Informe bacteriologico

INFORME DE TRACTO RESPIRATORIO

ESTEBAN SOTO MARIN

JUAN ANDRES COLORADO

DAVID SANTIAGO CARDONA

VALERIA AGUDELO CORRALES

BACTERIOLOGÍA

UNIVERSIDAD CATOLICA DE MANIZALES

PROGRAMA DE BACTERIOLOGÍA

MANIZALES, CALDAS

2020

ANTIBIOGRAMAS

Los tipos de antibiograma necesitan un inóculo que pueda estar estandarizado, estás generalmente se realizan habitualmente partiendo de bacterias aisladas en un cultivo purificado, aunque siguiendo las pautas de algunos autores proponen que los antibiogramas pueden realizarse directamente sobre las muestras clínicas, sin espera el aislamiento bacteriano, ya que estos nos pueden brindar un diagnóstico presuntivo que puede verificarse algunos estándares por lo tanto, se viene realizando estos procedimientos con los caldos de hemocultivo, muestras de orina y líquido cefalorraquídeo, examenes coprologicos entre otros

CONTROL DE CALIDAD EN ANTIBIOGRAMA

para poder realizar la lectura correcta de un antibiograma se debe previamente asegurar los estrictos protocolos de inocuidad para poder confiar en la viabilidad y exactitud al momento de realizar una lectura en la metodología usada y en los resultados para brindar un adecuado diagnóstico, además de brindar apoyo en el tratamiento, hay que tener en cuenta algunos parámetros tales como: verificar la fecha de caducidad de los sensidiscos, almacenar de manera adecuada, alteraciones en el inóculo en relación al patrón de turbidez  0.5 de la escala de Mcfarland, mala incubación y algunos parámetros que pueden influir drásticamente cómo la temperatura

Para tener mayor eficiencia, puede tenerse de referencia una cepa control, las cuales son recomendadas por la NCCLS, las denominadas ATCC o cepas de proveedor, cepas conocidas, las cuales se conoce su patrón de resistencia o sensibilidad, donde se ha establecido los rangos de diámetros en los que la zona de inhibición debe estar ubicado verificando que estén dentro de los rangos de las tablas, de lo contrario existirán variables que no se están teniendo en cuenta al momento de reportar sensibilidad o resistencia

TIPOS DE ANTIBIOGRAMAS

el E-TEST no es influído por el inóculo, por ende es muy utilizado y viable al momento de analizar directamente los inóculos de muestra estéril provenientes de alguna cavidad humana, esta consiste en una tira impregnada en una concentración progresiva de cualquier antibiótico, permitiendo visualizar entonces en la técnica de difusión en agar una concentración mínima inhibitoria (CIM) para la bacteria frente al fármaco de estudio

MICRODILUCIÓN EN CALDO

los primeros análisis que se realizaron empleando una cantidad considerable de tubos con caldo de cultivo, a los cuales se les proporcionaba diluciones crecientes de antibióticos, teniendo en cuenta el mismo fundamento

Las pruebas de dilución han sido utilizadas durante años. Los procedimientos iniciales eran realizados en tubos de ensayo grandes (13 por 100 mm) con volúmenes de caldo de por lo menos 1 ml.

DIFUSIÓN EN DISCO

Esta prueba maneja el mismo fundamento que la del E-TEST, son discos impregnados con distintos tipos de antibióticos de aproximadamente 5 mm, los cuales serán inoculados en el agar con la cepa problema anteriormente sembrada masivamente por toda la caja, por ende uno de los pasos más importantes es la preparación del inóculo, que se relaciona con la selección de colonias, ya que si se toman más de 2 la proporción de detectar resistencia es mayor, por ende debe seleccionarse muy bien, preparar su debida suspensión y estandarizarla para finalmente inocular en la placa

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Difusión en disco, imagen tomada de: https://www.paho.org/hq/dmdocuments/2005/susceptibilidad-antimicrobiana-manual-pruebas-2005.pdf

 Pruebas de Dilución en Agar de CIM  

En este método, generalmente el agente microbiano es incorporado al medio directamente, sumandole cada placa que contenga una concentración diferente al agente antimicrobiano, por ende los inóculos se pueden aplicar simultáneamente y rápidamente en la superficie del agar utilizando de 32 a 36 inóculos a cada placa, en este caso basándonos en el CLSI el agar mueller hinton, es preparado con un ph neutro, normalmente cuando es suplementado con sangre de cordero desfibrinada o sangre de caballo lisada en el caso del streptococcus pneumoniae

IDENTIFICACIÓN BACTERIAS TRACTO RESPIRATORIO

Para el diagnóstico de la faringitis estreptocócica, Se debe inocular una placa de agar sangre (carnero al 5%) con la torunda fijándose en hacer una buena rotación en unión, luego con ayuda del asa estéril se extiende la muestra por los otros 3 cuadrantes que quedan de la placa y varias incisiones en el medio para observar una beta hemolisis que caracteriza la presencia de S. pyogenes  

Teniendo en cuenta que en la infección estreptocócica se encuentran cepas de S. pyogenes y S dysgalactiae subsp las cuales son deficientes al momento de producir hemólisis en agar sangre para favorecer se utilizan medios selectivos y diferenciales con colistina, ácido nalidíxico y pH 7,5 ajustado con tampón PIPES (CNA-P).  

Para diferenciar S. pyogenes de otros estreptococos b hemolíticos se pueden usar distintos métodos, como la bacitracina la cual se basa en colocación de un disco que contiene 0,04 µ de bacitracina sobre la colonia aislada. En su resultado se determina su susceptibilidad por medio de la medida del halo de inhibición de crecimiento Esta técnica tiene 5% de falsos negativos, pero entre 10 y 20% de falsos positivos ya que hay otros Streptococcus (grupos C y G), que también son susceptibles

También se puede identificar por medio del test PYR el cual se basa en la actividad de la enzima pirronilodil aminopeptidasa producida por la bacteria, en este caso el s. pyogenes que es el único que la sintetiza, en el ensayo inmunoenzimático se identifican los antígenos de carbohidrato de la pared grupo-específicos mediante serología, sobre colonias aisladas, además también por medio de este se pueden identificar Streptococcus del grupo C y G, así por medio de este lograr diferenciar las colonias pequeñas del grupo A que no son pertenecientes a S. pyogenes sino Streptococcus del grupo anginosus, los de este grupos dan abscesos en otras localizaciones, sin embargo comienzan en la faringe

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