolftaleína se torna a un color amarillo pero con una gota obtuvimos un vire de color rosa un poco fuerte

Análisis de resultados

Reacción Xantoproteica

Esta prueba es para comprobar si las proteínas tienen aminoácidos con grupos aromáticos

La reacción es debida a la nitración del anillo bencénico con el acido nítrico concentrado, para dar productos de color amarillo que se tornan anaranjados al añadir una base como el NaOH debido a la formación de sales.  La reacción se considera positiva si la mezcla toma un color amarillo.

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